TGF-α、CEA、CA199、CA125 聯合檢測消化道惡性腫瘤臨床應用

孫慧

腫瘤標志物是指腫瘤細胞在癌變過程中產生的抗原和一些生物活性物質，在正常組織和良性疾病時幾乎不產生或含量甚微，因而有助于腫瘤的臨床診斷、療效觀察、復發監控和預后判斷。近年來，由于現代實驗診斷技術的飛速發展，腫瘤標志物已廣泛應用于臨床，為腫瘤的早期診斷和早期治療提供實驗室依據。蛋白芯片是一種高通量、高靈敏度、高特異性且微型化的蛋白質分析技術［1］腫瘤標志物檢測在診斷消化道惡性腫瘤具有重要的參考價值，但單一指標檢測始終存在著特異性不強，靈敏度低等不足［2］。聯合檢測有助于提高診斷的準確性，蛋白質芯片是一種高通量，高靈敏度，高特異性且微型化的蛋白質分析技術［1］實驗表明蛋白芯片技術對多種疾病的早期診斷均有一定的作用［3，4］為探討其在消化系惡性腫瘤患者血清水平的變化及臨床價值，我們分別對本院2005年1月到2009年1月收集到的294例消化道惡性腫瘤住院患者，同期住院的消化道良性病患者107例以及來我院作健康體檢的正常人335名血清中TGF-α、CEA(癌胚抗原)、CA199(糖鏈抗原l99)、CA125(糖類抗原l25)水平進行聯合測定，探討其在消化道惡性腫瘤診斷中的作用，現報告分析如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 資料為本院2005年1月至2009年1月的，均經病理檢查明確診斷，其中食管癌56例，胃癌61例，結腸癌149例，胰腺癌28例;男198例，女96例，平均年齡54.1歲。其中食管炎21例，胃炎25例，消化道潰瘍53例，結腸炎5例，胰腺炎3例;男69例，女38例，平均年齡43.9歲。正常組均系;其中男196例，女139例，平均年齡38.2歲。

1.2 實驗方法 各組均采集空腹靜脈血2 ml，離心取血清，-20℃保存備用。蛋白芯片試劑盒為美國Abbott公司提供，按說明書操作，試劑盒提供的正常參考值范圍為:CA199＜37 U/ml，CA125 ＜35 KU/L，CEA ＜5 μg/ml，TGF-α0.74 ～1.54 ng/ml。

1.3 統計學方法 使用SPSS13.0統計軟件進行統計分析，顯著性檢驗使用χ2檢驗(P＜0.05)。

2 結果

2.1 各組陽性率比較 腫瘤組的陽性率顯著高于良性組及正常組(χ2=45.725，P=0.000;χ2=234.619，P=0.000)。蛋白芯片對消化道惡性腫瘤檢測的陽性率為82.93%，特異度為71.49%，陽性預測值為65.95%，陰性預測值為86.34%，準確度為76.09%，見表1。

表1 蛋白芯片對各組的檢測比較(例，%)

2.2 4種腫瘤標志物在各組中的比較 腫瘤組的陽性率均著高于良性組和正常組(P＜0.05);4種腫瘤標志物聯合檢測的陽性率均顯著高于單一標志物檢測(P＜0.05)見表2。

表2 4種腫瘤標志物在各組中的比較

本實驗即運用蛋白芯片技術，通過同時定量分析被檢者血清中的4種腫瘤標志物的含量，對消化道惡性腫瘤進行聯合檢測分析。結果表明，蛋白芯片可以提高消化道惡性腫瘤診斷的陽性率(82.93%)和陰性預測值(86.34%)，減少漏診。

3 討論

消化道腫瘤的早期診斷早期治療是提高療效的最有救手段之一目前已有多種相關標志物在臨床得到廣泛應用，但單一指標始終存在著特異性不強、陽性率較低等不足［2］現應用多種常用指標經行聯合檢測以提高靈敏度。

TGF-α廣泛分布于癌細胞、轉化細胞及胚胎等組織中。它在口腔癌、肺癌、食管癌、乳腺癌的組織中均有很高的表達，體內 TGF-α的過表達可導致腫瘤形成，王虹等［5］發現TGF-α可能通過:① 由于癌細胞通過自分泌及旁分泌作用產生TGF-α及TGF-α調節系統平衡失調，使癌細胞對自分泌TGF-α的抑制作用更為敏感。導致TGF-α自分泌增多，以抵消TGFB的抑制作用［6］;②因血清高水平的TGF-α及組織細胞癌基因與腫瘤啟動基因轉化的高表達，更進一步促使正常細胞的轉化，加速惡性腫瘤自分泌TGF-α增多，加快腫瘤形成和生長，或是當細胞正常生長出現障礙。使之致癌因素增加。而導致肺、食管、肝、乳腺和大腸等的腫瘤。

1965年Gold和Freedman首先發現在結腸癌中存在癌胚抗原(CEA)。癌胚抗原(CEA)最初發現于成人結腸癌組織中，是一種結構復雜的可溶性糖蛋白，胚胎期主要存在于胎兒的胃腸管、胰腺和肝臟.出生后組織含量很低。發生消化道惡性腫瘤時可見血清CEA水平升高，CEA是目前研究最廣泛的一種腫瘤標志物，胃腸道腫瘤細胞由于極性消失，分泌的GEA常反流到血液或淋巴系統，導致血清中CEA升高［7］，多種惡性腫瘤如結直腸癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌和肺癌中均有升高，超過20 μg/L往往提示有消化道癌腫，但因為它自內胚層，內胚層來源的腫瘤以及內胚層來源以外的腫瘤也普遍存在CEA。因此，CEA不能作為癌腫定位診斷的指標［8］。但根據其表達特性，可以用來早期篩選。

腫瘤相關糖鏈抗原(CA)是腫瘤表面的抗原，或者是腫瘤細胞所分泌的抗原，糖鏈抗原是一類高分子量的粘蛋白(musin)或血型抗原。CA具有一系列抗原，其在消化道腫瘤標志物中較有代表意義的有 CA199、CA125、CA50、CA724等。CA199是1979年Koprowski等制備出的抗消化道腫瘤的單克隆抗體，在由內胚層細胞分化來的多種上皮類惡性腫瘤血清中均可見升高，臨床多用于胰腺癌的診斷，在胰腺癌、結腸癌和胃癌，CA199大量表達于癌組織的糖脂和糖蛋白中，并且出現于血清和尿中。CA199是目前對胰腺癌敏感性最好臨床應用最廣泛的腫瘤標志物，在腸癌、胃癌、肝癌及膽囊癌的的檢測中成為重要的腫瘤標志物［9］，所有消化道惡性胂瘤患者血清中 CA19-9水平均高于正常人［10］。1981年Bast等學者利用人卵巢漿液性囊腺癌腹水中的腫瘤細胞為免疫原制備出，與CA199同屬糖鏈抗原的一種單抗CA125。CA125是一種與卵巢癌相關的抗原，近年來報道在胃癌、結直腸癌、胰腺癌有較高的陽性檢出率，也有報道其在肝癌時升高最顯著。學者報道胃癌患者血清CA125檢測，對于腹膜轉移和復發的陽性率達42.9% ～72.2%，在腹膜種植、腹水和漿膜浸潤的診斷方面CA125的診斷陽性率高于CEA和CA199［11］胰腺炎、肝硬化、肝壞死及女性排卵期、妊娠前子宮肌瘤等良性疾病也有假陽性出現。由此可見，CA125特異性較低［7］綜上所述，測定各種腫瘤標志物診斷早期癌腫陽性率仍較低。為提高陽性率，應提倡測定腫瘤附近組織或體液(胰液、胃液，腸液等)中的腫瘤標志物，其陽性率比外周血明顯增高。

本組實驗應用 TGF-α、CEA、CA199、CA125 聯合檢測食管癌、胃癌、結腸癌、胰腺癌的測量陽性率達到70.37%、76.56%、79.29%、90.14%，有效提高檢測陽性率。陽性率均著高于良性組和正常組的49.54%和21.75%。現將多種特異性較高的腫瘤標志物聯合測定，應用多變量分析，血清TGF-α，CEA，CA199，CA125，可大幅度地提高靈敏度，提高消化道惡性腫瘤診斷的陽性率(82.93%)和陰性預測值(86.34%)，減少漏診，值得臨床推廣應用。

［1］Eggeling F，Davies H，Lonmas L.Tissue-specific microdissecrion coupled with proteinchip array technologies:applications in cancer research.Biotechniques，2000，29(5):1066-1070.

［2］Kayba H.Tumor markers:essential diagnostic tools for radiologists.Nippon Igaku Hoshasen Gakkai zasshi，2003，63(4):133.

［3］Weinberger SR，Dalmasso EA，Fung ET.Current achievements using ProteinChip array technology.Curr Opin Chem Biol，2001，6(1):86-91.

［4］Rubin RB，Merchant M.A rapid protein profiling system that speeds study of cancer and other diseases.Am Clin Lab，2000，19(8):28-29.

［5］王虹.轉化生長因子與腫瘤.國外醫學:腫瘤學分冊，1995，22(5):259.

［6］Bates VE，Valverus，Ennis BW.Expression of the transforming growth factor-αepidermal growth factor receptor path way in ncanal human breast epithelia1.Endocr Soci，1990，126(1)596.

［7］夏春.幾種常見腫瘤標志物在胃腸道等惡性腫瘤中的臨床意義.國外醫學消化系疾病分冊，1998，18(3):139.

［8］Minton J P，Hoehn JL，Gerber DM，et al.Result of a 400 patients-CEA look colorectal study.Cancer，1985，55(6):1284.

［9］SASAKI A，KAWANO K，INOMATA M.Value of Serum carbohydrate antigen 19-9 for Predicting ertrahepatic metastasis in patients will liver metastasis from colorectal carcinoma.Hepatogastroenterolgy，2005，52:1814.

［10］王繼東，高峰.消化系統腫瘤患者中CAq白微粒子酶免疫擊檢測.上海免疫學雜志，1997，17(1):57.

［11］鄭虹，王舒寶.胃癌腹膜轉移的早期診斷和預測.國外醫學腫瘤學分冊，1994，21(3):162.