多巴胺D1受體基因多態性與精神分裂癥相關性研究

鄧華 陳鈺 崔愛

多巴胺系統在精神分裂癥的病因，發病機制研究中一直受到關注。研究表明，D1受體mRNA在紋狀體，伏隔核和嗅結節分布很豐富，該受體主要位于額葉前皮層，人們發現它對精神分裂癥患者出現幻覺等思維混亂可能有影響。目前人類已成功克隆DRD1基因，DRD1基因定位于5q35.1，全長約1.7kb，無內含子［1］。我們采用中國漢族精神分裂癥患者與正常組對照研究，來探討DRD1基因多態性與精神分裂癥的關系。

1 對象與方法

1.1 對象 ①精神分裂癥組(簡稱患者組):共75例，均符合中國精神疾病分類與診斷標準第4版精神分裂癥的診斷標準;排除內分泌疾病、酒/藥物濫用或依賴者、嚴重軀體疾病、近期內接受輸血治療者。75例均為漢族，男32例，女43例;年齡15～65歲，平均(20 ±30)歲;病程1.5～10年;②正常對照組(簡稱對照組):共70名，均來自本醫院工作人員，本人無精神疾病、無中樞神經系統、內分泌代謝、其他嚴重軀體疾病及酒/藥物濫用史。70名均為漢族，男30名，女40名;年齡20～45歲，平均(22 ±15)歲。

1.2 研究方法 ①DNA提取:抽取外周靜脈血5 ml，肝素抗凝，常規酚-氯仿抽提法提取基因組DNA;②DRD1基因片段擴增與多態性檢測:采用聚合酶鏈反應(PCR)擴增DRD1基因片段。引物序列參照參考文獻［2］;引物:采用5ˊ-TGA TTG TCA CCT ACA CCA GGA TCT-3ˊ，5ˊ-CTT AAA AGA ACT TTC CGG TTG AGA-3ˊ。PCR反應體系:總體積50 μl，內含模板 2.0 μl，引物各 1.5 μl，dNTP 5.0 μl，TaqDNA 聚合酶 0.4 μl(10U/μl)，Tris-HCl 緩沖液 10 mmol/L，KCL 50 mmol/L，Mg2+1.0 mmol/L。PCR反應條件:95°預變性5 min后 95°60s，55°80s，72°80s，經 30 個循環最終 72°，延伸 7 min。取擴增產物10 μl，2%瓊脂糖凝膠電泳，經BIO-RAD Gel Doc 1000凝膠分析儀檢測。

1.3 數據統計分析 應用科學統計包(SPSS 10.0版本);Hard-Weinberg檢驗基因型分布是否平衡［3］;χ2檢驗比較患者組與對照組及對照組不同性別間的等位基因分布頻數。P＜0.05，具有統計學意義。

2 結果

2.1 患者組與對照組DRD1基因多態性比較見表1。

表1 患者組與對照組基因多態性頻數分布(例)

2.2 患者組與對照組不同性別DRD1基因多態性與精神分裂癥關聯分析見表2。男性患者與對照組間等位基因頻數分布無顯著差異，但女性患者與對照組，男性患者之間的等位基因頻數分布有顯著差異。

表2 患者組與對照組不同性別基因多態性頻數分布(例)

3 討論

精神分裂癥是公認的影響人類健康的多基因復雜疾病，遺傳因素與常見精神分裂癥關系密切，但具體病因與發病機制至今未明。研究發現，精神分裂癥患者較正常人多巴胺D1受體少43%，說明D1受體減少可能與精神分裂癥形成有關。其中多巴胺假說解釋精神分裂癥發病機制是近些年研究的熱點之一，認為腦內多巴胺量的增加及受體活性的提高是引起精神分裂癥的主要原因。

多巴胺受體位于額葉前皮層，其功能與結構異常可導致多種精神疾病。一般認為精神分裂癥陰性癥狀可能與中腦邊緣與皮質DA系統中D1受體活動過盛有關。一些研究發現陰性癥狀的精神分裂癥額葉局部腦血流rCBF明顯降低，正電子發射掃描PET發現糖、氧利用低下，甚至有額葉萎縮［2］。本研究未能出現以上結果。

本研究顯示，中國漢族精神分裂癥患者與正常對照組等位基因頻數分布無顯著性差異(P＞0.05)，未發現DRD1基因多態性與精神分裂癥有明顯關聯，但性別不同可能影響疾病易感性，女性138bp等位基因頻數分布相對男性患者較高。可能種群不同性別不同對疾病影響不同;疾病的多樣性或樣本量受限都會影響疾病的表達與發生發展，故還需進一步研究探討。

［1］ Sunahara RK，Niznik HB，Weiner DM，et al.Human dopamine D1 receptor encoded by an intronless gene on chromosome 5.Nature，1990，347(6288):80-83.

［2］ Andreasen NC.Brain imaging:Appllcations in psychiatry.Science，1988，239:1381-1388.