液基細(xì)胞學(xué)離心沉淀涂片法與傳統(tǒng)巴氏直接涂片法應(yīng)用于宮頸疾病篩查的比較

陳建華，鄒華英

子宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，又是一種可以通過防癌篩查得以早發(fā)現(xiàn)、早治療、甚至徹底治愈的疾病。宮頸癌前病變(CIN)發(fā)展為宮頸癌有一個(gè)較長的過程(5～8年)[1]，因此早期篩查、防患于未然是防治宮頸癌的關(guān)鍵[2]，傳統(tǒng)的宮頸癌篩查采用巴氏涂片技術(shù)，存在涂片質(zhì)量滿意度低、宮頸病變檢出率較低的缺點(diǎn)，而液基細(xì)胞學(xué)(TCT)技術(shù)[3]能有效克服這些缺點(diǎn)。本院采用的液基細(xì)胞離心沉淀制片法具有不需制片機(jī)、費(fèi)用低、操作簡單、陽性檢出率高的優(yōu)點(diǎn)，在實(shí)際工作中取得了很好的效果，具有很好的推廣價(jià)值，適宜于各級(jí)醫(yī)院、社區(qū)婦科進(jìn)行防癌普查。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 2008年4月至2010年4月我院婦產(chǎn)科送檢的1224例標(biāo)本，每例標(biāo)本一式兩份，一份直接涂片，一份加入液基細(xì)胞學(xué)固定液中，用作離心沉淀涂片。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材 離心沉淀法采用武漢天之瑞科技有限公司液基耗材、普通低速離心機(jī)、顯微鏡。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 傳統(tǒng)巴氏涂片法 用竹板輕輕刮取宮頸表面的分泌物和細(xì)胞，將刮出物均勻涂抹在玻片上，經(jīng)95%酒精固定15min后，巴氏染色。玻片烘干后，以樹脂封片。

1.3.2 液基細(xì)胞學(xué)離心沉淀法：用宮頸管細(xì)胞刷伸入宮頸外口和宮頸管內(nèi)旋轉(zhuǎn)5～6周，收集宮頸外口和宮頸管內(nèi)的脫落細(xì)胞，將收集的細(xì)胞置于液基保存液中。混勻后，取10ml放入離心管，低速(800r/min)離心10min后，棄上清液，加樣槍吸取沉淀物樣本，涂片，薄片烘干，95%乙醇浸泡固定，洗滌、染色。玻片烘干后，以樹脂封片。

1.4 細(xì)胞學(xué)診斷 細(xì)胞學(xué)診斷采用TBS(The Bethesda System)分類標(biāo)準(zhǔn)[4](2001年版)，分為8組：(1)無上皮內(nèi)病變或惡性病變(NILM)；(2)非典型鱗狀上皮----不明意義 (ASC-US)；(3)非典型鱗狀上皮----不排除高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變 (ASC-H)；(4)低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(L-SIL)，包括HPV感染；(5)高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變(H-SIL)；(6)鱗狀上皮細(xì)胞癌(SCC)；(7)非典型腺細(xì)胞(AGC)；(8)腺細(xì)胞癌(ADC)，包括宮頸腺上皮細(xì)胞癌和子宮內(nèi)膜細(xì)胞癌。

1.5 宮頸組織活檢 當(dāng)細(xì)胞學(xué)檢查回報(bào)結(jié)果為ASC-H以上病變的患者，均在陰道鏡下行多點(diǎn)活檢，進(jìn)行病理組織學(xué)檢查，并計(jì)算兩種制片方法檢測(cè)結(jié)果與病理檢查結(jié)果的符合率。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有顯著性意義。

2 結(jié)果

2.1 1224份標(biāo)本采用兩種制片方法的標(biāo)本滿意度比較，見表1。

表1 巴氏直接涂片法和離心沉淀涂片法的標(biāo)本滿意度比較[例(%)]

2.2 兩種制片方法的宮頸上皮異常陽性率的比較,見表2。

2.3 巴氏直接涂片法和離心沉淀涂片法的宮頸細(xì)胞學(xué)結(jié)果與組織學(xué)結(jié)果對(duì)照情況，見表3：對(duì)于ASC-H或L-SIL，離心沉淀制片法與組織活檢病理結(jié)果的符合率顯著高于巴氏直接涂片法(P＜0.01)。

3 討論

表2 巴氏直接涂片法和離心沉淀涂片法宮頸上皮異常情況比較 [例(%)]

統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，同樣采用液基細(xì)胞學(xué)TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)，離心沉淀制片法在標(biāo)本滿意度、宮頸上皮異常陽性率及與組織活檢病理診斷結(jié)果的總相符程度方面均明顯優(yōu)于巴氏直接涂片法 (P＜0.05或P＜0.01)，表明自1954年應(yīng)用至今的巴氏染色涂片法存在假陰性過高、異常情況漏檢嚴(yán)重等缺點(diǎn)，其產(chǎn)生的原因經(jīng)分析，主要有下列幾點(diǎn)：(1)標(biāo)本收集和固定不及時(shí)，不規(guī)范，造成鏡下細(xì)胞形態(tài)模糊，胞漿與核結(jié)構(gòu)不清，難以判斷準(zhǔn)確。在一些醫(yī)院，往往是由非實(shí)驗(yàn)專業(yè)的婦科醫(yī)生直接涂片和進(jìn)行固定，存在不規(guī)范操作。而液基細(xì)胞技術(shù)用特制的取樣器取樣后，將標(biāo)本立即洗入細(xì)胞保存液中，這樣保證了細(xì)胞的及時(shí)固定，同時(shí)保留了取樣器上幾乎所有細(xì)胞。(2)取樣器上的病變細(xì)胞沒有被轉(zhuǎn)移到載玻片上，有研究表明巴氏直接涂片有80%以上的細(xì)胞隨樣器丟棄[5]。盡管臨床醫(yī)生取的標(biāo)本常常較多，但涂在載玻上的往往是很少的一部分。這樣大部分的標(biāo)本被丟棄，有時(shí)有價(jià)值的病變標(biāo)本就是這樣被漏掉了，而離心沉淀法則通過離心混勻方式把有價(jià)值的病變細(xì)胞均勻地混入了所得細(xì)胞標(biāo)本中，這樣涂片時(shí)較易檢查到病變細(xì)胞。(3)巴氏直接涂片富含大量影響觀察的血液、黏液和纖維雜質(zhì)等無診斷意義成分，造成涂片時(shí)細(xì)胞重疊，分布厚薄不一，常造成異常細(xì)胞被覆蓋，從而漏診。而液基保存液中則含有去除黏液和紅細(xì)胞的試劑成分，大大減少這些干擾因素。

表3 兩種制片法宮頸細(xì)胞學(xué)結(jié)果與組織活檢結(jié)果符合率比較 [例]

綜上所述，液基細(xì)胞學(xué)離心沉淀制片法由于固定效果好保持了細(xì)胞結(jié)構(gòu)，離心混勻減少了涂片時(shí)標(biāo)本細(xì)胞抽樣誤差，去除了多種干擾因素使得涂片均勻，容易觀察，從而提高了異常情況的陽性檢出率。因此，在宮頸細(xì)胞病變篩查時(shí)，離心沉淀涂片法要比傳統(tǒng)巴氏直接涂片法優(yōu)越得多，值得大力推廣。

[1]郎景和.子宮頸上皮內(nèi)瘤變的診斷與治療[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2001,36(5):261-263.

[2]馬博文.子宮頸細(xì)胞病理學(xué)診斷圖譜[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:6-7.

[3]Anonymous.The 1988 Bethesda System for reporting cervical/vaginal cytologic diagnoses.National Cancer Institute Workshop[J].JAMA,1989,262(7):931-934.

[4]黃受方,張長淮,余小蒙.子宮頸細(xì)胞學(xué)Bethesda報(bào)告系統(tǒng)[M].北京:診斷病理學(xué)雜志社,2004:24-25.

[5]梅 平,劉艷輝,莊恒國,等.1747例宮頸陰道病變篩查結(jié)果分析[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2005,21(1):70-72.