周騰堅
Coulter LH750(以下簡稱LH750)是貝克曼庫爾特公司推出的高層次的全自動五分類血液細胞分析儀。有5種不同的分析模式,每小時最高分析速度為110個樣本,能提供31項細胞分析參數,白細胞分類散點圖及各種懷疑性、限定性旗標。LH750基于先進的V(電阻抗)、C(高頻傳導)、S(激光散射)技術對白細胞進行精確的分類。并可進行網織紅細胞的計數及分類。作者所在科室于2008年4月引進LH750分析儀一臺,至今已有一年半的時間,該儀器的使用大大提高了實驗室內的分析速度和工作效率。但是在實際使用過程中由于各種主客觀因素的影響,降低了測定結果的準確性和可靠性。現將我們在日常工作中LH750的一些使用及常見故障排除情況總結如下,以便與使用該儀器的同行共同探討。
1.1 標本 標本須由靜脈穿刺取得,不提倡毛細血管采血法。盛裝的試管有真空采血試管和非真空試管。推薦使用真空采血管,所注入血液的量必須達到刻度線以上,以保證儀器在吸樣過程中有足夠的血細胞供分析。必須充分抗凝,上機前再次顛倒混勻,既可以使試管內的血液均勻分布,還可以在混勻過程中檢查血液中有無明顯凝塊,以免堵塞吸樣針。
1.2 抗凝劑 使用EDTA-K2抗凝劑,其對細胞形態和血小板計數的影響較小。作者所在實驗室曾發生因血常規試管中加入了枸櫞酸鈉而造成血液部分凝固血小板計數明顯降低的差錯事故,給了全科人員一次深刻的教訓。
1.3 樣本編號 LH750英文工作站提供兩種不同的編號方式。方式一:在主界面上點擊添加樣品請求→自動編號順序→添加此樣品要求,此方法準確可靠,不易跳號。方式二:點擊分析配置→自動編號→起始為,此方法簡便快捷,但容易跳號,因此需要操作者注意。
1.4 質控 儀器自檢程序完成后,觀察各項參數及空白值。合格后再進行每日的質控物測定,只有質控物測定值符合要求方可進行常規標本的測定。
1.5 上機 將編好的血常規試管按順序放入儀器的試管架中,2小時內進行自動測定。需要注意的是標本的靜置時間不宜過久。標本久置后,試管中血液會出現分層現象,造成血液局部滲透壓差異,影響血細胞體積及有核細胞內顆粒分布情況,造成血細胞分類不準確。最明顯的即嗜堿性粒細胞計數出現假性升高,出現這種情況后,建議將標本顛倒混勻后靜置10分鐘,待血液細胞所處內環境恢復穩定再行測定。
2.1 在儀器測定過程中,需要對各個標本的分類計數情況進行仔細的分析,以確定報告的可靠性。在患者測試界面的Diff數據頁面,細胞計數一項顯示數字在8000以上時分類的結果更可靠。
2.2 分析散點圖 對于散點圖中各種不正常的點陣分布要有一定的警惕性,結合可疑性旗標進行綜合分析和判斷,必要時采用手工鏡檢。認真觀察分析散點圖對于原始幼稚細胞、有核紅細胞和瘧原蟲的檢出很有幫助。
2.3 分析直方圖 通過紅細胞直方圖的分析,對缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血、再障及地中海貧血的診斷提供初步的實驗室證據。有擬合曲線的血小板直方圖其結果可靠性高。
3.1 在主機屏幕上出現“LOWVCUUM DRIFTED”。原因:由于空氣中的灰塵等原因,0號口完全或不完全被堵住,造成6英寸負壓(6”)漂移。處理:按儀器鍵盤F-9-2-ENTER,調整負壓水平至6.000。若無法調整,可能堵塞嚴重所致,需將調節閥拆下進行清洗。從0號孔注蒸餾水,從1號孔出來,將調節閥甩干,干燥后裝回。
3.2 主機屏幕提示“BED NOT ADVANCED” 原因:搖床皮帶因異物粘附或機械原因前進緩慢,甚至停止。處理:主機鍵盤上按F-9-6-ENTER,觀察搖床皮帶滾動是否有規律,清楚粘附的血塊,必要時拆下搖床,清洗搖床皮帶及其下面的控制活塞組件,裝回。
3.3 主機屏幕提示“BACKWASH TANK NOT FULL”處理:按儀器鍵盤F-3-0-ENTER,如果灌注的速度比較慢,則是高負壓不足,處理高負壓管道。如果灌注時進來氣泡,可能是VC28瓶子破裂,更換之。
3.4 主機屏幕提示“ASPIRATION TIME OUT” 原因:自動進樣針超過5秒鐘還沒有進行穿刺動作。處理:檢查電源箱的30PSI壓力,將其調節在正常范圍內。
3.5 VACUUN OVERFLOW TANK 負壓溢流瓶,是儀器高負壓的存儲瓶。壓力不正常時,拔掉從右側VL40閥過來的兩根圓管,并觀察氣泵的負壓指示,負壓指示13~16inchHg,說明儀器高負壓正常。如果負壓指示大于16inchHg,負壓保護瓶頂部可能有結晶,清洗之,或重新插拔儀器VAC端。
我們認為,在正式操作儀器前,對每位操作人員進行系統的崗前培訓是非常有必要的。通過培訓,即可以加深操作者對儀器本身的認識,也可以有效降低日后的失誤率,提高工作效率。
LH750雖然采用先進的VCS技術,但是并不能完全代替手工測定,必要時進行手工計數及分類。血細胞分析儀屬精密儀器,實驗室的溫度濕度電源配置等必須符合儀器自身的要求,另外要特別注意控制室內的灰塵,堅持每天打掃實驗室。要養成每天開始工作前主動檢查試劑情況的習慣。另外,儀器每天開機運行“START UP”程序,進行自檢、清洗和空白值的測定,使每項參數都低于儀器設定的下限。在儀器運行工作中,注意觀察各項壓力指標是否正常,評估儀器運行狀態,保證儀器處于最佳工作狀態。將常見的報警提示記錄在冊并在以后的工作中改正,相互討論操作心得。每天工作結束后,要堅持進行日常保養。總之,適宜的工作環境、良好的操作習慣和必要的保養工作,對于減少儀器失誤率和提高結果的可靠性起到了積極的作用。