凍瘡消酊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

2008-12-31 00:00:00宋麗莉黃惠蓮

亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2008年10期

（廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司，廣東廣州 510450）

摘要：目的：控制凍瘡消酊的質(zhì)量，建立紅花的薄層色譜鑒別和樟腦、冰片的氣相色譜含量測(cè)定方法。方法：采用薄層色譜法，鑒別紅花藥材；用氣相色譜法測(cè)定樟腦、冰片中的樟腦與龍腦含量。結(jié)果：樟腦在0.858~17.130g之間呈良好的線性關(guān)系，龍腦在0.915~12.052g之間呈良好的線性關(guān)系；樟腦的回收率為97.97%，龍腦的回收率為 97.66%。結(jié)論：本質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)能有效地控制凍瘡消酊的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：凍瘡消酊；薄層色譜法；氣相色譜法

中圖分類(lèi)號(hào)：R927.11文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673-2197（2008）10-0019-02

凍瘡消酊是由紅花、肉桂油、樟腦、冰片等組成的中藥復(fù)方制劑，具有活血祛瘀、止癢止痛、消腫的作用。臨床上主要用于凍瘡、褥瘡的治療。本文采用薄層色譜法和氣相色譜法對(duì)凍瘡消酊進(jìn)行更好的質(zhì)量監(jiān)控。

1 儀器、試藥與藥品

HP5890A型氣相色譜儀；檢測(cè)器FID；HW-2000型色譜工作站；不銹鋼毛細(xì)管柱（內(nèi)徑0.25mm，長(zhǎng)度30m，膜厚度0.25μm）HP-INNOWAX；METTLER AE240十萬(wàn)分之一型電子天秤；CMAG REPROSTARⅡ型號(hào)成像系統(tǒng)；硅膠G板（青島海洋化工廠）；紅花對(duì)照藥材（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：120907-200609）；水楊酸甲酯對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110707-200609）；龍腦對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110881-200504）；樟腦對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：747-200106），無(wú)水乙醇為分析純，廣州市化學(xué)試劑廠；凍瘡消酊及陰性對(duì)照（廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)：071101、071201、071202）

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 紅花薄層色譜鑒別

（1）供試品溶液的制備：取精密量取本品5mL置分液漏斗中，加水5mL，用石油醚（60~90℃）振搖提取3次，每次15mL，合并石油醚液（備用），取下層液，蒸干，殘?jiān)?0%丙酮1mL溶解，作為供試品溶液。

（2）對(duì)照品溶液的制備：取紅花對(duì)照藥材0.5g，加70%乙醇10mL，超聲處理10min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)?0%丙酮1mL溶解，作為對(duì)照品溶液。

（3）陰性溶液的制備：取缺紅花的樣品，同供試品溶液制法制成紅花陰性溶液。

（4）色譜條件：照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，吸取上述溶液各4μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-甲醇-水（5∶1∶6）的上層液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，顯相同的黃綠色熒光斑點(diǎn)。陰性無(wú)干擾。結(jié)果見(jiàn)圖1。

圖1 紅花薄層色譜圖

1、2、3、凍瘡消酊樣品（批號(hào)：070901、070902、070903），4、紅花對(duì)照藥材，5、陰性對(duì)照溶液

2.2 樟腦和冰片的含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件

色譜柱：不銹鋼毛細(xì)管柱（內(nèi)徑0.25mm，長(zhǎng)度30m，膜厚度0.25μm）HP-INNOWAX；柱溫：150℃；FID檢測(cè)器溫度：190℃；進(jìn)樣口溫度：190℃，氮?dú)饬髁浚?0mL#8226;min^-1；氫氣壓力為160kPa；空氣壓力為260kPa。

2.2.2 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

取水楊酸甲酯對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加無(wú)水乙醇制成每1mL含水楊酸甲酯5mg的溶液，作為內(nèi)標(biāo)溶液。

2.2.3 對(duì)照品溶液的制備

（1）樟腦對(duì)照品溶液的制備取樟腦對(duì)照品60mg，精密稱(chēng)定，置10mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

（2）龍腦對(duì)照品溶液的制備取龍腦對(duì)照品30mg，精密稱(chēng)定，置10mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2.4 供試品溶液的制備

取鑒別項(xiàng)下的石油醚液，揮干，殘?jiān)脙?nèi)標(biāo)溶液溶解定容至10mL，搖勻，作為供試品溶液。同法制得分別缺樟腦與冰片的陰性對(duì)照溶液。

2.2.5 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

在上述色譜條件下，分別取對(duì)照品溶液、供試品溶液及缺樟腦與冰片的陰性對(duì)照品溶液進(jìn)樣，理論板數(shù)按樟腦和龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于1900。色譜圖見(jiàn)圖2。

圖2 凍瘡消酊樣品溶液（A），缺樟腦對(duì)照品溶液（B）

缺龍腦對(duì)照品溶液（C）的GC圖譜

2.2.6 線性關(guān)系考察

精密稱(chēng)取樟腦對(duì)照品適量，加內(nèi)標(biāo)溶液配制成每1mL各含0.856mg、1.713mg、3.426mg、5.139mg、6.852mg、13.704mg、17.130mg的樟腦對(duì)照溶液；精密稱(chēng)取龍腦對(duì)照品適量，加內(nèi)標(biāo)溶液配制成每1mL各含0.915mg、1.830mg、2.745mg、4.821mg、7.319mg、9.038mg、12.052mg的龍腦對(duì)照溶液。分別吸取1μL注入氣相色譜儀中，按上述色譜條件測(cè)定各峰面積。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，各對(duì)照品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算得回歸方程：

樟腦：Y=5.7814×104X+3.978×104，r=0.9997

龍腦：Y=8.9734×104X+4.2688×104，r=0.9997

表明樟腦在0.858~17.130μg、龍腦在0.915~12.052μg與峰面積的線性關(guān)系良好。

2.2.7 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液1μL，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定峰面積值，計(jì)算得樟腦與龍腦的峰面積分值RSD為1.5%、1.9%。

2.2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，于0、2、4、6、8、12h測(cè)定供試品中樟腦、龍腦的峰面積，并計(jì)算其峰面積積分值得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為樟腦：RSD=1.93%、龍腦：RSD=1.65%。

2.2.9 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取同一批號(hào)樣品，按供試品溶液制備方法平行制備5份，依法測(cè)定，計(jì)算，結(jié)果樟腦與龍腦質(zhì)量分?jǐn)?shù)的RSD為1.9%、1.5%。

2.2.10 加樣回收率試驗(yàn)

加樣回收率試驗(yàn)：精密量取已知含量的凍瘡消酊（批號(hào)：071101）樣品2.5mL，共5份，置具分液漏斗中，分別精密加入一定量的對(duì)照品溶液，按2.2.4項(xiàng)下操作，在上述色譜條件下進(jìn)行GC分析，測(cè)定樟腦與龍腦含量，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)下表1、表2。

表1 樟腦加樣回收率試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果