中藥對冠心病血漿內皮素影響的實驗研究

摘 要 目的：觀察中藥通冠顆粒對急性心肌缺血兔血漿內皮素(ET)的影響。方法：5組健康家兔分別給予生理鹽水、小劑量通冠顆粒、大劑量通冠顆粒、合心爽片，通過結扎麻醉兔的冠狀動脈左前降支中段，造成急性心肌缺血模型；另一組給予生理鹽水，不結扎。于不同時相同步采血測量其ET水平變化。結果：結扎前通冠顆粒組和合心爽片組家兔的ET水平均低于空白組，在結扎后的各時相，結扎組、通冠顆粒兩組、合心爽片組ET升高程度小于空白組。結論：家兔心肌缺血時存在血管內皮功能失調，此時ET增多，而通冠顆粒能通過調整ET釋放而保護血管內皮細胞，改善心肌缺血，從而達到防治冠心病的作用。

關鍵詞 通冠顆粒 心肌缺血 內皮功能

血管內皮細胞產生的內皮素(ET)是已知作用最強和效應最持久的內源性血管活性肽，低劑量時引起血管舒張，高劑量時引起顯著且持續的血管收縮。ET還可以引起平滑肌細胞增殖。目前已發現內皮素與冠心病(CHD)、高血壓、動脈粥樣硬化、充血性心力衰竭、心肌肥厚、冠脈成形術后再狹窄等疾病相關。

資料與方法

實驗試劑：ET試劑盒由解放軍總醫院東亞免疫技術研究所提供。

實驗儀器：6511 型心電圖記錄儀，日本光電公司；SANYO MDF-382E超低溫冰箱，日本三洋公司生產；Heraens Bifugezsrs 型低溫離心機，德國海爾公司生產；SN-695B型智能放免γ測量儀，上海原子核研究所日環儀器一廠生產。

中藥通冠顆粒組成及煎制方法：紅參15g，黃芪25g，當歸15g，紅花10g，丹參20g，血藤20g，川芎20g，元胡15g，郁金15g，桃仁15g，栝蔞15g，棗仁20g，遠志15g，白芍15g。由江陰天江藥業有限公司提供，用噴霧干燥法制成清顆粒劑，開水沖服。

西藥：合心爽片由天津田邊制藥廠提供。批號：0212099。

實驗動物及分組：健康新西蘭大耳白兔，雌雄不拘，共40只，體重2.5±0.2kg，為二級動物，由我院實驗動物中心提供。隨機分為5組：①空白對照組；②模型心肌缺血組；③通冠顆粒低劑量組；④通冠顆粒高劑量組；⑤陽性對照組。

動物造模：參照文獻^[1]方法進行。取家兔稱重，用烏拉坦3.3mg/kg腹腔麻醉后固定于手術臺，將針狀電極插入四肢皮下，并調節心電圖靈敏度至1mV=15mm，紙速為50mm/秒，記錄結扎前5分鐘Ⅱ導聯心電圖，然后剪毛、消毒、鋪巾，無菌操作，在胸骨左緣旁縱行切開第3～5肋骨，暴露跳動的心臟，剪開心包膜，于冠狀動脈左前降支中段旁進針，絲線穿過心肌表層，在對側出針，將直徑2mm的塑料管置于結扎線與血管之間，拉緊結扎線，使塑料管壓迫血管引起冠脈閉塞(正常對照組不結扎)，檢查無出血，逐層關閉胸腔，造成急性心肌缺血，記錄結扎后心電圖。并于結扎前15分鐘、結扎后30分鐘抽取血液，檢測內皮素水平，采用放射免疫法，具體操作按說明書進行。

給藥方法：①空白對照組，用生理鹽水3ml/kg；②模型心肌缺血組，用生理鹽水3ml/kg，結扎不灌藥；③通冠顆粒低劑量組，相當于生藥量8.21g/kg；④通冠顆粒高劑量組，相當于生藥量16.42g/kg；⑤西藥組：合心爽2.82mg/kg。上述藥物在試驗前用生理鹽水制成等體積(3ml/kg)混懸液備用，然后對動物進行灌胃給藥，中藥組、西藥組連續給藥6天，末次給藥后1小時對動物進行造模，復制急性心肌缺血模型。

觀測指標：血漿ET的測定：放射免疫法，具體操作如下：取靜脈血2ml，注入含10%EDTA二鈉3μl 和抑肽酶40μl的試管中，混勻，4℃，3000次/分離心10分鐘，分離血漿，測定前，使樣本置于室溫或冰水中復融，再次4℃，3000次/分，離心5分鐘，取上清測定。

數據處理：結果用X±S表示，顯著性比較采用SPSS統計軟件包行t檢驗。

結果與分析

心電圖：冠脈結扎前描記到正常心電圖，ST段位于等電位線，結扎冠狀動脈后可見ST段弓背上抬，T波逐漸高聳，整個缺血期缺血性ST-T變化非常明顯，表明家兔急性心肌缺血模型造成。

ET數據統計：見表1。

結扎后：模型心肌缺血組血漿ET值明顯高于空白對照組，與空白對照組比較P<0.01，差異有顯著性，提示缺血心肌存在內皮功能失調(ET水平升高)的病理現象。低劑量和高劑量中藥組與模型組比較差異均有顯著性(P<0.05和P<0.01)。西藥組與模型組比較P<0.01，差異有顯著性。高劑量中藥組與西藥組之間差異無顯著性，P>0.05。西藥組與低劑量中藥組之間差異有顯著性，P<0.01。高劑量組與低劑量中藥組之間差異有顯著性P<0.01。低劑量中藥組與高劑量中藥組之間差異無顯著性，P>0.05。

實驗結果表明：缺血心肌存在內皮功能失調(ET水平升高)的病理現象，中藥通冠顆粒能明顯拮抗急性心肌缺血家兔血漿ET水平。高劑量通冠顆粒作用更強，其作用與西藥合心爽片的作用相當，并明顯強于低劑量通冠顆粒組。

討 論

已有研究發現冠脈急性缺血的發作，與冠脈狹窄相關性差，而與內皮功能障礙關系密切^[2]。通過本實驗可以看出，結扎冠脈后血漿ET明顯增高，與空白對照組有顯著性差異(P<0.01)，提示缺血心肌存在內皮功能失調的病理現象。中藥組和西藥組均可使急性心肌缺血兔血漿ET水平下降，與模型心肌缺血組比較P<0.01，隨中藥劑量的增加，ET水平逐漸下降，且低劑量和高劑量中藥組比較有顯著性差異(P<0.01)，大劑量中藥組與西藥組之間無顯著性差異(P>0.05)。說明通冠顆粒能通過調整ET而改善其血管內皮功能，為通冠顆粒防治缺血性心臟病提供一定的理論依據。

參考文獻

1 李儀奎，編.中藥藥理實驗方法學.上海：上海科學技術出版社，1991：125.

2 李寰.內皮功能障礙與冠脈疾病.心血管病學進展，2001，22(1)：42.