液基細胞學離心沉淀涂片法與傳統巴氏直接涂片法應用于宮頸疾病篩查的比較

陳建華，鄒華英

子宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，又是一種可以通過防癌篩查得以早發現、早治療、甚至徹底治愈的疾病。宮頸癌前病變(CIN)發展為宮頸癌有一個較長的過程(5～8年)[1]，因此早期篩查、防患于未然是防治宮頸癌的關鍵[2]，傳統的宮頸癌篩查采用巴氏涂片技術，存在涂片質量滿意度低、宮頸病變檢出率較低的缺點，而液基細胞學(TCT)技術[3]能有效克服這些缺點。本院采用的液基細胞離心沉淀制片法具有不需制片機、費用低、操作簡單、陽性檢出率高的優點，在實際工作中取得了很好的效果，具有很好的推廣價值，適宜于各級醫院、社區婦科進行防癌普查。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2008年4月至2010年4月我院婦產科送檢的1224例標本，每例標本一式兩份，一份直接涂片，一份加入液基細胞學固定液中，用作離心沉淀涂片。

1.2 實驗器材 離心沉淀法采用武漢天之瑞科技有限公司液基耗材、普通低速離心機、顯微鏡。

1.3 實驗方法

1.3.1 傳統巴氏涂片法 用竹板輕輕刮取宮頸表面的分泌物和細胞，將刮出物均勻涂抹在玻片上，經95%酒精固定15min后，巴氏染色。玻片烘干后，以樹脂封片。

1.3.2 液基細胞學離心沉淀法：用宮頸管細胞刷伸入宮頸外口和宮頸管內旋轉5～6周，收集宮頸外口和宮頸管內的脫落細胞，將收集的細胞置于液基保存液中。混勻后，取10ml放入離心管，低速(800r/min)離心10min后，棄上清液，加樣槍吸取沉淀物樣本，涂片，薄片烘干，95%乙醇浸泡固定，洗滌、染色。玻片烘干后，以樹脂封片。

1.4 細胞學診斷 細胞學診斷采用TBS(The Bethesda System)分類標準[4](2001年版)，分為8組：(1)無上皮內病變或惡性病變(NILM)；(2)非典型鱗狀上皮----不明意義 (ASC-US)；(3)非典型鱗狀上皮----不排除高級別鱗狀上皮內病變 (ASC-H)；(4)低級別鱗狀上皮內病變(L-SIL)，包括HPV感染；(5)高級別鱗狀上皮內病變(H-SIL)；(6)鱗狀上皮細胞癌(SCC)；(7)非典型腺細胞(AGC)；(8)腺細胞癌(ADC)，包括宮頸腺上皮細胞癌和子宮內膜細胞癌。

1.5 宮頸組織活檢 當細胞學檢查回報結果為ASC-H以上病變的患者，均在陰道鏡下行多點活檢，進行病理組織學檢查，并計算兩種制片方法檢測結果與病理檢查結果的符合率。

1.6 統計學方法 計數資料，率的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05表示差異有顯著性意義。

2 結果

2.1 1224份標本采用兩種制片方法的標本滿意度比較，見表1。

表1 巴氏直接涂片法和離心沉淀涂片法的標本滿意度比較[例(%)]

2.2 兩種制片方法的宮頸上皮異常陽性率的比較,見表2。

2.3 巴氏直接涂片法和離心沉淀涂片法的宮頸細胞學結果與組織學結果對照情況，見表3：對于ASC-H或L-SIL，離心沉淀制片法與組織活檢病理結果的符合率顯著高于巴氏直接涂片法(P＜0.01)。

3 討論

表2 巴氏直接涂片法和離心沉淀涂片法宮頸上皮異常情況比較 [例(%)]

統計結果顯示，同樣采用液基細胞學TBS診斷標準，離心沉淀制片法在標本滿意度、宮頸上皮異常陽性率及與組織活檢病理診斷結果的總相符程度方面均明顯優于巴氏直接涂片法 (P＜0.05或P＜0.01)，表明自1954年應用至今的巴氏染色涂片法存在假陰性過高、異常情況漏檢嚴重等缺點，其產生的原因經分析，主要有下列幾點：(1)標本收集和固定不及時，不規范，造成鏡下細胞形態模糊，胞漿與核結構不清，難以判斷準確。在一些醫院，往往是由非實驗專業的婦科醫生直接涂片和進行固定，存在不規范操作。而液基細胞技術用特制的取樣器取樣后，將標本立即洗入細胞保存液中，這樣保證了細胞的及時固定，同時保留了取樣器上幾乎所有細胞。(2)取樣器上的病變細胞沒有被轉移到載玻片上，有研究表明巴氏直接涂片有80%以上的細胞隨樣器丟棄[5]。盡管臨床醫生取的標本常常較多，但涂在載玻上的往往是很少的一部分。這樣大部分的標本被丟棄，有時有價值的病變標本就是這樣被漏掉了，而離心沉淀法則通過離心混勻方式把有價值的病變細胞均勻地混入了所得細胞標本中，這樣涂片時較易檢查到病變細胞。(3)巴氏直接涂片富含大量影響觀察的血液、黏液和纖維雜質等無診斷意義成分，造成涂片時細胞重疊，分布厚薄不一，常造成異常細胞被覆蓋，從而漏診。而液基保存液中則含有去除黏液和紅細胞的試劑成分，大大減少這些干擾因素。

表3 兩種制片法宮頸細胞學結果與組織活檢結果符合率比較 [例]

綜上所述，液基細胞學離心沉淀制片法由于固定效果好保持了細胞結構，離心混勻減少了涂片時標本細胞抽樣誤差，去除了多種干擾因素使得涂片均勻，容易觀察，從而提高了異常情況的陽性檢出率。因此，在宮頸細胞病變篩查時，離心沉淀涂片法要比傳統巴氏直接涂片法優越得多，值得大力推廣。

[1]郎景和.子宮頸上皮內瘤變的診斷與治療[J].中華婦產科雜志,2001,36(5):261-263.

[2]馬博文.子宮頸細胞病理學診斷圖譜[M].北京:人民衛生出版社,2008:6-7.

[3]Anonymous.The 1988 Bethesda System for reporting cervical/vaginal cytologic diagnoses.National Cancer Institute Workshop[J].JAMA,1989,262(7):931-934.

[4]黃受方,張長淮,余小蒙.子宮頸細胞學Bethesda報告系統[M].北京:診斷病理學雜志社,2004:24-25.

[5]梅 平,劉艷輝,莊恒國,等.1747例宮頸陰道病變篩查結果分析[J].臨床與實驗病理學雜志,2005,21(1):70-72.