青蒿琥酯緩釋固體分散體的制備及體外溶出度研究

黃蘭芷， 趙志強， 衡林森， 何從林， 劉曉琴

(重慶郵電大學生物信息學院，重慶400065)

青蒿琥酯［1］(Artesunate)化學名為二氫青蒿素-1，2-α-琥珀酸單酯，分子式為 C19O8H28，是具有倍半萜結構的抗瘧青蒿素的衍生物之一。青蒿琥酯作為新型的抗瘧藥，具有高效、速效、低毒等特點，而且不易產生耐受性。青蒿琥酯除抗瘧外，尚有治療弓形蟲病［2］，抗腫瘤等作用［3］。但由于青蒿琥酯溶解性較差，目前市場上青蒿琥酯藥物劑型較少，主要為片劑、栓劑、注射液等。而青蒿琥酯適用病癥的治療病程較長，需長期服藥的特點，很有必要開發一種用藥次數少，持續時間長的緩釋制劑，以達到提高藥物生物利用度的目的。

固體分散體(Solid Dispersion，簡稱 SD)［4］系指將固體藥物，特別是難溶性固體藥物以微粒、微晶或分子狀態等形式均勻分散在固態載體物質中的體系。其主要特點是利用不同性質的載體，使藥物在高度分散狀態下達到不同要求的用藥目的。例如，增加難溶藥物的溶解度;延緩或控制藥物釋放;增大藥物的穩定性;延緩藥物氧化和分解;提高藥物生物利用度;降低藥物的毒性和副作用;控制藥物在靶器官釋放;掩蓋藥品的不良氣味等。本實驗采用溶劑法制備青蒿琥酯緩釋固體分散體，以提高體外溶出度。

1 試藥與儀器

青蒿琥酯(重慶華立武陵山制藥有限公司，批號080402);乙基纖維素(EC10cp上海卡樂康公司);羥丙甲纖維素(HPMC15cp上海卡樂康公司);十二烷基硫酸鈉(SLS，分析純，天津市博迪化工有限公司);無水乙醇為分析純。

ZRD6-8溶出度測定儀(天津大學無線電廠);TU-1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限公司);HH-2雙孔電熱恒溫水浴鍋(上海比朗儀器有限公司);GG88-DGF3006(A)電熱鼓風干燥箱(北京中西遠大科技有限公司);Mettler AE100電子分析天平(梅特勒一托利多儀器上海有限公司);DZF-6050B真空干燥箱(鄭州南北儀器設備有限公司)。

2 實驗方法

2.1 青蒿琥酯固體分散體制備 采用溶劑法制備緩釋固體分散體，通過一系列初步研究和處方篩選，最終選擇用乙基纖維素(EC)作為固體分散體的載體。先將載體和藥物分別按一定比例溶于無水乙醇，待完全溶解后，將藥物溶液與載體溶液在不斷攪拌下置水浴中充分混合均勻，并待乙醇揮盡，混合物呈黏稠狀態后，于60℃干燥，取出，粉碎，過篩整粒，即得。

2.2 青蒿琥酯含量測定 精密稱定80℃干燥至恒重的青蒿琥酯對照品10 mg，置于50 mL量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，得到標準溶液。分別精密量取青蒿琥酯標準溶液 0、2、4、6、8、10 mL，各置50 mL量瓶中，加入10 mL 1 mol/L的氫氧化鈉，加水稀釋至刻度后于50℃的水浴鍋中加熱45 min，取出迅速冷卻至室溫，在238 nm的條件下測定吸光度。以濃度對應吸光度進行線性回歸，得回歸方程為:A=0.021 8C-0.004 9，相關系數 r=0.999 8，結果表明，青蒿琥酯在8.12 μg ～40.6 μg/mL 時，線性關系良好。

2.3 體外溶出度測定 按中國藥典2005年版(二部)槳法測定，釋放介質:含0.3%十二烷基硫酸鈉的0.1 mol/L鹽酸，溫度(37±0.5)℃，轉速:100 r/min。將3批固體分散體稱取6份待測物適量，分別置于6個溶出杯中，定時取液5 mL(取出后迅速補加等量的新鮮介質)，經0.8 μm微孔濾膜濾過，注入25 mL的量瓶中，加1 mol/L的氫氧化鈉溶液5 mL，加水稀釋至刻度后于50℃的水浴鍋中加熱45 min，取出迅速冷卻至室溫，在238 nm的條件下測定吸光度，求得青蒿琥酯的濃度并計算其累積釋放百分率。

3 試驗結果

3.1 不同種類的輔料對青蒿琥酯溶出度的影響

取4種不同黏度的乙基纖維素和藥物分別按2∶1溶于無水乙醇，待完全溶解后，按前述方法進行制備固體分散體，并測定青蒿琥酯的溶出度。見圖1。

圖1 由不同種類輔料制得青蒿琥酯固體分散體累計釋放率

從試驗結果可看出，EC200cp由于黏度過大，在預期時間內累積釋放率較低，而 EC10cp、EC20cp、EC45CP三種輔料制得的固體分散體均能實現緩釋的效果，其中以EC10cp釋放較完全，故選擇EC10cp作為固體分散體的載體。

3.2 輔料用量對青蒿琥酯溶出度的影響 取EC10cp和藥物分別不同比例溶于無水乙醇，待完全溶解后，按前述方法進行制備固體分散體，并測定其累積釋放率。結果見圖2。

圖2 不同輔料用量制得青蒿琥酯固體分散體累積釋放率

由上圖可見這幾個比例的處方中，隨著輔料與藥物比例增大，釋放速度減慢。輔料藥物比為1∶1時，釋藥速度過快，8 h釋放度就達到90%以上，基本沒有緩釋效果;而輔料:藥物在4∶1、5∶1、6∶1時釋藥速度過慢。只有輔料藥物比為2∶1和3∶1時，12 h釋放度能達到90%以上，能滿足緩釋制劑的基本要求。依據在不影響藥物療效和作用的情況下，盡量減少輔料用量的原則，本方采用EC10cp:藥品=3:1的比例進行制劑成型研究。

3.3 釋放調節劑HPMC對青蒿琥酯溶出度的影響

取EC10cp、藥物和不同黏度的HPMC按3∶1∶0.5比例溶于無水乙醇，待完全溶解后，按上述方法制備固體分散體，并測定其累積釋放率。結果見圖3。

從以上實驗可看出，HPMC黏度增大，固體分散體體外釋放度反而減小，可能是由于HPMC在藥物表面形成的凝膠層阻滯了藥物的釋放。因此，選用黏度較小的HPMC15cp為釋放調節劑進行篩選。

圖3 不同HPMC制得青蒿琥酯固體分散體累積釋放率

3.4 HPMC用量對青蒿琥酯溶出度的影響 取EC、HPMC和藥物分別不同比例溶于無水乙醇，待完全溶解后，按前述方法進行制備固體分散體，并測定其累積釋放率。結果見表1，圖4。

表1 HPMC用量篩選試驗設計

圖4 不同用量HPMC制得青蒿琥酯固體分散體累積釋放度

結果表明，處方2的釋放效果較為理想，故選擇EC10cp、藥品、HPMC 比例為3∶1∶0.5。

3.5 處方驗證實驗 依據試驗所得出的最終處方，制備3批處方藥物的緩釋固體分散體，測定其體外釋放度，用以驗證處方的合理性和工藝的穩定性。結果見圖5。

圖5 3批青蒿琥酯固體分散體累積釋放率

3批制劑的累積溶出度來看，緩釋固體分散體中青蒿琥酯的累積釋放率重現性好，緩釋制劑體外釋放度在1 h沒有突釋現象，2 h釋放率在50%左右;12 h內釋放率大于80%，說明本處方釋放效果穩定。證明所選處方工藝基本合理，穩定。

4 討論

4.1 對不同輔料比的累積釋放率進行零級釋放釋藥方程擬合，結果見表2。

表2 不同輔料比累積釋放率釋藥擬合方程

輔料用量為藥物4倍以上時，處方藥物基本呈零級釋放，沒有緩釋效果。由此可知，緩釋制劑的輔料用量越大，其緩釋效果降低，證實輔料用量也是影響其緩釋效果的重要因素。

4.2 干燥方法對緩釋制劑成型的影響

在本研究中，筆者曾用4種不同黏度的EC作為載體制備固體分散體，在研究中發現，黏度越高，采用溶劑法制備固體分散體的難度增加，其原因可能是由于載體黏度過大，影響藥物與載體的干燥，從而影響到制劑的成型。在干燥方法的選擇上，也嘗試過多種干燥方式，發現普通的真空減壓干燥時間較長，且得到的固體分散體質地韌性較大，不易粉碎。而后選擇微波干燥法，得到的固體分散體質地韌性減小，脆性增大，易于粉碎制粒。微波干燥法具有干燥效率高，質量好，干燥溫度低等特點，適于大生產使用，克服了常規干燥方法的缺陷，是一種新型、高效的干燥方法。

［1］劉 旭.青蒿素衍生物研究［J］.藥學通報，1980，15(4):39.

［2］王京燕，徐在海，王明道.青蒿素鈉的毒性機理及對弓形蟲的作用［J］.中國藥理學和毒理學雜志，1997，11(2):127.

［3］楊小平，潘啟超，梁永鉅.青蒿素鈉的抗腫瘤作用［J］.癌癥，1997，16(3):186.

［4］胡容峰，梅康康.固體分散體技術及其在緩控釋制劑中的應用［J］.安徽醫藥，2008，(11):1001-1004.