阿托伐他汀鈣對兔動脈粥樣硬化的影響

張麗霞

血脂升高是動脈粥樣硬化的重要致病因素。降脂治療可顯著降低心血管疾病所致死亡和相關事件，逆轉動脈粥樣硬化病變的發生。他汀類藥物是臨床常用的降脂藥物，研究發現其物除降脂作用外，還具有抗炎、保護內皮、穩定斑塊、抗動脈粥樣硬化的作用［1，2］。本實驗通過觀察阿托伐他汀鈣對兔動脈粥樣硬化血管內皮的保護作用，探討其防治動脈粥樣硬化的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 健康日本大耳白兔30只，SPF級，雄性，體重(2.01±0.15)kg，兔齡4個月，由遼寧醫學院實驗動物中心提供［許可證編號:AYXK(遼2003－0011］。

1.2 試劑與儀器 內皮素-1(ET-1)試劑盒(天津千葉生物制品有限公司)、NO試劑盒(南京建成生物工程研究所)、阿托伐他汀鈣(每片10mg，輝瑞公司生產，批號:85837012)、膽固醇(TC，北京邦定生物制藥有限公司)、日立7170A全自動生化分析儀、上海751型分光光度計。

1.3 方法

1.3.1 動物分組與模型制備:將30只健康日本大耳白兔，按隨機數字表法分為3組，每組10只。空白對照組:給予普通飼料喂養;模型組:給予高脂飼料喂養(高脂飼料配方:1%TC+10%豬油+7.5%蛋黃粉+81.5%普通飼料);治療組:在給予高脂飼料喂養的同時加用阿托伐他汀鈣5mg·kg－1·d－1。每天每只兔給予飼料限制在200 g以內，飲水不限。實驗共進行12周。

1.3.2 血脂測定:在日立7170A全自動生化分析儀上測定TC、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)。

1.3.3 血清NO和ET-1的測定:實驗結束時，空腹12 h經兔耳中央動脈采血5ml，3000 r/min離心后取血清測定NO和ET-1。血清NO采用硝酸還原酶法測定，血清ET-1采用放射免疫法測定。

1.3.4 病理形態學檢查:實驗結束時，處死動物，取主動脈全長，常規脫水、石蠟包埋后連續切片，切成4 μm的薄片，HE染色，觀察病理形態學改變。

1.4 統計學分析應用SPSS 13.0統計軟件，計量資料以表示，多組間比較采用單因素方差分析(One-way ANOVA)，2組間比較采用LSD檢驗，理形態學資料采用對比描述分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組血脂水平比較 與空白對照組比較，模型組、治療組兔的血清TC、TG、LDL-C水平顯著升高(P ＜0.01)，而 HDL-C濃度顯著降低(P＜0.01);與模型組比較，治療組兔血清TC、TG、LDL-C水平顯著降低(P ＜0.01)，而HDL-C水平顯著升高(P ＜0.01)。見表1。

表1 3組血脂水平比較n=10，mmol/L，

表1 3組血脂水平比較n=10，mmol/L，

注:與空白對照組比較，*P ＜0.01;與模型組比較，#P ＜0.01

2.2 3組血清NO、ET-1水平比較 與空白對照組比較，模型組、治療組血清NO水平顯著降低(P＜0.01)，而ET-1水平顯著升高(P＜0.01);與模型組比較，治療組血清NO顯著升高(P ＜0.01)，而ET-1水平顯著降低(P ＜0.01)。見表2。

表2 3組血清NO和ET-1水平比較n=10，

表2 3組血清NO和ET-1水平比較n=10，

注:與空白組比較，*P ＜0.01;與模型組比較，#P ＜0.01

組別 NO(μmol/L) ET-1(pg/ml)空白對照組116.6 ±5.8 312.53 ±6模型組 80.8 ±3.5*463.53 ±24*治療組 95.8 ±0.8*#351.25 ±8*#

2.3 病理形態學觀察結果 HE染色后于光鏡下觀察，可見空白對照組兔血管內膜光滑完整，中膜平滑肌細胞排列整齊，內皮下無泡沫細胞沉積(圖1);模型組兔血管內膜明顯增厚并向管腔突起，形成動脈粥樣硬化斑塊，內含大量泡沫細胞，中膜平滑肌細胞增生、排列紊亂，具有典型的動脈粥樣硬化表現(圖2);治療組兔血管內膜輕度增厚，有較少量泡沫細胞，中膜平滑肌細胞增生及排列紊亂不明顯(圖3)。

圖1 空白對照組血管內膜(HE×100)

圖2 模型組血管內膜(HE×100)

圖3 治療組血管內膜(HE×100)

3 討論

Austin等［3］研究證實應用他汀類藥物強化降脂可逆轉動脈粥樣硬化進展。阿托伐他汀鈣屬于3羥基-3甲基龍二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，通過抑制TC合成的限速酶-HMG-CoA還原酶，抑制肝細胞內TC的合成，上調肝細胞表面LDL-C受體的密度和活性，從而顯著降低血LDL-C水平。Nissen等［4］研究顯示，應用阿托伐他汀強化降脂治療可阻斷冠心病患者冠狀動脈粥樣硬化病變的進展。本研究顯示:模型組兔的血清TC、TG、LDL-C水平均顯著升高(P ＜0.01)，而HDL-C水平顯著降低(P＜0.01);兔血管內膜明顯增厚，形成動脈粥樣硬化斑塊，內含大量泡沫細胞，具有典型的動脈粥樣硬化表現;而治療組兔血清TC、TG、LDL-C水平顯著降低(P ＜0.01)，HDL-C水平顯著升高;兔血管內膜輕度增厚，動脈粥樣硬化病變程度較模型組明顯減輕。表明:阿托伐他汀鈣具有強大的降脂作用，并能升高HDL-C水平，逆轉動脈粥樣硬化進展。

在多種致病因素(血脂異常、糖尿病、高血壓等)作用下，內皮細胞形態結構受損和功能改變，導致血管屏障功能的損害，使血液中的脂質和單核細胞等更易沉積在內皮下間隙，進一步形成泡沫細胞，并促使血管平滑肌細胞增殖，導致動脈粥樣硬化病變的形成。因此，改善血管內皮功能已成為防治動脈粥樣硬化的重要措施。NO是內皮細胞合成的一種重要的血管活性物質，具有舒張血管，抑制血小板聚集、白細胞黏附及平滑肌增殖，減弱氧自由基產生、低密度脂蛋白氧化等抗動脈粥樣硬化的作用。ET也是由血管內皮細胞產生，是目前已知的最強的血管收縮劑。內皮功能障礙導致NO降低、ET增加，在動脈粥樣硬化病理進程中起重要作用［5］。研究發現他汀類藥物通過多種途徑激活NOS，促進NO合成［6］，改善血管內皮功能本研究顯示:模型組兔的血清NO濃度顯著降低，而ET-1水平顯著升高;兔血管內膜明顯增厚，形成動脈粥樣硬化斑塊，具有典型的動脈粥樣硬化表現;表明伴隨血脂升高血管內皮功能受損促進了動脈粥樣硬化的形成;而治療組兔血清NO濃度顯著升高，ET-1濃度顯著降低，兔血管內膜輕度增厚，動脈粥樣硬化病變程度較模型組明顯減輕。

綜上所述，阿托伐他汀鈣除具有強大的降脂作用外，還通過升高NO濃度降低ET-1濃度，改善血管內皮功能發揮抗動脈粥樣硬化作用［7］。

1 龔志剛，蘇東東，丁世芳，等.辛伐他汀對柯薩奇B3病毒感染小鼠心肌早期的保護作用.心臟雜志，2006，18:149-151，158.

2 張曉捷，孫宗全，杜心靈.洛伐他汀預處理的延遲性心肌保護作用及其機制.心臟雜志，2006，18:50-53.

3 Austin PC，Mamdani MM.Impact of the pravastatin or atorvastatin evaluation and infection therapy－thrombolysis in myocardial infarction 22/Reversal of Atherosclerosis with Aggressive Lipid Lowering trials on trends in intensive versus moderate statin therapy in Ontario.Canada Circulation，2005，112:1296-1300.

4 Nissen SE，Tuzcu EM，Schoenhagen P，et al.Effect of intensive compared with moderate lipid－lowering therapy on progression of coronary atherosclerosis:a randomized controlled trial.JAMA，2004，291:1071-1080.

5 Desjardins F，Balligand JL.Nitric oxide－ dependent endothelial function and cardiovascular disease.Acta Clin Belg，2006，61:326-334.

6 Yamanouchi D，Banno H，Nakayama M，et al.Hydrophilic statin suppresses vein graft intimal hyperplasia via endothelial cell－tropic Rho－kinase inhibition.J Vasc Surg，2005，42:757-764.

7 王順光，趙紅寧.阿托伐他汀鈣對短暫性腦缺血發作患者頸動脈粥樣硬化斑塊和血脂的影響.中國全科醫學，2008，11:2175-2176.