兩種測定血清肌酐方法偏倚的比較

陳雪梅，王亞平，王 芳

(江陰市疾病預防控制中心，江蘇 江陰 214431)

肌酐是一種低分子量的含氮化合物，是肌酸代謝的終末產物。血中肌酐濃度主要與腎小球濾過率相關，因而血清肌酐測定是臨床常規腎功能之一[1]。常規實驗室血清肌酐的檢測方法主要是堿性苦味酸法和酶法[2]。為了解我單位常規標本用酶法和Jaffe＇s速率法檢測肌酐的結果是否一致，本文依據美國國家臨床實驗室標準化委員會(CLSI)批準的《用患者樣本進行方法學對比及偏差評估EP9-A2指南文件》，對兩種方法檢測結果進行了對比分析及預期偏倚評估，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 日立 7020(日本)全自動生化分析儀與貝克曼DXC600(美國)全自動生化分析儀。

1.2 試劑 酶法：試劑日本協和批號：R004APA、R004APB，校準品 CFAS 批號：150885-07，質控品貝克曼批號： M807742、M807743。 Jaffe＇s速率法：試劑貝克曼批號：M811566，貝克曼多項定標液批號：M907396，貝克曼質控品批號：M807742、M807743。

1.3 測定及分析方法 (1)酶法X采用協和試劑在日立7020儀器上測定；Jaffe＇s速率法Y采用貝克曼試劑在貝克曼DXC600儀器上測定。(2)每天隨機抽取8份臨床患者樣本，分別用兩種方法按順序1→8進行測定，再按相反順序8→1重復測定，共測定5天。(3)記錄測定結果(Xij和Yij),計算每個樣本測定結果的均值(Xi和Yi)、樣本重復測定值間差值的絕對值(Dxi和Dyi)及兩種方法測定結果均值間的差值(Yi-Xi)。 (4)以 Yi對 Xi作散點圖。(5)以(Yi-Xi)對 Xi作偏差圖。(6)目測離群點。計算：計算樣本重復測定值間差值(Dxi和Dyi)的平均數。計算兩種方法測定結果均值間差值(Yi-Xi)的平均數。判斷超出平均數4倍時，檢驗結果視為無效。

2 結果

2.1 部分病人樣本檢驗結果見表1，Yi對Xi均值散點圖見圖1，偏差圖見圖2。

表1 病人樣本檢驗結果

表2 預期偏差的計算

2.2 所有樣本重復測定值間的差值均未超過兩種方法測定結果均值間差值的平均數，所有結果均有效。

圖1 Yi-Xi均值散點圖

圖2 (Yi-Xi)-Xi偏倚圖

2.3 計算兩種方法測定病人血清樣本肌酐濃度結果的線性回歸方程為：Y=0.9987X+15.953，相關系數為 r2為 0.9979。

3 討論

肌酐是肌酸代謝的最終產物,它是由磷酸肌酸通過脫磷酸基，并閉合成環而形成的內脫水物。肌酐是肌肉組織代謝產生的物質，它僅僅由腎小球排泄，不被腎小管重吸收，所以血清肌酐濃度是評價腎小球濾過功能的重要指標[2]。

肌酐的測定方法主要有化學法和酶法。大多數化學法是根據Jaffe堿性苦味酸法建立起來的，是測定肌酐的經典方法，但受許多假肌酐物質干擾，結果不夠準確[3]。肌酐酶法受基質效應影響小，測定結果穩定，重復性好，酶法的線性范圍寬，是比較理想的方法，而苦味酸法在肌酐濃度高于一定范圍的時候就難以準確測定了。有文獻報道，酶法測定肌酐的線性濃度可高達8840μmmol/L，而堿性苦味酸法的線性上限僅為2210μmmol/L[1]。

我們依據NCCLS EP9-A文件，對本實驗室采用的兩種不同方法測定臨床標本中肌酐含量的結果進行了方法學比較和偏倚評估。以酶法為對比方法，對Jaffe＇s速率法進行了評估，其回歸線性方程為：Y=0.9987X+15.953，二者具有良好的正相關(相關系數為r2為0.9979)；相對預期偏倚隨著肌酐的濃度增大而減小，當肌酐濃度為 40.00μmmol/L、100.00μmmol/L、600.00μmmol/L 時，Jaffe＇s速率法的偏倚分別為39.75% 、15.82%、2.53%，這與文獻[4]報道的相一致，單點定標基于全自動分析的肌酐Jaffe苦味酸動力學雙試劑測定結果與真值有偏差，當SCr<100μmmol/L，結果假性偏高5～10%，高于200μmmol/L時則偏低10～15%。鑒于以上的結果，由于肌酐檢測有不同的方法，不同的檢測方法測定同一份標本時，方法學之間存在變異，測定的結果并不一致[5]。因此，應該對不同的方法建立不同的參考范圍，對兩種不同的方法進行比對校正，給臨床提供準確性一致的報告。

[1]張東玲.肌酐測定的方法學進展[J].國際檢驗醫學雜志,2006,27(6):521-523.

[2]張建平,王治國.肌酐檢測的準確性問題研究[J].國際檢驗醫學雜志,2008,29(6):501-503.

[3]武 強,王龍武,申春梅.肌氨酸氧化酶法測定健康成人血清肌酐參考值的建立[J].檢驗醫學,2009,24(1):69-70.

[4]徐國賓,李志艷.應重視實驗室檢查在慢性腎病早期診斷中的應用[J].中華檢驗醫學雜志,2006,29(11):961-965.

[5]張建平,王治國.肌酐檢測的準確性問題研究[J].國際檢驗醫學雜志,2008,29(6):501-503.