落新婦苷固體分散體的制備及理化鑒別

何 燕， 聶金媛， 徐孟文， 梁敏儀， 賴小平

(1.廣州中醫(yī)藥大學，廣東廣州510006;2.廣州醫(yī)藥工業(yè)研究院，廣東廣州510240)

落新婦苷(astilbin)是一種從傳統中藥土茯苓(Rhizoma Smilacis Glabrae)中提取的二氫黃酮類化合物，為土茯苓的有效成分之一［1］。具有抑制輔酶A還原酶，抑制醛糖還原酶，保護肝臟，鎮(zhèn)痛，抗水腫［2］等多種生物學活性，并且具有選擇性免疫抑制作用［3］。可以作為一種新的免疫抑制劑用于免疫相關疾病的治療。但落新婦苷為水難溶性藥物(溶解度為0.1 mg/mL，幾乎不溶或不溶)，不易被機體吸收，在臨床應用上受到了一定限制。固體分散體技術是近年來藥劑學研究中的熱點，不僅可以改善難溶性藥物的溶出、提高藥物的生物利用度，還改善物料性質和增加藥物的穩(wěn)定性［4-5］。本實驗制備了落新婦苷固體分散體，并對其進行物相鑒別［6］。

1 材料與儀器

差示掃描量熱儀(DSC 204，德國NETZSCH公司)，X射線衍射儀(D/max-3A，德國NETZSCH公司)，智能溶出試驗儀(ZRS-4，天津無線電廠)，雙光束紫外可見分光光度計(UV-1901，北京普析通用儀器有限責任公司)，圖像分析系統(BX41電子顯微鏡，日本Olympus公司;DP71采集頭，日本Olympus公司;IPP圖像采集分析軟件，Media Cybernetics公司)。

落新婦苷(自制，含量＞98%);聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30(ISP公司)，吐溫80(化學純，廣州化學試劑廠 )，正辛醇(分析純，廣州化學試劑廠)。

2 實驗方法

2.1 固體分散體的制備 采用溶劑法，按質量比1∶1.5∶3精確稱量落新婦苷和吐溫80、PVPK30。先將落新婦苷和吐溫80混合后，加入95%乙醇溶解，再與PVPK30乙醇溶液混合均勻，置于蒸發(fā)皿中，加熱揮干溶劑，析出物于真空干燥器中干燥24 h，取出，研磨，過60目篩，制得落新婦苷與PVPK30固體分散體，置干燥器中保存?zhèn)溆谩?/p>

2.2 溶解度實驗 取自制固體分散體適量于玻璃小瓶中，分別加入水，使之呈過飽和狀態(tài)。溫度保持(25±1)℃，攪拌約24 h使達溶解平衡，將飽和溶液用0.22 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液進行UV法測定，計算固體分散體中落新婦苷在水中的平衡溶解度。

2.3 表觀油/水分配系數的測定 采用正辛醇-水經典搖瓶法來測定落新婦苷及落新婦苷固體分散體的表觀油水分配系數。取pH 2.2、4.5、6.8、7.4緩沖溶液5 mL與落新婦苷正辛醇貯備溶液5 mL混合，置于錐形瓶中。在(25±1)℃，150 r/min恒溫振蕩24 h，離心分離兩相。取油相，當稀釋2倍后，用紫外分光度法測定，計算的Cw。

2.4 溶出度試驗 按《中國藥典》2005年版相關規(guī)定，采用溶出度測定法(中國藥典2005版二部附錄XD小杯法)。取適量SD樣品，置小杯中，釋放介質為蒸餾水，體積為100 mL，轉速(100±2)r/min，水浴溫度(37 ±1)℃，分別于15、30、45、60、90、120 min取樣2 mL，過0.22 μm微孔濾膜，同時補充等體積同溫新鮮介質，取續(xù)濾液UV法測定落新婦苷的含量，計算累積溶出率。

2.5 固體分散體的物相鑒別

2.5.1 顯微鏡法 將原藥粉末和落新婦苷固體分散體用甘油分散于載玻片上，蓋上蓋玻片后，置于顯微鏡下觀察。

2.5.2 X-射線衍射 取落新婦苷、吐溫 80-PVPk30、物理混合物、固體分散體，進行X-射線衍射分析。工作條件:銅靶 Kα1，電壓35 kV;電流 25 mA;發(fā)散、散射和接受狹縫分別為 1°、1°、0.3 mm;2θ范圍:3°～60°;檢測依據:轉靶多晶體 X-射線衍射方法通則JY/T009-1996。

2.5.3 差示掃描量熱法(DSC) 取落新婦苷、吐溫80-PVPk30、物理混合物、固體分散體，進行DSC分析。工作條件:氣氛為N2，20 mL/min;掃描程序，從室溫以10℃/min升溫至23℃，記錄升溫曲線。

3 結果與討論

3.1 溶解度實驗 落新婦苷和固體分散體中落新婦苷的溶解度分別為0.198 mg/mL、6.28 mg/mL。結果顯示固體分散體中落新婦苷的溶解度有顯著提高。

3.2 表觀油/水分配系數的測定 見圖1，可知固體分散體的油/水分配系數與落新婦苷相比有顯著性差異，說明將落新婦苷制備成固體分散體后，即提高了藥物的溶解度和溶出速度，同時又提高了藥物分子的親脂性，提示將落新婦苷制備成固體分散體可以促進藥物的體內吸收。

圖1 落新婦苷及落新婦苷固體分散體在不同pH溶液的表觀油水分配系數圖

3.3 溶出度試驗 見圖2，結果顯示落新婦苷原藥1 h時累積溶出仍不到45%，而落新婦苷固體分散體1 h時的累積溶出可達86%，表明落新婦苷固體分散體的溶出速率比原藥有顯著性提高。

圖2 固體分散體的累積溶出曲線圖

3.4 固體分散體的物相鑒別

3.4.1 顯微鏡法 結果顯示原藥材呈方狀晶體，而固體分散體中的落新婦苷以微晶態(tài)存在，雙折射現象較弱，見圖3～4。

圖3 落新婦苷顯微鏡圖像(×400)

圖4 固體分散體顯微鏡圖像(×400)

3.4.2 X-射線衍射 結果見圖5～8，可見落新婦苷在7°～44°之間有多個強的結晶衍射峰，吐溫80-PVPk30在11°和20°處有2個強的衍射峰;物理混合物的譜線中落新婦苷和吐溫80-PVPk30的各特征峰均一定程度上減弱;而在固體分散體譜線中，落新婦苷在7°～22°之間特征峰明顯減弱或部分消失，在23°～44°之間特征峰明顯消失，說明落新婦苷在吐溫80-PVPk30固體分散體中部分以分子狀態(tài)分散，部分以微晶狀態(tài)分散。

圖5 落新婦苷的X-射線衍射圖

圖6 Tween 80-PVPk30的X-射線衍射圖

圖7 物理混合物的X-射線衍射圖

圖8 固體分散體的X-射線衍射圖

圖9 落新婦苷DSC曲線圖

3.4.3 差示掃描量熱法(DSC)DSC曲線圖結果見圖9～12。可知吐溫80-PVPk30的DSC曲線顯示在62.3℃有一個吸熱峰，落新婦苷有2處特征吸熱峰(119.0℃，179.3℃)，物理混合物有2處特征吸熱峰(68.5℃，168.4℃)，固體分散體有三處特征吸熱峰(68.9℃，153.6℃，186.9℃)。固體分散體的DSC曲線圖中顯示，藥物原來的吸熱峰已經完全消失，但在附近均有較弱的吸熱峰生成，說明落新婦苷在吐溫80-PVPk30固體分散體中藥物結晶減少。

圖10 吐溫80-PVPk30DSC曲線圖

圖11 物理混合物DSC曲線圖

圖12 固體分散體DSC曲線圖

［1］袁久志，竇德強，陳英杰，等.土茯苓二氫黃酮醇類成分研究［J］.中國中藥雜志，2004，29(9):867-870.

［2］劉亞歐，劉 榴，李 彬，等.土茯苓及落新婦苷抗炎、鎮(zhèn)痛、利尿作用研究［J］.中藥藥理與臨床，2004，20(01):11-12.

［3］高思海，李 平，陳 濤，等.落新婦苷對心臟移植排斥反應中活化T細胞p38絲裂原激活蛋白激酶信號傳導通路的影響［J］.中國醫(yī)院藥學雜志，2007，27(2):153-156.

［4］陸 彬.藥物新劑型與新技術［M］.2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005:1-13.

［5］張惠平，向大雄，羅杰英，等.固體分散技術在藥劑學中的研究進展［J］，中國藥學雜志，2007，42(11):807-810.

［6］陳 亮，周建平，呂慧俠.物相鑒別及釋藥模型在固體分散體釋藥機制與穩(wěn)定性研究中的應用［J］，藥學進展，2007，31(5):204-210.