NF-ΚB和Bc l-2在胃癌組織中的表達及意義

聶明豪 李秀榮 楊彬 劉廣田

(黑龍江省醫院病理科 黑龍江哈爾濱 150036)

NF-ΚB和Bc l-2在胃癌組織中的表達及意義

聶明豪 李秀榮 楊彬 劉廣田

(黑龍江省醫院病理科 黑龍江哈爾濱 150036)

目的 探討NF-ΚB和Bcl-2在胃癌組織中的表達及意義。方法 應用免疫組化二步法對63例胃癌組織中NF-ΚB和Bcl-2的表達情況進行檢測。結果 NF-ΚB的表達與胃癌的分化程度、浸潤深度及是否有淋巴結轉移有關,而與腫瘤的組織學分型無關。胃癌組織中NF-ΚB和Bcl-2的表達正相關。結論 NF-ΚB有可能通過參與細胞凋亡而在胃癌的發生發展過程中起重要作用;NF-ΚB在胃癌中的陽性表達與胃癌的分化程度、淋巴結轉移及浸潤深度有關。如果能用基因方法抑制NF-ΚB的活性,可能為胃癌的治療開辟新的途徑。

胃癌 NF-ΚB Bc l-2

胃癌是我國最常見的消化道惡性腫瘤之一。胃癌的發生,發展是一個多因素,多基因作用的復雜過程。有關細胞信號轉導和調控異常與腫瘤發展關系的研究越來越受到人們的關注,細胞信號通路的改變可能是導致胃粘膜上皮癌變的關鍵因素,可能對于從分子水平認識胃癌的發病機制,具有重要的價值。NF-ΚB信號通路是目前研究與胃癌發生發展有關的信號轉導通路之一,Bc l-2作為細胞凋亡抑制基因是NF-ΚB通路關鍵的下游靶基因。本文應用免疫組化技術檢測NF-ΚB和Bc l-2在胃癌中的表達情況,探討2者的關系及在胃癌發生發展中的實際意義。

1 資料與方法

1.1 標本來源

標本選自黑龍江省醫院2008年10月至2009年12月間胃癌根治標本63例。其中男35例,女28例。年齡37～81歲,平均年齡61.6歲。所有病人術前均未接受化療或放療。

表1 NF-ΚB在胃癌組織中的表達

表2 Bc l-2在胃癌組織中的表達

1.2 免疫組化染色

應用免疫組化兩步法。一抗為兔抗人NF-ΚBP65單克隆抗體(1∶200),鼠抗人Bcl-2單克隆抗體(1∶200),所用試劑均購于福州邁新生物技術有限公司。

1.3 結果判定

每組實驗均設有陽性和陰性對照。陽性對照為邁新公司提供的已證實有相應產物表達的切片染色。陰性對照為操作過程中用PBS液代替一抗。

NF-ΚB65和Bcl-2均于細胞漿顯色,細胞呈黃色或棕黃色為陽性細胞。將陽性細胞及總細胞計數,計算出陽性率。陽性細胞數＜10%為陰性,陽性細胞數≥10%為陽性。

1.4 統計學方法

計數資料的χ2檢驗分析和雙變量直線相關分析。

2 結果

2.1 臨床病理學資料

63例胃癌標本按Lauren分型:其中腸型22例,彌漫型41例;組織學分型:高、中分化25例,低分化38例;伴有淋巴結轉移40例,無淋巴結轉移23例;癌組織浸潤漿膜48例,未浸潤漿膜15例。

2.2 NF-ΚB的表達與臨床病理特征的關系

NF-ΚB在胃癌中的表達率為42.86%;在不同的發病年齡組、性別以及Lauren分型組間,差異無顯著意義(P均>0.05);而在不同的分化程度、漿膜侵犯及淋巴結轉移組內差異有顯著意義。NFΚB表達率:低分化組(55.26%)高于高分化組(24.0%);侵潤漿膜組(50.0%)高于未侵潤漿膜組(20.0%);伴有淋巴結轉移組(52.5%)高于不伴淋巴結轉移組(26.09%)(P均<0.05),見表1。

表3 癌組織中survivin、Bc l-2表達的相關性

2.3 Bc l-2的表達與臨床病理特征的關系

Bcl-2在胃癌組織中的表達陽性率為53.97%;而且表達與胃癌的Lauren分型、浸潤深度及淋巴結轉移情況無關,與癌組織的分化程度有關,組間差異有顯著性(P<0.05),見表2。

2.4 胃癌組織中NF-ΚB的表達與Bc l-2的表達的關系

NF-ΚB與Bc l-2在胃癌中的表達呈正相關(r=0.56),見表3。

3 討論

NF-ΚB是一種具有多向調節功能的轉錄因子,廣泛參與許多基因的轉錄調控。常以p50/p65異源二聚體的形式存留于胞漿,當受到內毒素、活性氧、細胞因子等作用后,NF-ΚB激活并入核與相應靶基因結合,調控多種基因的表達,與腫瘤的發生發展、浸潤轉移及腫瘤耐藥問題密切相關[1]。它的活化已成為白血病、乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌和前列腺癌等惡性腫瘤的標志[2]。文獻報道[3],其與腫瘤的關系主要是通過上調促細胞存活基因表達、抑制促凋亡因子或持續活化生長信號而促進細胞增殖、逃避凋亡。Wang等[4]首次采用免疫組化法測得人胰腺癌組織中存在NF-ΚBp65的激活。王維等[5～6]應用免疫組化方法檢測了41例胃癌和25例相應非癌組織中NF-ΚB的表達,顯示正常胃粘膜、腸型化生、不典型增生及胃癌組織中,陽性率漸次升高,并且在低分化、進展期、有淋巴結轉移及浸潤至漿膜的胃癌組織中,增高尤其明顯。本組實驗中NF-ΚB在胃癌中的表達率為42.86%;在不同的分化程度、漿膜侵犯及淋巴結轉移組內差異有顯著意義。NF-ΚB表達率:低分化組(55.26%)高于高分化組(24.0%);侵潤漿膜組(50.0%)高于未侵潤漿膜組(20.0%);伴有淋巴結轉移組(52.5%)高于不伴淋巴結轉移組(26.09%)(P均<0.05)。說明NF-ΚB在胃癌細胞和組織中表達激活與胃癌的發展、轉移密切相關,并在某種程度上決定著患者預后。

Bcl-2是一種凋亡抑制基因,它通過抑制細胞凋亡而延長細胞壽命,從而增加了腫瘤發生的機會并促進腫瘤的發展[7]。許多研究表明,Bcl-2的高表達與胃癌的發生密切相關。本組研究顯示,Bcl-2在胃癌組織中的表達陽性率為53.97%;而且表達與胃癌的Lauren分型、浸潤深度及淋巴結轉移情況無關,與癌組織的分化程度有關,組間差異有顯著性(P<0.05)。提示,Bc l-2基因表達可能與胃癌發生的前期過程有關,與腫瘤進展無關。

本次研究顯示:NF-KB與Bc l-2的陽性表達呈正相關(r=0.56, P＜0.05)。已經證實Bc l-2啟動因子上存在著NF-KB特異性結合為點,被認為是NF-KB下游的一個重要靶基因[8～9],且在Bc l-2家族中抗凋亡的Bc l-2和Bc l-x l啟動區有KB序列,而促凋亡成員沒有,腫瘤細胞內高活性NF-KB只促進抗凋亡成員的表達,打破Bc l-2家族成員形成的凋亡調控平衡,從而抑制腫瘤細胞的凋亡。另有試驗阻斷NF-KB信號通路并下調NF-KB下游抗凋亡蛋白Bc l-2的表達,可使細胞停滯于G1期,抑制癌細胞增殖,促進細胞凋亡。IKBa是NF-KB的抑制蛋白在維持活化的NF-KB信號通路中起著不可替代的作用,而Bc l-2可以通過促進IKBa的降解來活化NF-KB信號轉導途徑從而發揮抗凋亡作用[10]。以上充分驗證了NF-KB和Bc l-2在胃癌中的表達及具有相關性的可能性,進一步說明了NF-KB有可能通過參與細胞凋亡而在胃癌的發生發展過程中起重要作用。

很多研究表明NF-KB在正常細胞或癌前階段中的作用與其在惡性轉化中的作用明顯不同,在癌癥早期NF-KB不僅不會發揮促癌作用,還可以抑制腫瘤的發生,但是當腫瘤細胞積累了更多的突變,是抑癌基因失去作用,NF-KB的作用就會發生根本性的變化,它會強烈誘導大量促進腫瘤發生發展和轉移的基因表達。因此胃上皮細胞中過量表達的Bc l-2會通過抑制細胞凋亡而使過多突變的細胞積累下來,從而在激活和促進NF-KB信號通路過程中起作用。

可以推測在腫瘤向惡性轉化的過程中NF-KB和Bc l-2都共同發揮了作用,造成組織細胞的增值和凋亡失衡,惡性腫瘤細胞逃避調亡而迅速增大。因此,如果能利用基因方法抑制NF-KB的活性,可能會對胃癌的治療開辟新的途徑。

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R735 R573

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1674-0742(2010)11(c)-0043-02

2010-06-29