扁擔桿提取物體內抗腫瘤作用研究

摘 要：目的：研究藥用植物扁擔桿提取物體內抗腫瘤作用。方法：采用小鼠宮頸癌（U14）移植性腫瘤模型，觀察扁擔桿根皮乙醇提取物及其不同極性溶劑萃取物對腫瘤生長的抑制作用。結果：小鼠灌服扁擔桿提取物10d后，總提取物及其水部位的中、高劑量組可明顯抑制U14移植性腫瘤的生長，與陰性對照組相比，有顯著性差異（P＜0.01）。結論：扁擔桿提取物具有抗小鼠宮頸癌（U14）移植性腫瘤生長作用。

關鍵詞：扁擔桿提取物；抗腫瘤；小鼠宮頸癌U14

中圖分類號：R730.52文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2008）07-021-02

扁擔桿 (Grewiabiloba G.Don) 為椴樹科 (Tiliaceae) 扁擔桿屬(Grewia)植物，主要分布于江西、湖南、浙江和廣東等省［1］。在非洲和亞洲一些國家地區，部分扁擔桿屬植物被作為民間草藥使用，多具有抗菌消炎作用。如南非的Grewia occidentalis和巴基斯坦的Grewia erythraea在民間作為傳統草藥治療傷口細菌感染［2，3］；Grewia bicolor在蘇丹作為傳統草藥治療皮膚膿胞瘡，還有鎮靜作用［4］；《新修本草》記載扁擔桿的變種小花扁擔桿枝葉煮汁可治小兒蛔蟲病；《開寶本草》稱其可“主三蟲，下氣消谷”［5］；《中藥大辭典》記載其全株和枝葉能祛風除濕、理氣消痞，可治小兒因蟲疳積、大人氣痞、脾虛食少、婦女崩帶、風濕［6］。扁擔桿的根皮在江西部分地區，民間用來治療皮膚膿胞瘡等細菌感染。但關于扁擔桿的抗腫瘤作用研究還未見報道，本文首次報道了扁擔桿根皮乙醇提取物對小鼠宮頸癌（U14）移植性腫瘤生長的抑制活性。

1 實驗材料

1.1 實驗藥品和試劑

扁擔桿根皮藥材于2006年8月采自江西省萍鄉市，原植物由安徽中醫學院藥學院劉守金副教授鑒定為扁擔桿(Grewia biloba G.Don)，憑證標本（No.060801）保存于江西中醫學院現代中藥制劑教育部重點實驗室；環磷酰胺(CTX)（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司生產，批號：07102521）。

1.2 實驗動物及瘤株

昆明種小鼠，雌性，普通級，體重(20±2.0)g，購于南昌大學醫學院醫學實驗動物科學部；小鼠宮頸癌（U14）腫瘤，購于中國醫學科學院藥物研究所。

1.3 儀器

TG328A型萬分之一電子天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司)；HHS型電熱恒溫水浴鍋 (上海博迅實業有限公司醫療設備廠)；XS-212型顯微鏡 (江南光電(集團)股份有限公司)。

2 方法

2.1 提取物制備

將扁擔桿干燥根皮5.5kg粉碎，用90%乙醇溶液加熱回流提取3次，每次2h，合并提取液，濾過，濃縮，干燥，得總浸膏550g。將總浸膏用水溶解混懸，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，將乙酸乙酯、正丁醇萃取液和剩余的水相溶液濃縮、干燥，得乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。每克總浸膏相當于10克生藥，用時以生理鹽水配成所需濃度。

2.2 體內抗腫瘤實驗［7］

無菌條件下抽取傳代7～9d生長良好的U14的小鼠腹水，用生理鹽水按1∶4稀釋成細胞懸液(細胞數為2.5～3×107／mL)，每只小鼠右腋皮下接種0.2mL。接種后隨機分成生理鹽水模型對照（NS）組、環磷酰胺（CTX，25mg#8226;kg-1#8226;d-1）組、高（500mg#8226;kg-1#8226;d-1）、中（250mg#8226;kg-1#8226;d-1）、低（100mg#8226;kg-1#8226;d-1）劑量給藥組，每組10只。接種24h后開始灌服給藥，每天固定時間段給藥1次并記錄小鼠的活動情況。給藥前稱體重，連續給藥10d，末次給藥24h后稱體重，處死，完整剝離腫瘤、肝臟、脾臟、胸腺等組織，經生理鹽水洗滌后用濾紙吸干稱重，計算抑瘤率和免疫器官指數（脾臟指數和胸腺指數）。

抑瘤率(％) = (對照組平均瘤重-實驗組平均瘤重)／對照組平均瘤重×100％。

胸腺指數 = 胸腺重量 (mg)／體重 (g)；

脾臟指數 = 脾臟重量 (mg)／體重 (g)。

2.3 統計學處理

所得數據用SPSS13.0 統計軟件進行單因數方差分析處理，數據用x±s表示，實驗組與對照組比較用t檢驗。

3 結果

3.1 模型評定

模型符合要求［7］，實體瘤生長良好，陰性對照組小鼠平均瘤重＞1.0g。陽性對照組有明顯抗實體瘤生長作用，抑瘤率＞40%。

3.2 小鼠活動情況觀察

CTX組小鼠進食量較陰性對照組明顯減少，毛發干枯、蓬松、無光澤，且有中度腹瀉，體質消瘦，活動遲緩。而總浸膏組、水部位組小鼠較陰性對照組活動敏捷，進食量增加。

3.3 對小鼠移植瘤U14的抑制作用

結果表明扁擔桿總提取物和水部位的3個不同劑量組對小鼠U14腫瘤均有較強的抑制作用，且呈現明顯的量效關系，和陰性對照組相比均有顯著性差異(P＜0.01)。其中高劑量組500mg/kg (相當于生藥5g/kg)、中劑量組250mg/kg (相當于生藥2.5g/kg) 的抑瘤率均大于30%（見表1）。

4 討論

本實驗研究表明，扁擔桿總提取物和水部位組平均瘤重明顯低于陰性對照組，其高、中劑量組對小鼠宮頸癌（U14）的抑制率均＞30%，與陰性對照組相比有顯著性差異 (P＜0.01)，且不同劑量組之間呈現明顯的量效關系。根據中草藥提取物抗癌有效的一般標準［7］（實體瘤抑瘤率＞30%，統計學分析有顯著性差異），扁擔桿乙醇提取物具有明顯的抗小鼠宮頸癌（U14）作用，其活性部位為水部位。

參考文獻：

［1］ 中國科學院中國植物志編輯委員會.中國植物志(第一分冊)［M］.北京：科學出版社，1989：89.

［2］ D.S.Grierson，A.J.Afolayan.Antibacterial activity of some indigenous plants used for the treatment of wounds in the Eastern Cape，South Africa ［J］.Journal of Ethnopharmacology，1999，66(1)：103~106.

［3］ Mudassir A.Zaidi，Sidney A.Crow Jr.Biologically active traditional medicinal herbs from Balochistan，Pakistan ［J］.Journal of Ethnopharmacology，2005，96(1)：331~334.

［4］ M.W.J.M.Jaspers，A.K.Bashir，J.H.Zwaving，etal.Investigation of Grewia bicolor juss ［J］.Journal of Ethnopharmacology，1986，17(3)：205~211.

［5］ 唐慎微.經史證類備急本草［M］.北京：人民衛生出版社，1975：354.

［6］ 江蘇新醫學院編.中藥大辭典［M］.上海：科技出版社，1986：1747.

［7］ 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學（第3版）［M］.北京：人民衛生出版社，2002：1757~1783.

（責任編輯：姜付平）