膽汁標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)鑒定和藥敏結(jié)果分析

彭衛(wèi)華，廖晚珍，余 陽(yáng)，陳開(kāi)森，胡雪飛，胡妮婭

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330006)

膽道感染是常見(jiàn)疾病，抗生素的應(yīng)用是必不可少的，隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，尤其是近年出現(xiàn)的濫用狀況，使細(xì)菌耐藥性不斷增多，因而細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏監(jiān)測(cè)更為重要，本文回顧性分析我院膽道感染患者膽汁標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)結(jié)果，為臨床醫(yī)生合理使用抗生素提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2008年6月至2010年6月南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院膽道感染患者膽汁標(biāo)本中分離的病原菌。

1.2 儀器和試劑 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)采用法國(guó)梅里埃公司的VITEK2 COMPACT全自動(dòng)微生物鑒定儀，專用G-桿菌鑒定卡GN和藥敏卡GN13，G＋球菌鑒定卡GP和藥敏卡P535。血瓊脂平板、巧克力平板為英國(guó)OXOID公司哥倫比亞基礎(chǔ)瓊脂，中國(guó)蘭平板為杭州微生物試劑有限公司產(chǎn)品。

1.3 質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、糞腸球菌ATCC33186。

1.4 方法

1.4 .1 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定 將無(wú)菌采集的膽道感染患者膽汁標(biāo)本注入無(wú)菌管或增菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，按常規(guī)培養(yǎng)方法及時(shí)接種于血平板、中國(guó)蘭和巧克力平板，35℃孵育18～24h，如有細(xì)菌生長(zhǎng)，采用VITEK2 COMPACT全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)。

1.4 .2 分析方法 耐藥結(jié)果分析采用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)中心推薦的WHONET 5.4軟件進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果 339份膽汁標(biāo)本中178份陽(yáng)性，其中19份為2種細(xì)菌混合感染，總陽(yáng)性率為52.5%、共分離出197株需氧菌和真菌，其中革蘭陰性桿菌151株(占76.6%)，革蘭陽(yáng)性球菌44株(占22.3%)、假絲酵母菌2株(占1.1%)。引起膽道感染最多見(jiàn)的有大腸埃希菌86株占43.6%，其次是肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌各占8.6%，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌47株(54.6%)，肺炎克雷伯菌5株(29.4%)；糞腸球菌和屎腸球菌分別占7.6%和6.6%，各病原菌構(gòu)成比見(jiàn)表1。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 大腸埃希菌和肺炎克雷菌對(duì)阿米卡星、亞胺培南和美羅培南敏感性最高，其余都有不同程度耐藥，陰溝腸桿菌對(duì)亞胺培南，美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦最敏感。腸球菌敏感性最高的是替考拉寧(耐藥率為零)，其次是萬(wàn)古霉素和利奈唑烷耐藥率為8.6%，幾種多見(jiàn)菌耐藥率見(jiàn)表2、表3。

3 討論

膽道感染是常見(jiàn)的感染性疾病，多來(lái)源于腸道細(xì)菌的逆行感染，病原菌種類和腸道細(xì)菌大致相同。本文回顧性分析了膽汁標(biāo)本普通培養(yǎng)分離細(xì)菌的種類及主要細(xì)菌的耐藥性，從以上結(jié)果顯示，本組細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率為52.5%，低于年華等[1]報(bào)道的70.9%，與聶哲群等[2]和陸屏等[3]報(bào)道的51.2%和53.0%相近，主要病原菌為革蘭陰性桿菌占76.6%，以大腸埃希菌為主(占43.6%)高于文獻(xiàn)報(bào)道[1]，其次為肺炎克雷伯菌和陰溝腸桿菌(各占8.6%)。革蘭陽(yáng)性球菌占(22.3%)，主要為糞腸球菌(7.6%)，屎腸球菌(6.6%)，其它腸球菌(3.5%)，略低于文獻(xiàn)報(bào)道[1，3]，但腸球菌總感染率相符[4]。另外，本組資料中有19份膽汁為兩種細(xì)菌混合感染占(10.7%)，主要原因可能是抗生素藥品的濫用，引起腸道常見(jiàn)菌群的混亂，增加了細(xì)菌的耐藥性所致。

表1 197株病原菌構(gòu)成比

表2 主要G－桿菌的耐藥率

表3 腸球菌耐藥率

藥敏結(jié)果顯示，86株大腸埃希菌和肺炎克雷菌對(duì)阿米卡星和碳青酶烯類藥物未檢出耐藥株。大腸埃希菌耐藥率較低的有呋喃妥因(3.5%)。哌拉西林/他唑巴坦(5.8%)和妥布霉素(11.6%)，其余抗生素都有較高的耐藥，特別是氨芐西林耐藥率高(75.6%)、喹諾酮類，頭孢二、三代都在(50～70%)，可能由于產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌(54.6%)含量較高所致。肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林呈天然耐藥，其產(chǎn)ESBLs株也有(29.4%)，抗生素的耐藥率較大腸埃希菌低，但呋喃妥因、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦比前者要高許多。陰溝腸桿菌的耐藥率也普遍高，除外碳青霉烯類和哌拉西林/他唑巴坦，總的來(lái)說(shuō)，阿米卡星，碳青霉烯類藥和哌拉西林/他唑巴坦可作為膽道感染腸桿菌科細(xì)菌的經(jīng)驗(yàn)用藥。腸球菌屬除對(duì)替考拉寧未檢出耐藥株，3株萬(wàn)古霉素和利奈唑烷耐藥株為鉛黃腸球菌和醇雞腸球菌，其它腸球菌對(duì)萬(wàn)古霉素都敏感，但常用的其它抗生素有較高的耐藥性 (30～90%)，包括高水平慶大霉素和高水平鏈霉素，因此，當(dāng)治療膽系感染經(jīng)驗(yàn)用藥的同時(shí)，要盡早做細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)及藥敏試驗(yàn)，根據(jù)藥敏結(jié)果，及時(shí)調(diào)整敏感用藥，盡量減少耐藥菌的發(fā)生。

[1]年 華,丁麗萍,褚玉卓.608份膽汁標(biāo)本中分離細(xì)菌菌譜及其藥敏結(jié)果分析[J].微生物學(xué)雜志,2009,29(2):93-96.

[2]聶哲群,尹家俊.膽汁中細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏分析[J].中國(guó)微生物學(xué)雜志,2004,16(3):179.

[3]陸 屏,蔡葉樨,楊丹蓉.128例膽道疾病患者膽汁細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2009,19(11):1442-1443.

[4]李 濤,熊自忠,沈繼錄,等.膽汁細(xì)菌種類及主要分離菌株耐藥性分析[J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2009,21(12):1080-1083.