芪桂益脈靈對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷模型一氧化氮的影響及其心肌保護(hù)機(jī)制探討

摘 要 目的：探討芪桂益脈靈(黃芪、桂枝等)對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷藥理預(yù)適應(yīng)的保護(hù)作用及與NO的關(guān)系。方法：采用大鼠心肌缺血再灌注經(jīng)典模型。測(cè)定血清中NO、CK、CK-MB的含量。結(jié)果：芪桂益脈靈高、低劑量組CK、CK-MB含量低于I/R組，低劑量組的含量與IPC組相當(dāng)，而高劑量組的含量明顯高于IPC組；同時(shí)，高、低劑量組的NO含量均高于I/R組和IPC組。結(jié)論：芪桂益脈靈可以誘導(dǎo)心肌早期預(yù)適應(yīng)，使心肌細(xì)胞生成大量NO，觸發(fā)其對(duì)心肌的保護(hù)機(jī)制，達(dá)到藥理預(yù)適應(yīng)的目的。

關(guān)鍵詞 芪桂益脈靈 藥理預(yù)適應(yīng) 一氧化氮 大鼠

材料和方法

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：普通Wister大鼠60只，雌雄各半，200～250g/只，由沈陽(yáng)市雙義實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供。

藥劑制備：芪桂益脈靈由黃芪、桂枝、苦參、三七等組成。芪桂益脈靈低劑量組按人與大鼠體表面積比例1∶0.018，將藥物用水煎，然后濃縮成3ml，相當(dāng)于1g/kg的生藥量；芪桂益脈靈高劑量組所含有的生藥量是低劑量的2倍。消心痛按人與大鼠體表面積比例1∶0.018，將藥物溶于3ml的生理鹽水中，相當(dāng)于2.7mg/kg消心痛。

實(shí)驗(yàn)儀器：動(dòng)物人工呼吸機(jī)、全自動(dòng)人工生化分析儀、低溫離心機(jī)、電熱恒溫水箱、干燥箱、RM-6200四道生理記錄儀，分光光度計(jì)，電子天平。

模型制備：用20%烏拉坦(2ml/kg)腹腔麻醉大鼠。連接四道生理記錄儀，暴露左頸總動(dòng)脈，插動(dòng)脈套管以檢測(cè)血壓。行氣管插管連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，頻率90次/分，潮氣量12ml，呼吸比為1∶1。連續(xù)記錄冠狀動(dòng)脈結(jié)扎前后及再通后的心電圖。觀察室速、室顫的起始時(shí)間和持續(xù)時(shí)間。動(dòng)脈血壓和心電圖均同步記錄于四道生理記錄儀。缺血的標(biāo)志為ST段抬高，出現(xiàn)心律失常，左室發(fā)紺；再灌注的標(biāo)志為抬高的ST段恢復(fù)，心律恢復(fù)，發(fā)紺區(qū)變紅。

實(shí)驗(yàn)分組：將60只大鼠隨機(jī)分為6組并編號(hào)，每組10只，每日清晨空腹灌胃給藥1次，連續(xù)7日。除給藥組外，其余各組均灌服與體重相符的生理鹽水。

指標(biāo)測(cè)定：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，在腹主動(dòng)脈取血3ml，然后離心取上清液，采用硝酸還原酶法測(cè)定NO含量，試劑盒由南京建成生物有限公司提供。用全自動(dòng)生化分析儀按照試劑盒說明操作進(jìn)行測(cè)定CK、CK-MB，試劑盒由中生北控生物科技股份有限公司提供。

統(tǒng)計(jì)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。數(shù)據(jù)用 X±S表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。

結(jié) 果

芪桂益脈靈對(duì)缺血再灌注大鼠血清CK、CK-MB含量的影響：高、低劑量組的CK、CK-MB含量均低于I/R組，差異顯著，P<0.01；低劑量組與IPC組及消心痛組相比無明顯差異性，P>0.05；高劑量組的含量高于IPC組，差異顯著，P<0.05。

芪桂益脈靈對(duì)缺血再灌注大鼠血清NO含量的影響：我們可以發(fā)現(xiàn)，高、低劑量組的NO含量均高于I/R組、Sham組，差異顯著，P<0.01；高、低劑量組與IPC組相比，NO含量明顯增高，P<0.01；與消心痛組相比，NO含量增高，但差異不顯著，P>0.05。

討 論

芪桂益脈靈中含有黃芪、三七等藥物，黃芪具有益氣作用，與桂枝相伍可益氣溫陽(yáng)，通脈定痛；同時(shí)黃芪又可以補(bǔ)氣，三七亦可以活血化瘀止痛。臨床上有研究報(bào)道顯示[1，2]，黃芪對(duì)心肌缺血再灌注具有保護(hù)作用。

在本實(shí)驗(yàn)中，芪桂益脈靈高、低劑量組NO的含量均高于I/R組，和IPC組、消心痛組相比無明顯的差異性。推斷出芪桂益脈靈也可以誘導(dǎo)心肌細(xì)胞生成NO，使體內(nèi)NO含量增加，達(dá)到藥理預(yù)適應(yīng)的目的。且與消心痛等硝酸酯類藥物提供的外源性NO相比，可能具有相同的功效，具有藥理預(yù)適應(yīng)心肌保護(hù)作用。

參考文獻(xiàn)

1 關(guān)鳳英，等.黃芪甲苷對(duì)新生乳鼠心肌細(xì)胞過氧化氫損傷的保護(hù)作用.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，33(2)：211-214.

2 廖菁，黃政德，易剛強(qiáng)，等.三七注射液對(duì)兔缺血再灌注損傷的延遲預(yù)處理作用及信號(hào)機(jī)制研究.中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志，2006，12(6)：429-432.