髓復(fù)康對恒河猴脊髓半橫斷損傷后自由基變化的調(diào)節(jié)作用

何 爽，張萬強(qiáng)，朱 嘉，孔煥宇

(1.長春大學(xué) 特殊教育學(xué)院，吉林 長春 130022；2.中國中醫(yī)科學(xué)院望京醫(yī)院，北京 100000)

急性脊髓損傷(ASCI)及其誘發(fā)的繼發(fā)性脊髓損傷(SSCI)是導(dǎo)致機(jī)體功能喪失的主要原因，而近年的研究發(fā)現(xiàn)，自由基及其介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，在急性脊髓損傷后的SSCI的病理過程中起著重要的作用[1-4]。我們前期實(shí)驗(yàn)證實(shí),髓復(fù)康(SFK)可以促進(jìn)ASCI恒河猴感覺運(yùn)動功能的恢復(fù)、在相當(dāng)?shù)某潭壬峡s小脊髓損傷灶的面積。本實(shí)驗(yàn)是在前期研究的基礎(chǔ)上觀察SFK對ASCI后，恒河猴血液中自由基水平的調(diào)節(jié)作用，探索該藥的作用機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 藥物與試劑 髓復(fù)康(SFK)由生黃芪、川芎、赤芍、紅花、葛根和三七等8味中藥組成，水煎，生藥濃度為2.5 g/mL。

1.2 模型制備與分組 成年雄性恒河猴14只(購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院，合格證號:0019631)，6 500～7 500 g,其中10只在無菌手術(shù)下造成脊髓T12左側(cè)半橫斷損傷模型[5],隨機(jī)分為髓復(fù)康組和模型組各5只，其余4只為正常對照組。

1.3 喂藥方法 術(shù)后髓復(fù)康組灌喂髓復(fù)康水煎液，1次/d，共30 d，每次生藥劑量為8.55 g/kg。第1次喂藥在麻醉清醒后4 h以內(nèi)，其余兩組恒河猴按髓復(fù)康組方式灌喂等量的生理鹽水。

1.4 取材 動物麻醉后打開胸腔，從左心室抽取血液2 mL，迅速注入抗凝管內(nèi)(按1∶10用3.8%枸櫞酸抗凝)，輕輕搖勻，1 mL用于測SOD，另1 mL用于測MDA。

1.5 測定方法 分別采用黃嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸(TBA)化學(xué)發(fā)光法測定SOD活性和MDA濃度(試劑盒購自南京建成生物制劑公司)。操作步驟均按試劑盒說明進(jìn)行。

2 結(jié)果

血液中SOD活性和MDA含量平均值，見表1。

表1 血液中SOD活性和MDA含量平均值比較

3 討論

機(jī)體內(nèi)存在著自由基和抗自由基兩個(gè)體系。在生理狀態(tài)下，通過酶系統(tǒng)和非酶系統(tǒng)可產(chǎn)生一些氧自由基，可由內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)如超氧化物歧化酶(SOD)等有效清除，保持動態(tài)平衡，因而不表現(xiàn)出毒性作用。這對于維持機(jī)體各種細(xì)胞和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)態(tài)十分重要。而脊髓損傷所誘發(fā)的缺血、缺氧及缺血后再灌注等病理過程中，會導(dǎo)致脊髓損傷區(qū)內(nèi)產(chǎn)生大量氧自由基[6]，過剩的自由基不僅可以直接造成脊髓組織的繼發(fā)性損傷，而且在啟動、激活和加劇其它繼發(fā)性損傷機(jī)制方面，也具有促進(jìn)作用。脊髓損傷后自由基反應(yīng)被公認(rèn)為是引起脊髓組織繼發(fā)性損傷的主要因素之一[7-8]。

MDA為過氧化脂質(zhì)的代謝產(chǎn)物，而SOD為自由基清除劑，它們的含量均可反映體內(nèi)自由基的變化情況[9-10]。從本實(shí)驗(yàn)觀察到，術(shù)后30 d，模型組恒河猴血液中丙二醛(MDA)的含量仍然很高，而抗氧化劑SOD活性明顯下降，表明自由基長時(shí)間參與了脊髓損傷后繼發(fā)性損害的病理過程。用藥后，SOD明顯升高，MOD含量明顯下降，這一結(jié)果提示，SFK在SCI后有抗自由基損害的作用，同時(shí)能夠提高機(jī)體抗氧化的能力。這可能是由于SFK含有多種益氣活血作用的藥物，通過開放微循環(huán)管道和加速微循環(huán)血流等環(huán)節(jié)，把脊髓損傷灶內(nèi)過剩的自由基運(yùn)走，改善了脊髓損傷區(qū)的供血和供氧，改善了微循環(huán)，減少了產(chǎn)生自由基的惡性刺激；同時(shí)由于其活血作用，加快了微循環(huán)血流速度，從而促進(jìn)了自由基的排泄，降低了血液自由基的含量；并且SFK益氣活血作用能夠增加內(nèi)源性自由基清除系統(tǒng)的活性。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，髓復(fù)康可能通過對自由基的調(diào)節(jié)作用，從一定程度上遏制了脊髓繼發(fā)性損傷的發(fā)展，而發(fā)揮脊髓保護(hù)作用，為損傷神經(jīng)的修復(fù)和再生提供有利的微環(huán)境。

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