液基細(xì)胞學(xué)與HPV檢測在早期宮頸病變中的應(yīng)用對比分析

黃東莉 紀(jì)愛玲

835000 新疆伊犁農(nóng)四師醫(yī)院婦產(chǎn)科 (黃東莉) 新疆伊犁州計(jì)生辦 (紀(jì)愛玲)

HPV高危型病毒可以引起宮頸癌，而低危型只引起良性病變[1-2]。本文為此將宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)與HPV檢測技術(shù)聯(lián)合進(jìn)行宮頸病變早期篩查，希望找出一種高效的宮頸病變早期篩查手段，以利于婦科病普查工作順利有效的開展。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2007年9月～2009年7月于本院婦科門診要求進(jìn)行宮頸病變篩查的750例患者給予宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查和高危型HPV檢測及電子陰道鏡下宮頸活組織病理檢查。所有患者無宮頸物理治療史，3個(gè)月內(nèi)無任何宮頸藥物治療及陰道炎病史。患者年齡19～68歲，平均年齡為(36.7±7.2)歲。孕次0～10次，產(chǎn)次0～6次，均有性生活史。

1.2 檢測方法

1.2.1 宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢測 采用美國liquid-protest系統(tǒng)進(jìn)行檢測。充分暴露宮頸，若分泌物較多時(shí)可用棉簽輕輕拭去，不可用力擦。將Rovers毛刷中央部分輕輕深插入子宮頸管，以使較短的刷毛能完全接觸到子宮頸，柔和地向前抵住毛刷，并按同一個(gè)時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)毛刷5周以上，切勿來回轉(zhuǎn)動(dòng)。取下Rovers毛刷刷頭放入保存小瓶中，擰緊瓶蓋。按照TBS分類系統(tǒng)對宮頸病變診斷，包括：(1)正常范圍(Within normal limits，WNL)；(2)意義不明的不典型鱗狀細(xì)胞(typical squamous cell of undermined significance，ASCUS)；(3)低度鱗狀上皮內(nèi)病變(Low-grade squamous intraepithelial lesions，LSIL)；(4)高度鱗狀上皮內(nèi)病變(high-grade squamous intmepithelial lesions，HSIL)；(5)鱗癌(squamous cell carcinoma，SCC)。仍采用細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)相對應(yīng)的診斷術(shù)語。細(xì)胞學(xué)診斷陽性是指ASCUS及以上病變。

表1 TCT、HR-HPV檢查結(jié)果與陰道鏡下活檢結(jié)果比較

1.2.2 HPV檢測 HR-HPV檢測采用Digene公司hybrid captureⅡ方法，取一定量與液基細(xì)胞學(xué)相同的方法采集的樣本，進(jìn)行DNA抽取30min，PCR基因擴(kuò)增120min，應(yīng)用導(dǎo)流雜交儀進(jìn)行導(dǎo)流雜交15min，顯色5min，結(jié)果分析。檢測13種HR-HPV，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型，HR-HPV≥1.0pg/ml為陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.3 陰道鏡下活檢 采用Olympus公司的陰道鏡數(shù)字成像系統(tǒng)進(jìn)行檢測。采用3%冰醋酸試驗(yàn)，綠色鏡觀察血管形態(tài)。碘溶液涂宮頸，檢查是否著色，用活檢鉗于可疑區(qū)取組織，若鏡下未發(fā)現(xiàn)可疑病變部位，則常規(guī)在移行帶3、6、9、12點(diǎn)做活檢。診斷標(biāo)準(zhǔn)分為：宮頸慢性炎癥；上皮內(nèi)瘤變I級和(或)濕疣(Ⅱ級)；上皮內(nèi)瘤變Ⅱ/Ⅲ級(CINII/CINⅢ)，其中CⅢ包括原位癌；鱗癌；腺癌。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 以陰道鏡活檢診斷的HSIL(CI2/3)和SCC為標(biāo)準(zhǔn)與細(xì)胞學(xué)結(jié)果及HPV-DNA檢出率對照。差異顯著性分析采用t檢驗(yàn)，顯著性差異界限為P＜0.05。各種檢測均雙盲進(jìn)行。

2 結(jié)果

本組研究資料中，細(xì)胞學(xué)結(jié)果有異常的患者150例，占20.0%(150/750)。ASCUS和LSIL是異常細(xì)胞學(xué)結(jié)果中最常見的兩種，約占病例數(shù)的76.7%(115/150)；ASCUS中，其陽性檢出率為3.75%(3/80)；HR-HPV檢出者僅為4例，陽性檢出率為8.0%(4/80)，均以組織學(xué)檢查作為金標(biāo)準(zhǔn)，陽性檢出率指CINⅡ及其以上病變，因?yàn)榇蟛糠值腃INI不治療也能自然消退。LSIL組陽性檢出率為7/35(20.0%)，與ASCUS組相比，兩組陽性檢出率有顯著性差異。同時(shí)HSIL，SCC與活檢符合率分別為91.9%和100%，HR-HPV與活檢符合率分別為96.7%和100%。TCT、HR-HPV兩者陽性檢出率兩組間均無顯著性差異。隨著TCT的級別越高，陰道鏡下活檢符合率越高。具體情況見表1。

3 討論

近年來我國宮頸病變的發(fā)生有明顯上升和年輕化趨勢，國內(nèi)外研究表明宮頸病變是一個(gè)從宮頸CIN-早期浸潤癌-浸潤癌由量變到質(zhì)變的連續(xù)發(fā)展過程。早期宮頸病變的治療效果好，據(jù)報(bào)道宮頸浸潤性癌5年生存率67%，早期癌為90%，原位癌CINI～Ⅲ為100%[3-4]。

我國近年來一些大城市及經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)也應(yīng)用LCT及TBS系統(tǒng)進(jìn)行宮頸病變的普查工作，使宮頸病變及CIN的檢出率明顯的提高。不過其檢測也有一定的局限性。(1)在組織病理學(xué)上，根據(jù)組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞排列和形態(tài)很容易分辨和判斷，但在LCT抹片中均為脫落的上皮細(xì)胞，有時(shí)伴有細(xì)胞變性。又缺乏組織結(jié)構(gòu)的支持，可能造成一定程度的混淆，不易判斷。(2)LCT取材的范圍較廣，規(guī)范的取材方法需要將取樣器深入宮頸口一定深度，給予一定壓力的情況下。旋轉(zhuǎn)5圈。這樣獲得的樣本，基本涵蓋了宮頸全周的脫落細(xì)胞，而組織病理學(xué)取材的范圍較窄，主要是取材醫(yī)師在陰道鏡下，判斷可疑病變部位進(jìn)行活組織取材，通常僅取病變最重處，這樣獲得的標(biāo)本僅代表取材部位的病變。二者取材范圍的差異，可能導(dǎo)致組織病理學(xué)為假陰性診斷，而非細(xì)胞學(xué)診斷為假陽性，必要時(shí)應(yīng)對病例進(jìn)行隨訪。

本文通過HPV檢測陽性、宮頸細(xì)胞學(xué)陽性分別與宮頸組織活檢病理結(jié)果比較：CIN I級及以上級別陽性符合率都在90%以上，差異無顯著性(P＞0.05)。這表明HPV與液基細(xì)胞學(xué)檢測在宮頸組織活檢病理高級別中陽性結(jié)果相近。HPV聯(lián)合TCT檢測結(jié)果中LSIL、HSIL、癌的檢出率均高于同期單純TCT性檢出率。其中LSIL及TCT陽性總檢出率兩組比較，差異有顯著性(P＜0.05)。這與相關(guān)研究一致。故對于LSIL級以上病變，HR—HPV檢測可不作為常規(guī)。陰道鏡檢查最大的優(yōu)點(diǎn)是可發(fā)現(xiàn)肉眼看不見的亞臨床病變，并在可疑病變處取活檢，從而提高活檢的陽性率和診斷準(zhǔn)確率。但由于宮頸管內(nèi)病變較難觀察，存在一定假陰性，因此，陰道鏡下活檢，可能漏掉一些嚴(yán)重病例，尤其是宮頸管內(nèi)病變。因此，將HPV檢測與TCT檢測技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于宮頸病變的檢查中，切實(shí)可行。

[1] 楊英捷,趙健,李雪倩,等.人乳頭瘤病毒同亞型感染與宮頸病變的相關(guān)性[J].中國婦產(chǎn)科臨床,2006,7(4):253-256.

[2] 李亞里,楊怡卓.人乳頭瘤病毒亞型檢測在宮頸病變分流管理中的意義[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2007,23(7):501-503.

[3] 蘇光,錢莉蕓,劉陽,等.多重人乳頭瘤病毒感染檢測在宮頸病變診斷中的價(jià)值[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2007,23(9):706-707.

[4] 卞美璐.WHO(2006)宮頸病變綜合防治實(shí)踐指南簡介[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2007,23(7):557-560.