基于ＨＰＬＣ法測定不同六味地黃丸中丹皮酚溶出度的研究

周　燦

【摘要】 目的 測定不同六味地黃丸，為患者選擇該藥作出判斷依據(jù)。方法 利用高效液相色譜法測定不同六味地黃丸中丹皮酚的溶出度。結(jié)果 被測六味地黃丸溶出量偏低，不同廠家之間差異較大。結(jié)論 建議定期對丸劑進(jìn)行溶出度測定，以期為臨床提供有指導(dǎo)意義的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】 HPLC法；六味地黃丸；丹皮酚；溶出度

六味地黃丸是由熟地、山茱萸、山藥、澤瀉、丹皮、茯苓6味中藥組成，具有滋補(bǔ)腎陰之功效，是治療腎陰不足的基本方藥，同時它對多形核白細(xì)胞的免疫功能有明顯的雙向調(diào)節(jié)作用，且具有一定的防癌作用。因?yàn)槠鋬r廉物美，該藥在我國市場上廣泛使用。為此，筆者收集了5種市售量多的六味地黃丸品種進(jìn)行溶出度測定，來摸索評價該制劑的內(nèi)在質(zhì)量，為患者選擇該藥作出判斷依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器PJ-3片劑四用測試儀(天津市國銘醫(yī)藥設(shè)備有限公司)，島津高效液相色譜儀(LC-10AT泵，SPD-10A紫外監(jiān)測器)，N-2000色譜工作站(浙江大學(xué)智能信息工程研究所)，VP-ODS色譜柱(150L×4.6)。

1.2 試藥 丹皮酚對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號110708-200505)；收集市售的5個不同廠家的六味地黃丸，A為水蜜丸(批號7033279，規(guī)格 200 mg，北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠)，B、C、D、E為濃縮丸(B：批號0801140，河南省宛西制藥股份有限公司；C：批號20071247，九芝堂股份有限公司；D：批號071101，修正藥業(yè)集團(tuán)通化通藥制藥股份有限公司；E：批號080201，江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司。規(guī)格均為每8丸相當(dāng)于原藥材3 g)；甲醇為色譜純，水為二級純水，其他試劑為色譜醇。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件根據(jù)藥典，將丹皮酚含量作為六味地黃丸質(zhì)控指標(biāo)。色譜柱為VP-ODS色譜柱(150L×4.6)；流動相：甲醇-水(70∶30)，檢測波長274 nm，柱溫：35℃，流速1.0 ml/min，進(jìn)樣量20 μL，按外標(biāo)法峰面積定量。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密稱取丹皮酚適量，加入甲醇溶解并稀釋成130 μg/ml作為對照品溶液。以甲醇分別稀釋成濃度為0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，16，32 μg/ml的丹皮酚工作液，分別按2.1色譜條件進(jìn)樣，以峰面積和含量回歸得到方程：丹皮酚y=83345.3x-716，r=0.9999 (n=7)。表明丹皮酚在0.5~32 μg/ml與峰面積有很好的線性關(guān)系。

2.3 精密度試驗(yàn) 分別精密取對照品溶液20 μL分別注入液相色譜儀，按2·1色譜條件進(jìn)樣測定，得丹皮酚的峰面積和保留時間RSD分別為2.3%，1.5% (n=6)。表明精密度良好。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批樣品溶液，分別在0，2，4，5，6，8 h進(jìn)樣測定，結(jié)果丹皮酚的峰面積和保留時間RSD分別為2.43%，0.17% (n=6)。表明穩(wěn)定性良好。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一樣品粉末6份，各約0.5 g，精密稱定，制備成供試品溶液，并分別進(jìn)樣測定，結(jié)果丹皮酚的峰面積和保留時間RSD分別為2.4%，0.11% (n=6)。表明重復(fù)性良好。

2.6 回收率測定 精密稱定已知含量的六味地黃丸6份，每份約0.45 g，精密取130 μg/ml丹皮酚對照品溶液1 ml，再補(bǔ)加流動相稀釋至適當(dāng)濃度，制備成供試品溶液，測定丹皮酚含量，計(jì)算得丹皮酚平均回收率為99.0%，RSD2.2%。

2.7 樣品丹皮酚含量測定 根據(jù)藥典方法并稍作改進(jìn)，測定六味地黃丸丹皮酚總含量，得丸A，B，C，D，E的丹皮酚含量分別為2.60，2.42，2.15，2.53，3.67 mg/g。

2.8 溶出度測定 根據(jù)藥品說明書單次服用劑量及藥典關(guān)于丸劑溶散時限的規(guī)定，取六味地黃丸(濃縮丸)8粒和六味地黃丸(水蜜丸)30粒，精密稱量，按藥典2005年版第二部溶出度測定法第一法，以水為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100 r/min，溫度為37℃，分別于10，20，40，80 min定點(diǎn)取樣5 mL(同時立即補(bǔ)充水5 mL)，用0.45 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液20 μL按上述高效液相色譜法測定，根據(jù)回歸方程計(jì)算出各時間丹皮酚量，并作為溶出量。以六味地黃丸丹皮酚總含量為溶出最大量100%。5個廠家六味地黃丸累計(jì)溶出量及累計(jì)溶出百分率見表1。

3 討論

本文探討了六味地黃丸溶出度測定方法，并收集了市售的5個不同廠家的產(chǎn)品。通過溶出度實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，丹皮酚的溶出量和累計(jì)溶出率不甚理想，且差異較大，80 min末只有C產(chǎn)品溶出達(dá)到50%，這必將影響產(chǎn)品藥理作用的發(fā)揮。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 國家藥典委員會.中國藥典.一部.化學(xué)工業(yè)出版社，2005.