3種車前草穗中總黃酮含量的測定

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(1.濱州醫學院，山東 煙臺 264003；2.中國農業大學煙臺研究院，山東 煙臺 264003)

車前草是車前科車前屬植物，又稱車前菜、牛舌草、車輪菜、豬耳草等。車前全身是寶，嫩可食用，成可入藥。車前作為一味常用中藥，始載于《神農本草經》，列為上品，被國家衛生部列入可用于保健品生產的原料名單。車前味甘、寒，無毒，具有清熱解毒、祛痰、止咳、利尿等作用，主氣癃止痛，利水通小便，除濕痹，久服輕身耐老。現代藥理研究表明，車前全草中主要有效成分為烏蘇酸、車前苷、環烯醚苷類、黃酮類成分[1-4]。其中黃酮類化合物為鎮咳主要成分，車前草中的黃酮及其苷類對呼吸系統有著明顯的作用[5]。車前苷作用于呼吸中樞,具有明顯的鎮咳作用，通過興奮分泌神經可促進氣管、支氣管液及消化液的分泌，且無溶血作用。苯乙酰咖啡酰糖酯類化合物能夠抑制環腺苷酸磷酸二酯酶與5-脂氧合酶,說明總黃酮類物質是車前鎮咳抗炎活性的主要物質基礎[6-9]。車前科植物有3屬約260種。而我國僅有車前屬1屬,13種[10]。目前開發用于藥用的主要是車前(plantagoasiaticalL.)、平車前(PlantagodepresaaWilld.)和大車前(PlantagomajorL.)[11]。但是在不同植物體內，總黃酮的含量可能不同，這對于藥材的采集及中藥有效成分的提取都具有至關重要的關系[12]。因此本文選取車前、平車前和大車前為供試材料,通過對3種車前穗中總黃酮含量的比較研究，為中藥有效成分提取及車前草的開發利用提供基礎理論依據。

1 材料與儀器

722型分光光度計(上海分析儀器廠),試劑標準品蘆丁為國藥集團化學試劑有限公司生產。所用試劑均為分析純，所用水為蒸餾水。所用車前，7月采集于本地，自然晾干,待用。

2 方法與結果

2.1 總黃酮的提取[13]分別精密稱取大車前、車前和平車前穗各1 g于索氏提取器中，加入70%的乙醇100 mL及少許CaCO3，提取8 h，提取液減壓濃縮蒸去乙醇。濃縮液于分液漏斗中用相同體積的乙醚洗2～3次，以除葉綠素及臘質等，然后用70%的乙醇定容至100 mL，待測。

2.2 繪制標準曲線[13]精密稱取蘆丁10 mg，用70%的乙醇溶解并定容至100 mL，使其濃度為100 μg/mL。將蘆丁溶液用70%的乙醇稀釋成0，5，10，15，20，25，30，35，40，45，50，55，60，65，70，75，80，85，90，95，100 μg/mL，各取1 mL于試管中，加70%的乙醇1 mL，加入300 μL 5%的NaNO2，6 min后加入300 μL 10%的Al(NO3)3溶液，6 min后再加入2 mL 4% NaOH，10 min后于分光光度計波長510 nm處測定A值。繪制濃度CA標準曲線。

2.3 總黃酮含量的測定[13]取經稀釋過的樣品溶液各1 mL，按上述同樣的步驟和方法測定得A值，從標準曲線查得樣品中總黃酮的含量(μg/mL),計算每克干物質中總黃酮含量(μg/g)，測得大車前、車前和平車前干穗中總黃酮含量分別為65 415.4，9 913.6，1 145.3 μg/g。

2.4 精密度試驗 精密吸取蘆丁對照品溶液2.0 mL，按2.2項下方法連續測定6次，測定其吸收度后RSD=0.32 %(n=6)。表明儀器精密度良好。

3 結語

黃酮類化合物具有降脂、抗血栓、抗氧化、降糖、鎮咳抗炎等多種生理活性，是中藥車前重要的有效成分之一。分析結果顯示,3種車前草穗中大車前總黃酮含量較高，其次為車前和平車前。因此，就總黃酮類化合物而言,這3種車前草均可進行開發利用，其中以大車前為優先品種。

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