摘要:設計了4種飼料配方飼養紅鈴蟲。結果表明,以取食A、B配方的紅鈴蟲幼蟲成活率最高,分別為65.0%和68.1%;取食A配方的幼蟲期最短,為18.57 d,平均蛹重18.7 mg,與紅鈴蟲田間種群及Adkisson飼養的蛹重差別不大,可以滿足室內試驗需要;經過連續4代飼養后,含麥胚的飼料配方可以使幼蟲期穩定在19 d左右、蛹重穩定在18 mg以上,是目前能夠穩定人工飼養紅鈴蟲的最合適飼料。
關鍵詞:棉紅鈴蟲;生長歷期;存活率;人工飼養
中圖分類號:S435.622+.2文獻標識碼:B文章編號:0439-8114(2008)07-0797-03
Technique for Rearing the Pink Bollworm (Pcetinophora gossypiella)with Artificial Diet
WU Jin-ping,WU Huai-heng,WAN Peng,HUANG Min-song
(Institute of Plant Protection and Soil Science, Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430064,China)
Abstract: Technique for rearing the pink bollworm, Pectinophora gossypiella (Saund.), is reported. Firstly, composition of an artificial medium for laboratory cultures of the pink bollworm, Pectinophora gossypiella (Saund.), is given. The ameliorated composition of wheat germ diets is included in order to depress the diet cost. Compared with the those reared with B,C and D, average duration of the larval life history stage is the shortest when reared with A wheat germ diet, only 18.57days. Average pupal weight is 18.7mg for these reared on the same medium, which is close to the data from field and Adkisson’s. Furthermore, continuously rearing four generations ulteriorly shows the pink bollworm can be reared steadily by A wheat germ diet, average duration of the larval stage and average pupal weight are 18.97days and 0.0187g respectively. It should be cautious to use antiseptic in making the wheat germ diets.
Key words: pink bollworm; (pectinophora gossypiella. Saund.); larval duration;survival rate;rartificial diets
在長江流域棉區,紅鈴蟲是一種非常重要的寡食性害蟲,在自然條件下一般只危害棉花的蕾、花和鈴,給當地的棉花生產造成了嚴重的損失[1]。調查表明,在轉Bt基因棉花種植以前,由紅鈴蟲危害造成的經濟損失一般為10%~30%左右[2],而在轉Bt
基因棉大面積推廣種植以后,紅鈴蟲對棉花的危害顯著下降[3],但由此而引起的紅鈴蟲對轉Bt基因棉抗性的發展受到了廣泛關注[4]。因此,有必要就紅鈴蟲對cry1Ac蛋白的抗性遺傳規律進行研究,在進行該項研究之前首先要掌握紅鈴蟲的室內人工飼養技術。關于紅鈴蟲人工飼料的配方及室內飼養技術國外已有大量報道[5,6],并且相關技術非常成熟。在國內,陸伊文[7]于1980年首次報道了應用棉子粉加蛋白質飼料作為紅鈴蟲的人工飼料,成功飼養了600多頭幼蟲,由于飼料中含有紅鈴蟲的天然寄主成分,取材相對困難,故無法將該技術進行大規模的應用。束春娥[8]和李文谷等[9]將該技術進行了改進,用麥胚飼料飼養紅鈴蟲,連續飼養了上萬頭幼蟲,但該技術尚未被運用。至此,在國內仍無法實現室內長期飼養紅鈴蟲。從2003年起,我們開始了紅鈴蟲人工飼料配方及飼養技術的研究,目前用人工飼料已連續飼養了30代以上。
1材料與方法
1.1供試蟲源
2003年將采自湖北省潛江縣棉田的紅鈴蟲老熟幼蟲帶回室內,置于29±1℃,L∶D=14∶10 h,相對濕度為60%的條件下打破滯育。待紅鈴蟲老熟幼蟲化蛹后,將蛹揀于一端用細紗密封、直徑為15 cm的圓柱形產卵罐中,同時向產卵罐投入5%的蜂蜜水以供羽化后的成蟲取食。一旦成蟲開始羽化,即將濾紙置于產卵罐的細紗上,用重物壓住以用于卵的收集。待產卵開始后,每天揭下有卵的濾紙,放入干凈的罐頭瓶內孵化,同時在產卵罐蓋上新的濾紙。
1.2飼料組成
本試驗所用的麥胚飼料主要依據Adkisson等[5]的配方改進而來。飼料組成:麥胚(南京面粉廠),大麥和黃豆(湖北省農科院糧食作物研究所),百花蜂蜜(湖北大華蜂業有限公司),福臨門玉米油(東海糧油工業張家港有限公司),啤酒酵母(湖北安琪酵母股份有限公司),瓊脂(福建省莆田市秀嶼區平海瓊脂廠),干酪素(北京奧博星生物技術有限責任公司),α-纖維素和尼泊金(西隴化工有限公司),蔗糖、山梨酸鉀、苯甲酸和苯甲酸鈉(北京化學試劑公司),泛酸鈣(天津市博迪化工有限公司),煙酸(上海藍季科技發展有限公司),核黃素(天津市化學試劑公司分公司),鹽酸吡多辛(天津市化學試劑公司分公司),硫胺素鹽酸鹽(上海崇明裕西廠),氯化膽堿(上海三愛思試劑有限公司),抗壞血酸(天津市科密歐化學試劑有限公司),生物素(浙江康普達生物科技有限公司)和維生素B12(浙江康普達生物科技有限公司)。復合維生素的組成見表1。

1.3飼料配方
試驗設4個配方:A,麥胚+干酪素+山梨酸鉀+尼泊金;B,大麥+干酪素+山梨酸鉀+尼泊金;C,麥胚+黃豆粉+山梨酸鉀+尼泊金;D,麥胚+防腐劑+苯甲酸+苯甲酸鈉(表2)。配置方法:先用電子天平準確稱量各種固體配料,然后將瓊脂溶解在足夠的水中加熱至沸騰,其余固體成分在燒杯中充分混勻并加入玉米油、蜂蜜再次混勻,最后將溶化好的瓊脂加入混合物中攪拌均勻。

1.4接蟲
將配好的飼料切成蘿卜條狀(約4 g),裝入長75 mm、內徑20 mm的養蟲管內,用精致毛刷接入紅鈴蟲初孵幼蟲,每管接1頭,用干凈、滅菌棉塞塞緊,以防幼蟲逃走。然后放置在29±1℃、L∶D=14∶10 h,相對濕度60%的條件下飼養。飼養過程中如發現個別管內飼料干枯,可用鑷子補充一小塊新鮮飼料,幼蟲即可繼續取食成長[2]。每個配方接蟲50頭,重復3次。每個試管標號,每天觀察記錄以確定幼蟲每一個生長階段的歷期。
2結果與分析
2.14種飼料配方飼養紅鈴蟲的結果
從表3可以看出,以B配方的紅鈴蟲幼蟲成活率最高,達68.10%;D配方成活率最低,只有24.70%。A、B兩配方的幼蟲存活率無顯著差異,但極顯著地高于C、D兩配方。對不同處理的平均幼蟲期分析表明,取食A配方的幼蟲期最短,為18.57 d、取食B配方的最長,為49.29 d。不同處理之間幼蟲的平均歷期具有極顯著差異(P<0.01)。在蛹重和蛹期方面,以A配方的蛹重最高,為0.02 g,顯著高于其他處理(P<0.05);D配方的蛹期最短,為10.09 d,與A配方無顯著差異,但低于其他處理。成蟲性比差異很小,均接近1∶1。羽化率穩定在80%以上。
2.2A配方飼料連續飼養紅鈴蟲的結果
麥胚飼料連續飼養紅鈴蟲的結果列于表4。從表中可知,1~4代連續飼養的幼蟲成活率逐漸提高,至第4代時已超過75%。從幼蟲期、蛹期和產卵量看,第3代與第4代幼蟲期差異不顯著(P>0.05)。不同代別間蛹期和成蟲產卵量無顯著差異(P>0.05)。從性比和羽化率看,差異都不大,性比維持在1∶1左右,羽化率最高為95.27%,最低為87.55%(表4)。

2.3不同飼料飼養紅鈴蟲的結果比較
從表5可知,F4代飼養與田間采集、Adkisson飼養[5]比較,除單雌產卵量(70.6粒)較高外,其余3項均相差不大。另外,Adkisson飼養的成活率可達到81%[5],我們目前最高存活率也已達到了75%以上。

3討論
目前用麥胚飼料飼養紅鈴蟲雖然效果較好,但是大批量飼養時昂貴的麥胚酪元飼料將成為限制因素。如果以大麥及黃豆粉分別代替麥胚和酪元飼養紅鈴蟲,效果并不理想。而以黃豆粉替代純酪元是目前國外飼料配方之一。在Miller[6]1996年報道中,其配方以黃豆粉為主要成分,幼蟲生長情況良好。因此我們有必要進一步摸索。
在防腐劑的選擇方面,避免使用福爾馬林,以克服飼料中福爾馬林的刺激氣味[3]。我們選擇了尼泊金、山梨酸鉀和苯甲酸、苯甲酸鈉兩組進行比較,結果D配方的存活率低,主要是由于飼料發霉所致,可見防腐劑的種類對防腐效果有一定影響。從目前的情況來看,以A配方飼養的紅鈴蟲幼蟲在連續飼養4代后,幼蟲成活率基本穩定在70%以上,而且幼蟲生長發育整齊,化蛹集中,成蟲發育正常,基本可以滿足室內試驗的需要。
參考文獻:
[1]曹赤陽,何本極,朱深甫著.紅鈴蟲防治理論研究與實踐[M].南京:江蘇科學技術出版社,1991.
[2]王瑞琪,黃民松,樊孝賢.江漢平原地膜棉田二代紅鈴蟲種群動態研究[J].棉花學報,1998,10(6):312-315.
[3]WAN P,WU K M, HUANG M S, et al. Seasonal pattern of infestation by pink bollworm Pectinophora gossypiella (Saunders) in field plots of Bt transgenic cotton in the Yangtze River valley of China[J]. Crop Prot.,2004,23:463-467.
[4]梁革梅,王桂榮,徐廣,等.昆蟲Bt毒素受體蛋白的研究進展[J].昆蟲學報,2003,46(3):390-396.
[5]ADKISSON P L,VANDERZAT E S,BULL D L,et al.A wheat germ medium for rearing the pink bollworm[J].Jour Econ Ent,1960,53(5):759-62.
[6]MILLER E,STEWART F,LOWE A. New Method of Processing Diet for Rearing PBW[J]. J Agroc Entomol,1996,13(2):129-36.
[7]陸伊文,曹赤陽.紅鈴蟲人工飼料飼養技術[J].植物保護,1980,6(2):13-15.
[8]束春娥,曹赤陽,萬演,等.棉紅鈴蟲人工飼養技術的改進研究[J].植物保護,1988,14(1):14-16.
[9]李文谷,酈一平,黃昌本,等.棉紅鈴蟲人工飼養研究(Ⅱ).麥胚飼料群養技術[J].植物保護,1990,16(6):9-11.