乳酸菌固體發酵制劑對肉仔雞生產性能和盲腸菌群的影響

東北農業大學動物科學技術學院 徐基利 王文梅 郭奇苑 許麗＊

初生雛雞消化道內通常是無菌的，出殼后通過與空氣、環境和飼料等接觸逐步建立起自身的腸道微生態系統，由于此時腸道微生態系統剛開始建立，正常菌群未完全定植于上皮細胞，腸道缺乏有效菌群的保護，很容易受到外界病原菌的侵害而感染發病。通過添加外源性乳酸菌可增強畜禽免疫力和抗病力。乳酸菌在消化道黏附和定植后，使消化道內的有益菌群得到有效補充或增殖，優勢菌群在數量上和作用強度上占絕對優勢，同時有效抑制病原菌的增殖（郝生宏，2004），達到增強免疫功能、調節腸道菌群結構、促進畜禽生長的作用。優勢菌群通常是微生物生態平衡的核心因素，一旦優勢菌群數量下降或消失，就會導致菌群失衡（馬治宇，2008）。研究表明，來源于宿主本身的菌種制劑比外源宿主菌種制劑對機體健康更有益（Timmerman等，2006）。本試驗通過在日糧中添加不同水平的同源乳酸菌固體發酵制劑，研究其對肉仔雞生長性能和盲腸菌群的影響，并確定該菌種的適宜添加量，進而揭示同源乳酸菌與家禽腸道菌群之間的關系，為乳酸菌制劑在肉雞生產中的推廣應用提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 乳酸菌制劑由本實驗室制備，其中草乳桿菌分離自健康雞腸道，該制劑有效活菌數為5×108CFU/g；微生物檢測培養基有MRS固體培養基和麥康凱瓊脂培養基。

1.2 試驗動物和日糧 選取1日齡健康肉仔公雛300只隨機分成5組，每組5個重復，每個重復12只雞。Ⅰ組為對照組，飼喂基礎日糧；Ⅱ組飼喂基礎日糧＋0.01%黃霉素；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組為乳酸菌制劑組，分別飼喂基礎日糧＋0.05%草乳桿菌制劑、基礎日糧＋0.2%草乳桿菌制劑、基礎日糧＋1.0%草乳桿菌制劑，試驗期為4周。試驗基礎日糧組成及營養水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養水平

1.3 飼養管理 肉仔雞按常規飼養程序進行飼養管理，試驗肉雞分層飼養，自由采食、飲水。7日齡時對試驗雞進行新城疫滴鼻點眼免疫首免，14日齡時對試驗雞進行法氏囊滴鼻點眼免疫。

1.4 測定指標及方法

1.4.1 生長性能 分別在第14、28天早晨以重復為單位空腹稱重，計算各組平均日增重。每周統計一次采食量和剩料量，以重復為單位，計算各組平均日采食量和飼料轉化率。同時每天觀察雞的發病和死亡情況，記錄雞死亡數量。

1.4.2 盲腸菌群 分別在第14、28天早晨，每組隨機抽取5只體重適中的健康肉雞進行屠宰采樣，取盲腸冰凍保存，迅速帶到實驗室進行盲腸菌群檢測。采用平板涂布法測定盲腸內乳酸菌和大腸桿菌數量，取0.5 g盲腸內容物于裝有4.5 mL生理鹽水的無菌EP管中，振蕩混合均勻，連續進行倍比稀釋，得到 10-5、10-6、10-7濃度的菌液，用微量移液器吸取各梯度稀釋液100 μL滴入相應培養基上，用曲玻棒涂勻后培養。乳酸菌置于37℃含5%CO2的厭氧培養箱中培養，大腸桿菌置于有氧培養箱中培養，48 h后取出進行菌落計數，乳酸菌的培養用MRS瓊脂培養基，大腸桿菌的培養采用麥康凱瓊脂培養基。

1.5 數據統計分析 所有數據采用SPSS 16.0統計軟件進行單因素方差分析，用LSD進行多重比較，結果用平均數±標準差表示。

2 結果與分析

2.1 不同水平草乳桿菌制劑對肉仔雞生長性能的影響 見表2。由表2可知，1～14 d和15～28 d，試驗Ⅴ組平均日增重顯著高于對照組（P＜0.05），Ⅲ組和Ⅳ組與對照組差異不顯著 （P＞0.05），Ⅲ、Ⅳ組和Ⅴ組之間差異不顯著 （P＞0.05）；1～14 d，Ⅱ組與其他各處理間無顯著差異（P＞0.05），15～28 d，Ⅱ組顯著高于對照組和Ⅲ組（P＜0.05），但與Ⅳ和Ⅴ組相比，差異均不顯著（P＞0.05）。試驗全期，Ⅳ和Ⅴ組顯著高于對照組和Ⅲ組 （P＜0.05），且Ⅴ組顯著高于Ⅳ組 （P＜0.05）；Ⅱ組顯著高于對照組和Ⅲ組（P ＜ 0.05），但與Ⅳ和Ⅴ組差異不顯著（P＞0.05）。從料肉比方面看，1 ～ 14 d，各處理間無顯著差異（P ＞ 0.05）；15～28 d，Ⅴ組料肉比顯著低于對照組和Ⅲ組（P＜0.05），但與Ⅱ組和Ⅳ組無顯著差異（P＞0.05）。試驗全期，Ⅴ組料肉比顯著低于對照組和Ⅲ、Ⅳ組（P ＜ 0.05），與Ⅱ組差異不顯著（P ＞ 0.05），Ⅱ組顯著低于對照組（P＜0.05），Ⅲ、Ⅳ組和Ⅱ組間差異均不顯著（P＞0.05）?？傮w而言，乳酸菌制劑和抗生素均能改善肉仔雞的生長性能，但1.0%添加劑量優于0.05%、0.2%和抗生素添加組。

2.2 不同水平草乳桿菌制劑對肉仔雞盲腸菌群的影響 見表3。由表3可以看出，2周時，Ⅴ組盲腸內乳酸菌菌數顯著高于對照組和Ⅱ組 （P＜0.05），但與Ⅲ、Ⅳ組相比，差異不顯著（P ＞ 0.05）；Ⅲ、Ⅳ組乳酸菌菌數均顯著高于Ⅱ組（P＜0.05），與對照組相比無顯著差異 （P＞0.05）；4周時，Ⅳ和Ⅴ組乳酸菌數顯著高于Ⅱ組（P＜0.05），除Ⅱ組外，其余各組間乳酸菌數無顯著差異（P＞0.05）。2周時，Ⅴ組大腸桿菌數顯著低于其他處理組（P＜0.05），Ⅲ、Ⅳ組大腸桿菌數與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），Ⅱ組大腸桿菌數顯著低于對照組（P＜0.05），Ⅲ、Ⅳ組和Ⅱ組間大腸桿菌數差異均不顯著（P＞0.05）；4周時，Ⅳ和Ⅴ組大腸桿菌數顯著低于對照組、Ⅱ和Ⅳ組（P＜0.05），Ⅳ和Ⅴ組間大腸桿菌數差異不顯著（P＞0.05），Ⅱ組大腸桿菌數顯著低于對照組（P＜0.05）。隨著乳酸菌制劑添加量的增加，盲腸內乳酸菌數增加，大腸桿菌數減少，這表明，乳酸菌能夠優化腸道菌群結構。

表2 對肉仔雞日增重和料肉比的影響

表3 對肉仔雞盲腸菌群的影響lg CFU/g

3 討論

3.1 乳酸菌對生長性能的影響 益生菌可通過調節動物腸道微生態平衡、產酸、合成維生素、改善動物胃腸道功能和提高肉仔雞的健康狀況而發揮促生長作用，而且可通過產生淀粉酶和蛋白酶，促進營養物質的消化來改善生長性能。Kalavathy等（2008）研究表明，飼喂0.1%乳酸菌混合物可顯著降低雛雞1～21 d的料肉比和提高日增重。王晶等（2009）研究表明，飼喂同源乳酸菌能顯著提高1～3周齡肉仔雞的平均日增重和降低料肉比（P＜0.05）。本試驗結果表明，飼喂1.0%乳酸桿菌制劑能顯著提高雛雞平均日增重和降低料肉比（P＜0.05）。與上述研究結果基本一致。乳酸桿菌對生長性能的改善與乳酸菌制劑的添加量成正相關，這可能與足夠多的乳酸菌能夠占據更多的黏附位點，通過調節腸道微生態平衡發揮促生長作用有關，也可能與乳酸菌產酸和合成維生素等營養物質促進腸黏膜組織的發育有關。

3.2 乳酸菌對盲腸菌群的影響 馬治宇（2008）研究表明，乳酸菌菌粉能夠顯著抑制大腸埃希菌的繁殖，提高乳酸菌的數量。Jin等（1998）研究發現，添加不同水平乳酸桿菌可顯著降低肉仔雞盲腸內容物中大腸桿菌數量，提高乳酸桿菌的數量。本試驗研究結果亦表明，添加高劑量乳酸菌制劑能顯著增加盲腸內乳酸菌的數量，有效抑制盲腸內大腸桿菌的繁殖（P＜0.05），表明乳酸菌制劑的作用效果與添加水平有關，這可能是因為乳酸菌產生的某些代謝產物能夠增加腸黏液的黏度，從而增加了乳酸菌與腸上皮細胞結合的機會，而乳酸菌與大腸桿菌又具有相同結構的黏附受體，因此早期補充乳酸菌使其能更多的定植于腸上皮起到占位作用和產生足夠多的乳酸降低腸道pH，有效抑制致病菌及腐敗菌的生長。

4 結論

日糧中添加乳酸菌制劑能夠提高雛雞的生長性能，且呈劑量效應關系；添加1.0%乳酸菌制劑能夠有效降低14 d和28 d肉仔雞盲腸內大腸桿菌的數量，提高盲腸內乳酸菌的數量，且效果優于0.01%黃霉素組。

[1]郝生宏.益生菌制粒后活性及其對肉仔雞生產性能、血液生化指標和腸道微生物的影響：[碩士學位論文][D].山西：山西科技大學，2004.

[2]馬治宇.乳酸菌及其培養液對肉雞生產性能、腸道菌群及腸道結構的影響：[碩士學位論文][D].陜西：西北農林科技大學，2008.

[3]王晶，許麗，袁玲，等.同源乳酸菌對雛雞生長性能和盲腸菌群的影響[J].中國飼料，2009，15：24 ～ 26.

[4]Jin L Z，Ho Y W，Abdullah N，et al.Growth performance，intestinal microbial populations，and serum cholesterol of broilers fed diets containing lactobacillus cultures[J].Poultry Science，1998，77（9）：1259 ～ 1265.

[5]Kalavathy R，Abdullah N，Jalaludin S，et al.Effects of lactobacillus cultures and oxyteracyline on the growth performance and serum lipids of boiler chickens[J].International Journal of Poultry Science，2008，7（4）：385 ～ 389.

[6]Timmerman H M，Veldman A，Van Den Elsen E，et al.Mortality and Growth Performance of Broilers Given Drinking Water Supplemented with Chicken-Specific Probiotics[J].Poultry Science，2006，85：1383 ～ 1388.