藜蒿舒壓膠囊的毒理學安全性評價

諶樂禮，蔡 宏，張維民，吳 爭，夏芝璐，丁 晟，鄧奇濤，肖 崗

(江西省疾病預防控制中心，江西 南昌 330029)

藜蒿舒壓膠囊是由藜蒿提取物為原料制成的保健食品。藜蒿(Artemisia selengensis Turcz)學名狹葉艾，又名蘆蒿、水蒿、青艾等，主要生長在鄱陽湖一帶。本草綱目草部第十五卷記載：“藜蒿氣味甘甜無毒，主治五脹邪氣，風寒濕脾，補中益氣，長毛發，久食輕身，耳聰目明，防衰。中醫認為其除食用之外還有清熱、利濕、殺蟲之功能。”有利膈、開胃、行水和解毒等功效。

近年來研究表明,藜蒿具有多方面的藥理作用[1-2]，同時藜蒿還含有豐富的人體必需微量元素和黃酮類化合物，可作為保健食品原料和純天然抗氧化劑[3-4]。藜蒿舒壓膠囊是以藜蒿生物堿具有降壓藥理作用而開發的保健食品。本實驗采用保健食品安全性毒理學評價程序和方法[5]，對藜蒿舒壓膠囊的食用安全性進行評價。

1 材料與方法

1.1 受試物

藜蒿舒壓膠囊，內容物為固體粉末。人體推薦量3g/60kgBW/d。

1.2 實驗動物

健康SPF級ICR小鼠和SPF級SD大鼠均由西普爾必凱實驗動物有限公司(許可證號為SCXK(滬)2003-0002)提供，小鼠體重 18～22g，大鼠體重 60g左右。動物房許可證號SYXK(贛)2007-0001。

1.3 方法

1.3.1 小鼠急性毒性試驗采用最大耐受劑量法，劑量為20.0g/kg BW。Ames試驗用平板摻入法。骨髓細胞微核試驗用30h給受試物法。小鼠精子畸形試驗為連續5d經口給予受試物：于首次給受試物后的第35d處死動物，取附睪制片、固定、染色、閱片。在30天喂養試驗中觀察動物一般狀況、進食、飲水及活動等；每周稱1次體重和2次食物攝入量，觀察體重變化，計算總食物利用率；于試驗結束時空腹過夜斷頭采血，測量血液學及生化學指標；稱取體重及其肝、腎、脾、性腺的重量，計算臟體比；病理組織學檢查。

1.3.2 采用SPSS 11.0統計軟件進行統計分析。計量資料用方差分析。計數資料用χ2檢驗。

2 結果

2.1 急性毒性試驗

小鼠經空腹灌胃后，觀察7d，雌、雄小鼠均未見中毒癥狀，無死亡，雌雄無差異。受試物對雌、雄小鼠經口最大耐受量MTD＞20.0g/kgBW，屬無毒級。

2.2 Ames試驗

各劑量組在加S9或不加S9條件下，均未引起回復突變菌落數明顯增加。受試物Ames試驗結果為陰性。

2.3 小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗

陽性對照組與溶劑對照組比較差異具有統計學意義(P＜0.01)，受試物各劑量組微核率與溶劑對照組比較無明顯差異(P＞0.05)，小鼠骨髓細胞微核試驗陰性。

2.4 小鼠精子畸形試驗

陽性對照組精子畸形率與溶劑對照組比較，差異具有統計學意義(P＜0.01)，受試物各劑量組精子畸形率與溶劑對照組比較無統計學意義(P＞0.05)，小鼠精子畸形試驗陰性。

2.5 30d喂養試驗

用體重60g左右SPF級斷乳大鼠80只，雌雄各半。隨機分為4組，即對照組和3個受試物組，各劑量組動物分別喂飼按比例添加受試物配制的全價營養飼料(進食量按體重的10%計算)其在高、中、低劑量組飼料中的比例分別為5.00%、2.5%、1.25%，連續喂飼30d。劑量分別為5、2.5、1.25g/kgBW，相當于人體推薦量的100、50、25倍。對照組給予全價營養飼料。單籠喂養，自由飲食，記錄大鼠進食量、體重，連續觀察30d。

表1 受試物對大鼠體重(g)影響(x±s，n＝10)

2.5.1 動物一般狀況。試驗期間動物的活動、攝食、飲水、排便等一般狀況未見明顯異常。

2.5.2 受試物對大鼠體重的影響。如表1。

表2 受試物對大鼠食物利用率的影響(x±s，n＝10)

由表1可見，雌、雄各劑量組動物體重與對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05)，說明受試物在本試驗條件下對動物的體重無明顯影響。

2.5.3 受試物對大鼠總食物利用率的影響。如表2。

由2可見，雌、雄各劑量組動物的進食量和總食物利用率與對照組比較差異無統計學意義，說明受試物在本試驗條件下對動物的進食量和總食物利用率無明顯影響。

2.5.4 血液學檢查結果。 如表3。

由表3可見，雌、雄各劑量組動物的血常規指標與對照組比較差異無統計學意義，說明受試物在本試驗條件下對動物的血常規指標無明顯影響。

表3 受試物對大鼠血液學指標的影響(x±s，n＝10)

2.5.5 血清生化檢驗結果。如表4所示。

表4 受試物對大鼠血清生化指標的影響 (x±s，n＝10)

由表4可見，各劑量組動物的血清生化指標(谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、肌酐、膽固醇、甘油三酯、總蛋白、白蛋白、尿素氮、血糖)與對照組比較差異無統計學意義，說明受試物在本試驗條件(下轉第464頁)周血出現少量的HbF紅細胞，在陰道出血時即使沒有胎兒血經洗脫和染色后乃有少量陽性紅細胞，造成難以診斷，筆者采取在取陰道血的同時采集母體外周血一份一同做HbF檢測，如果陰道血的HbF紅細胞含量大于外周血的HbF紅細胞，即可診斷有胎兒血；陰道血的HbF紅細胞含量與母體外周血持平，結合臨床指針、胎心監護、B超等檢查可排除胎兒宮內失血。

妊娠期陰道出血是否含有胎兒血，胎兒血紅蛋白是診斷的決定性因素[4]，對于臨床處理病情起到十分關鍵的作用。筆者通過2年多的時間對113例陰道出血的孕婦進行HbF紅細胞的檢測，其結果與臨床診斷和病人病情一致。妊娠期陰道出血時檢測出含胎兒血 (陰道血HbF紅細胞含量高于外周血)，說明胎兒在宮內有出血現象，結合B超診斷，如果提示胎兒還活著，孕周大于35周，立即行剖宮產以結束妊娠，挽救孕婦和胎兒的生命為第一。經檢測陰道血為母體血，不含胎兒血，妊娠在35周前，胎兒未達到成熟，陰道出血量不多，情況穩定的孕婦可采取期待療法進行治療。

HbF的洗脫和染色方法以及抗堿試驗，可快速確定母體血中是否含過多胎兒紅細胞，有助于對分娩前胎兒晚期出血做出迅速判斷[5]，為鑒別妊娠期陰道出血時是否含有胎兒血提供診斷依據。該方法操作簡便、檢測快速、結果準確、方便開展，對臨床幫助很大，為臨床醫生采取準確、果斷治療措施提供依據，降低胎兒和孕產婦死亡率意義非常大。

[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版,南京:東南大學出版社,2006:184-185.

[2]戴旻笙,傅慶詔,陳菊芳,等.血紅蛋白F及紅細胞直徑測定及意義[J].中華婦產科雜志,2000,35(4):234-235.

[3]沈柏均主編.人類臍血:基礎與臨床[M].天津:天津科學出版社,1995:16.

[4]段如麟,陳解民,徐增祥.婦產科急癥學[M].第1版,北京:人民軍醫出版社,1998:45.

[5]程 偉.人胎兒血紅蛋白的檢測及其臨床意義[J].中國實驗診斷學,2009,13(10):1474-1475.