摘要:以臺灣金線蘭組培苗的帶節莖段為外植體進行工廠化育苗研究,結果表明:最佳增殖培養基為MS+6-BA 0.5 mg·L-1 NAA 0.2 mg·L-1 ,最佳生根培養基為1/2MS+6-BA 0.1 mg·L-1 + NAA 0.5 mg·L-1 。栽培基質采用腐殖土+珍珠巖(2∶1),每5 d噴1次1/4 MS來補充養分,每15 d噴1次1 000倍氨基酸。
關鍵詞:臺灣金線蘭;增殖;生根;移栽
中圖分類號:R931.7文獻標識碼:ADOI編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2010.06.012
Study on the Factory Proliferation of Anoectochilus Formosanu
HU Song-mei
(Hunan Loudi Vocational and Technical College, Loudi, Hunan, 417000, China)
Abstract:Using tender stem as explant, tissue culture and factory proliferation of Anoectochilus formosanu had been studied. The results indicated that the optimum medium for multiplication of cluster buds was MS + 6-BA 0.5 mg·L-1 + NAA 0.2 mg·L-1;and the medium for rooting was 1/2MS + 6-BA 0.1 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1. The transplanting of young plants produced from in-vitro culture has also been studied. The results showed that the optimum culture medium is 2 Humus + 1 vermiculite and Spray 1/4 MS once every 5 d, Spray 1 000 times the amino acid once every 15 d.
Key words: Anoectochilus formosanu; multiplication; rooting; transplanting
臺灣金線蘭是蘭科的多年生草本植物,別名金線蓮、金絲草等,是一種傳統珍貴藥材,素有“金草”、“神藥”、“烏人參”等美稱[1]。前人已對臺灣金線蘭的組織培養進行過研究[2],但由于臺灣金線蘭對生態條件要求嚴格,試管苗移栽的成活率不高,規模化的組織培養育苗受到移栽難的瓶頸制約,故臺灣金線蘭的組織培養并產業化,尚在試驗之中。筆者對臺灣金線蘭的工廠化生產進行了研究,為臺灣金線蘭的大規模栽培提供指導。
1材料和方法
1.1材料
試材為本實驗室培養的臺灣金線蘭組培苗,取其帶節莖段接種。
1.2方法
1.2.1增殖培養切取臺灣金線蘭組培苗的帶節莖段,接種到添加不同濃度的6-BA、NAA的MS培養基上。激素處理組合為:(1)6-BA 0.2 mg·L-1+ NAA 0.1 mg·L-1;(2)6-BA 0.5 mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1;(3)6-BA 1 mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1;(4)6-BA 2 mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1。每處理接種30個外植體,3次重復。30 d記錄其接種數、增殖數、增殖系數和生長狀況。
1.2.2生根培養臺灣金線蘭組培苗為2.5 ~4 cm時,單株切下,接種到添加不同濃度的6-BA、NAA的1/2MS培養基上。激素處理組合為:(1)6-BA 0.1 mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1;(2)6-BA 0.1 mg·L-1+ NAA 0.5 mg·L-1;(3)6-BA 0.2 mg·L-1+ NAA1 mg·L-1;(4)6-BA0. 2 mg·L-1+ NAA 2 mg·L-1。每處理接種30個外植體,3次重復。30 d記錄其接種數、生根數、生根率和生根狀況、植株生長狀況。
1.2.3馴化移栽試管苗根長為3~5 cm時,打開培養瓶蓋在培養架上放置3~5 d進行馴化煉苗后將試管苗自培養瓶中取出,洗凈苗根部的瓊脂,移植于滅菌的腐殖土+珍珠巖(2∶1)基質中,統計移栽成活率。
基本培養基中附加蔗糖30 mg·L-1、瓊脂7 mg·L-1。
2結果與分析
2.1增殖培養
4種激素組合均能誘導叢生芽,其中3、4號培養基增殖系數最大,為3.1和3.9,但植株矮小,成苗率不高,而2號培養基增殖系數為2.6,植株高大健壯,玻璃化苗少,在此培養基中放置60 d后開始生根,可以一步成苗。1號培養基增殖系數僅為1.2。研究表明,最佳增殖培養基為MS+6-BA 0.5 mg·L-1+ NAA 0.2 mg·L-1。
2.2生根培養
2號培養基培養10 d后開始生根,根不從切口處而從靠近培養基的每個節上長出1~2條,呈肉質狀。根比較短不分支,其上有細密、乳白色的根毛。培養60 d左右,植株長至10 cm時進行室外移栽。3、4號培養基培養的生根時間為12 d左右,但植株較2號培養基矮小,葉片較黃。1號培養基培養生根時間為15 d。研究表明,最佳生根培養基為MS+6-BA 0.1mg·L-1+ NAA 0.5mg·L-1。
2.3馴化移栽
將生根后的臺灣金線蘭移至室外進行適應性煉苗后,將苗從瓶中拔出、洗凈,種植于陰涼大棚內。栽培基質采用腐殖土+珍珠巖(2∶1),空氣相對濕度保持在70%~85% 左右,每5 d噴1次1/4 MS來補充養分,每15 d噴1次1 000倍氨基酸,移栽成活率為91.2%。
3 討論
(1)在增殖培養基中加入1 mg·L-1 綠寶,對臺灣金線蘭叢生芽的形成和伸長有較強的促進作用。增殖中加入香蕉效果不明顯,此結果與前人研究相似[3],生根培養基中加入香蕉和土豆可以使苗更健壯,移栽成活率更高。
(2)移栽時盡量選擇株高、粗壯、根多的試管苗,如果試管苗個體小、根數少,應該繼續在培養基上培養;直到株高5 cm以上,具根3~5 條、生長狀況良好的試管苗方可移栽至室外,以保證高成活率。成活率的高低與苗的大小有密切的關系。移栽時最好選擇在3—4月和9—10月,應避免在7—8 月進行移栽。
參考文獻:
[1] 中國科學院植物研究所. 中國高等植物圖鑒:第5冊[M].北京:科學出版社,1980.
[2] 蔡文燕, 肖華山, 范秀珍.亞熱帶植物科學[J].2003,32(3):68-72.
[3] 范子南.金線蓮的離體培養[J].植物生理學通訊,1995,3(6):430-431.