大劑量使用附子的安全性研究

（1.廣西中醫學院第一附屬醫院；2.廣西中醫學院，廣西南寧530001）

摘要：目的：研究大劑量使用附子的安全性，為臨床安全使用附子提供參考依據。方法：制備附子與甘草2∶1配伍的水煎液及單附子水煎液，分別以附子15、30、45、60、75、90g/kg的劑量給各組小鼠連續灌胃10d，觀察煎液對各劑量組小鼠體重、血液學、血清生化指標、心電圖的影響以及小鼠中毒死亡情況，并取小鼠心、肝、腎進行病理學檢查。結果：單附子60g/kg以上劑量組對小鼠死亡率、體重、不良反應及嚴重程度有顯著影響（P<0.05），對心電圖有一定的影響；附子配伍甘草75g/kg以上劑量組對體重影響較大（P<0.05）；單附子60g/kg以上及附子配伍甘草75g/kg以上劑量組可顯著降低血尿素氮（P<0.05）。各組對紅細胞、白細胞、血紅蛋白、血清ALT、AST活力無明顯影響。結論：附子大劑量單用毒性較大，與甘草配伍后可減小毒性，但劑量大，仍有可能導致中毒，臨床應慎用大劑量，每劑最好小于75g。

關鍵詞：附子；甘草；配伍；安全性

中圖分類號：R285.6文獻標識碼：A文章編號：1673-2197（2008）10-0037-03

附子為毛莨科植物烏頭子根加工品。性辛、甘、大熱，有毒，歸心、腎、脾經、具回陽救逆、補火助陽、散寒止痛之功效，廣泛用于臨床，其用量古今不一，目前大劑量應用附子的頻率較大，且多在30~100g之間，甚者還有每劑達500g之多^［1］，而中國藥典規定附子的用量只為3~15g，臨床用量與權威規定相差甚遠。附子毒性很大，有毒成分主要為烏頭堿等雙酯型生物堿，極易吸收，口服烏頭堿0.2㎎即可中毒，3~4㎎致死，因附子劇毒而成為“最有用亦最難用之藥”^［2］。有人分析國內因服用烏頭類藥物而引起中毒者700余例，中毒主要原因是用量過大^［3］；歷代醫家多用附子配伍甘草，以減少毒性。大劑量使用附子的安全性以及配伍甘草后其安全性是否達到滿意程度尚未見系統的研究報道，本篇對此作出分析研究，旨在為臨床安全使用附子提供參考依據。

1實驗材料

1.1動物

昆明種小鼠352只，雌雄各半，體重18~22g，由廣西中醫學院實驗動物中心提供，合格證號：11004。

1.2藥材

附子（RadixAconiteLateralisPraeparata）：經鑒定為正品黑順片（AconitumcarmichaeliDexb）；甘草（RadixetRhizoGlycyrrhizae）：經鑒定為正品甘草（GlgcyrrhizauralensisFisch）。均由廣西萬寶堂藥業有限公司提供。

1.3試劑

尿素脲酶（波氏法））檢測試劑盒，四川省邁克科技有限責任公司提供，批號：0108111；谷丙轉氨酶（賴氏法，ALT/GPT）測定試劑盒，谷草轉氨酶（AST/GOT，賴氏法）測定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供，批號：20080226。

1.4儀器

旋轉蒸發儀RE-52A，上海亞榮生化儀器廠；TU-1901雙光束紫外可見分光光度計，北京普析通用儀器有限責任公司；攝影生物顯微鏡XSZ-H，重慶光學儀器廠。

2方法

2.1供試液的制備

取1000g附子于2000mL水中浸泡30min，加入4000mL水，先煎2h，再加500g甘草（已浸泡30min）同煎30min，濾取藥液，藥渣再加2000mL水煎1h，濾取藥液，合并濾液，減壓濃縮至相當于1g/mL.附子，得附子配伍甘草供試液（配伍比為2∶1）。另取1000g附子，除不加甘草外，余按上法操作，濃縮至相當于1g/mL附子，得單附子供試液。

2.2給藥與檢測項目

（1）取小鼠208只（20±2g），適應飼養5d后，將其隨機分為13組：生理鹽水對照組；附子配伍甘草組（分為6個劑量組：15g/kg、30g/kg、45g/kg、60g/kg、75g/kg、90g/kg組）；單附子組（分為6個劑量組：15g/kg、30g/kg、45g/kg、60g/kg、75g/kg、90g/kg組），每組16只，各組劑量相當于臨床使用劑量的50倍。連續灌胃給藥10d，對照組給同等體積生理鹽水，每天給藥2次。每天稱體重，觀察每組小鼠體重變化及中毒死亡情況。藥后第10天檢測血清谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）活力及尿素氮（BUN）含量、紅細胞數（RBC）、白細胞數（WBC）及血紅蛋白（Hb）含量，并做相關病理檢查。

另取小鼠130只，分為13組，按2.2.1方法操作，給藥第10天用5%烏拉坦（0.2mL/10g）麻醉，測小鼠心電圖。

2.3數據統計

采用華西醫科大學衛生統計學教研室研發的《醫學統計學》統計軟件包進行統計。

3實驗結果

3.1對小鼠體重的影響

各組小鼠體重與生理鹽水組比較，附子配伍甘草15g/kg、30g/kg組和單附子15g/kg組體重略有增加，其余各組均減少，尤以單附子45g/kg、60g/kg、75g/kg、90g/kg組和附子配伍甘草75g/kg、90g/kg組減少明顯，差別有非常顯著性意義（P<0.01）。見表1。

表1第10天各組存活小鼠用藥前后體重增減情況

（±s）

注：與對照組比較，*P<0.01。

3.2對小鼠紅細胞、白細胞及血紅蛋白的影響

各用藥組對小鼠紅細胞、白細胞及血紅蛋白無明顯影響，與對照組比較，差別均無顯著性意義（P>0.05）。

3.3對小鼠ALT、AST活力及BUN含量的影響

ALT、AST活力各用藥組與對照組比較差別均沒有顯著意義（P>0.05）。尿素氮量，附子配甘草75g/kg、90g/kg和單附子60g/kg以上3個劑量組顯著低于對照組，差別有顯著性意義（P<0.05）；單附子組降尿素氮量較附子配甘草組好。結果見表2。

表2各組動物血清生化指標

（±s）

注：與對照組比較，**P<0.01，*P<0.05。

3.4各組動物組織病理學檢查

各組動物組織病理學檢查發現：①心：組織學結構均無明顯異常；②腎臟：各組腎組織單位無明顯異常；③肝：90g/kg附子配甘草組，75g/kg、90g/kg單附子組各有一只出現輕度肝水腫，血管見輕度充血；其余各組血管均見輕微充血，說明大劑量使用對肝有一定的損害。

3.5各組動物藥后死亡情況

單附子組90g/kg用藥第10天僅有3只存活；75g/kg以上劑量組死亡多集中在第3天和第4天，用藥時間越長死亡越多。第10天死亡數，60g/kg以上劑量組與對照組比較有顯著差異（P<0.05），提示附子大劑量單用毒性較大。配伍組盡管90g/kg時死亡較多，但與對照組比較無顯著性差異見表4，提示甘草能較好地降低附子毒性。

表3各組動物累計死亡情況

注：與對照組比較，**P<0.01，*P<0.05。

3.6小鼠不良反應情況

小鼠在用藥3d后逐漸出現反應遲鈍、蜷縮（A）、腹瀉、糞便不成形（B）、豎毛、無光澤、松散（C）、消瘦（D）等不良反應，將出現的不良反應量化評分，采用序值法和t值法統計分析。單附子60g/kg以上劑量組的中毒反應較多且較嚴重，75g/kg、90g/kg劑量組更甚，而配伍組90g/kg才出現較多的癥狀。75g/kg、90g/kg配伍組與單附子同劑量組組間比較，差異非常顯著（P<0.01）。結果見表4。

注：配伍組和單附子組同劑量組組間比較，△△P<0.01，△P<0.05。

“+”表示癥狀較嚴重，“++”表示特別嚴重。

癥狀嚴重程度評分標準：輕微3分，較嚴重6分，特別嚴重9分。

3.7小鼠心電圖的變化情況

連續給藥第10天檢測心電圖，附子配伍甘草90g/kg組和單附子75g/kg、90g/kg組各有1只小鼠出現心率失常，說明大劑量使用附子對心臟有影響，但配伍甘草后影響減小。

4討論

本實驗附子配伍甘草設計的比例（2∶1）是根據許多文獻及臨床應用經驗而定。

研究結果表明，單附子劑量越大，改善腎功能的作用越明顯。這與報道的附子配伍大黃有降低因腎功能衰竭所致血中尿素氮升高的作用，從而改善腎功能的結果相符，且單附子組較配伍甘草組好。

大劑量使用附子確有毒性，配伍甘草能解附子之毒，附子與甘草配伍使用，附子劑量最好控制在75g/kg以下為好。因有個體差異，盡管15g/kg小劑量且配伍甘草使用，但小鼠仍有不良反應發生，甚至死亡，用藥時間越長不良反應越嚴重，死亡數越多，因此臨床應用附子特別是大劑量應用需慎重，并注意藥后不良反應的監測，提醒患者注意觀察不良反應的發生，如有不適，盡早到醫院就診。

參考文獻：

［1］李金蘭，范尚坦.附子的效用與劑量［J］.福建中醫藥，2001，32（1）：39-40.

［2］徐大樟.附子淺識［J］.浙江中醫藥，1976，2（2）：37.

［3］高曉山.中藥藥性論［M］.北京：人民衛生出版社，1992：322.

（責任編輯：陳涌濤）