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小麥胚芽油膠囊抗氧化作用

2010-09-13 03:59:18宋玉卿王世讓魏貞偉王俊國于殿宇
食品科學 2010年15期
關鍵詞:小鼠劑量

宋玉卿,王世讓,魏貞偉,王俊國,于殿宇,*,

(1.吉林工商學院,吉林 長春 130062;2.東北農業大學食品學院,黑龍江 哈爾濱 150030)

小麥胚芽油膠囊抗氧化作用

宋玉卿1,王世讓2,魏貞偉1,王俊國1,于殿宇2,*,

(1.吉林工商學院,吉林 長春 130062;2.東北農業大學食品學院,黑龍江 哈爾濱 150030)

將昆明種健康雄性小鼠隨機分為低、中、高劑量組和空白對照組,用生物酶法制取的小麥胚芽油膠囊連續灌胃30d后測定小鼠肝勻漿丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的酶比活力。結果,小麥胚芽油膠囊具有增強SOD和GSH-Px活性和降低MDA的作用。結論:用生物酶法制取的小麥胚芽油膠囊具備抗氧化功能。

小麥胚芽油膠囊;生物酶法;丙二醛;超氧化物歧化酶;谷胱甘肽過氧化物酶

Abstract :Kunming healthy male mice were randomly divided into four groups, which were designated as low dose group,medium dose group, high dose group and blank control group to investigate the antioxidant effect of wheat germ oil capsules.MDA content, SOD and GSH-Px activities in liver homogenate were determined after administration of microencapsulated enzymetically extracted wheat germ oil for 30 consecutive days. The results indicated mice administered wheat germ oil capsules had a significant lower MDA content in liver homogenate and higher SOD and GSH-Px activities in comparison with those in the blank control group. Based on these investigations, wheat germ oil capsules are concluded to have in vivo antioxidant functions.

Key words:wheat germ oil capsules;enzymatic method;MDA;SOD;GSH-Px

小麥胚芽是小麥初期發育的生物體,是小麥的生命之源。它富含蛋白質、脂肪、維生素、微量元素和一些高分子活性物質,集中了小麥的精華,因此被譽為“人類天然營養寶庫”[1]。小麥胚芽油是VE含量最高的一種植物油,其VE含量為133~820mg/100g油,高出其他植物油。但小麥胚芽含油量比較低,在低于100℃的條件下用冷榨機無法壓榨出油,高溫條件下使小麥胚芽油中的功能活性成分部分氧化,通過在最佳條件下用生物酶法酶解小麥胚芽,在低于100℃的條件下用改造后的冷榨機壓榨出小麥胚芽油,小麥胚芽油中的活性成分沒有經過高溫氧化過程,其存在的狀態與小麥胚芽中存在的狀態基本相同。

小麥胚芽油中抗氧化性主要是VE起著重要的作用,自從1920年美國加利福尼亞大學發現VE[2]以來,人們就對其抗氧化性很關注,并在實踐中對其抗氧化能力有了清晰的認識。小麥胚芽天然VE生理活性效能約是合成VE的30倍,為一種極其寶貴的營養素。VE能與不飽和脂肪酸競爭脂質過氧化基,有效阻斷自由基連鎖反應,終止脂質過氧化過程[3]。

自由基是一種具有高度活性的粒子,它是人體正常的代謝產物,正常情況下人體內有清除自由基的酶系統(SOD、GSH-Px、CAT)和非酶系統(VC、VE、尿酸、血漿銅藍蛋白),使其處于不斷產生與消除的動態平衡中。人體內產生少量的自由基不會對人體構成威脅,但數量過多時就會氧化生物分子(蛋白質、脂類和核酸)。研究發現多種疾病與生物大分子的氧化有關,包括動脈硬化、缺血性心臟病、糖尿病、癌癥、高血壓、肺部疾病及血液病等[4-5]。因此,尋找一種安全有效的清除體內多余自由基的保健食品非常必要。本實驗探討小麥胚芽油膠囊的抗氧化作用,旨在為小麥胚芽油軟膠囊的開發應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

小麥胚芽 北大荒豐緣麥業。

1.2 受試動物

昆明種健康雄性小鼠 黑龍江省漢方生物養殖所。

1.3 試劑與儀器

SOD、MDA和GSH-Px試劑盒 南京建成生物有限公司。

TP-2000動物天平 長沙高新開發區湘儀天平儀器設備有限公司;JA12002電子天平 上海正慧工貿有限公司;LG16-W型臺式高速離心機 北京京立離心機有限公司;751-GW可見光分光光度計 上海光譜儀器有限公司;MEK-6J18K光電全自動生化分析儀 日本光電工業株式會社。

1.4 方法

1.4.1 小麥胚芽油膠囊的制備過程

先將小麥胚芽進行前處理,后用復合蛋白酶進行酶解,然后通過真空干燥器干燥,用改造后的冷榨機進行冷榨,得到的油經精濾后制成膠囊。小麥胚芽油軟膠囊500mg/粒,其中VE含量為268.7mg/100g。

1.4.2 動物實驗

按衛生部保健食品功能檢測與評價技術規范[6],小鼠適應環境3d后,將小鼠隨機分為4組,即低劑量組(0.5g/(kg bw·d ))、中劑量組(1.0g/(kg bw·d ))、高劑量組(1.5g/(kg bw·d )),每組12只,灌胃小麥胚芽油軟膠囊內淺黃色油狀內容物;空白對照組,灌胃蒸餾水。飼喂普通飼料,自由進食飲水。連續給予受試物30d,灌胃量為0.5mL/kg bw。實驗結束時取肝臟。肝組織稱質量后加入適量冷生理鹽水,在冰浴中玻璃勻漿器制備10g/100mL的勻漿。

1.5 酶比活力測定

按試劑盒說明書操作測定肝勻漿MDA含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的酶比活力。

1.6 統計方法

實驗結果采用SPSS13.0統計軟件進行方差分析,雙側檢驗,檢驗水準α=0.05。

2 結果與分析

2. 1 小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿中MDA含量的影響

機體通過酶系統與非酶系統產生氧自由基,后者能攻擊生物膜中的不飽和脂肪酸(PUFA),引發脂質過氧化反應,并因此形成過氧化物。臨床發現,體內脂質過氧化物增多,抗氧化酶活性降低是衰老的主要生理變化[7]。丙二醛(MDA)是細胞膜脂質過氧化的最終產物之一,測其含量可間接估計脂質過氧化程度,間接反映出細胞損傷的程度[8]。

表1 小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿中MDA含量的影響Table 1 Effect of wheat germ oil capsules on MDA content in liver homogenate of mice

由表1可知,灌胃小麥胚芽油膠囊的各劑量組小鼠肝勻漿中MDA含量明顯低于空白對照組(P<0.05),表明該樣品具有較強的降低脂質過氧化作用,同時發現,灌胃1.0g/(kg bw·d )時,MDA降低了1.59nmol/mL,隨著劑量的加大,MDA不再降低,這說明該劑量是最佳服用劑量。

2.2 小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿中SOD酶比活力的影響

SOD是一種重要的體內抗氧化酶,對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用。通過測定體內SOD酶比活力,可反映出機體衰老程度。

表2 小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿中SOD酶比活力的影響Table 2 Effect of wheat germ oil capsules on SOD activity in liver homogenate of mice

由表2可知,低劑量組與空白對照組間無顯著性差異,表明灌胃低劑量小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿SOD酶比活力無顯著作用,中劑量組和高劑量組小鼠肝勻漿SOD酶比活力明顯高于空白對照組(P<0.05),表明小麥胚芽油膠囊具有升高小鼠肝勻漿SOD酶比活力作用。在中劑量時,SOD酶比活力最高,這進一步說明小麥胚芽油膠囊的最佳服用量為1.0g/(kg bw·d )。

2.3 小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿中GSH-Px酶比活力的影響

GSH-Px是體內廣泛存在的一種含硒清除自由基和抑制自由基反應的系統酶,對防止體內自由基引起膜脂質過氧化特別重要,其酶活力以催化GSH氧化的反應速度,及單位時間內GSH減少的量來表示。實驗測得GSHPx酶比活力結果見表3。

表3 小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿中GSH-Px酶比活力的影響Table 3 Effect of wheat germ oil capsules on GSP-Px activity in liver homogenate of mice

由表3可知,低劑量組和中劑量組與空白對照組間無顯著性差異,表明灌胃低劑量和中劑量小麥胚芽油膠囊對小鼠肝勻漿中的GSH-Px酶比活力無顯著作用,只有高劑量組小鼠肝勻漿中的GSH-Px酶比活力明顯高于空白對照組,有顯著性差異(P<0.05)。表明小麥胚芽油膠囊具有升高小鼠肝勻漿中GSH-Px酶活力的作用。

3 討 論

小麥胚芽油具有抗氧化、抗衰老、調節人體血壓、降低血液中的低密度脂蛋白及總膽固醇濃度、預防動脈硬化、冠心病和高血壓等心腦血管疾病有明顯生物學功效[9]。

VE的酚環能形成共振,而使酚基上的氫易被釋放出來,釋放出的氫提供給自由基而使之成為穩定的分子結構,VE本身則變成了較穩定的自由基——脫氫VE,其在VC的幫助下又還原成VE,從而發揮強大的抗氧化作用。由于VE具有清除自由基的能力,可中斷高速運轉的自由基連鎖反應,抑制多不飽和脂肪酸過氧化脂的形成,可減輕細胞膜結構的損傷和老化,維護細胞功能的正常運行。

小麥胚芽油富含VE,本研究中實驗動物攝入生物酶法制取的小麥胚芽油膠囊后,低、中、高劑量組可明顯減少小鼠肝勻漿中MDA含量;中、高劑量組可明顯升高小鼠肝勻漿SOD活性;高劑量組可明顯升高小鼠肝勻漿中GSH-Px活性,這些說明小鼠體內抗氧化功能有加強的趨勢,因而可以認為生物酶法制取的小麥胚芽油膠囊具有抗氧化功能。

[1] 鄭建仙. 功能性食品[M]. 北京: 中國輕工業出版社, 1995: 396.

[2] 吳素萍. 特種食用油的功能特性與開發[M]. 北京: 中國輕工業出版社, 2008: 74.

[3] 湯化鋼, 夏文水. VE功能及其微膠囊化[J]. 糧食與油脂, 2005(3):7-9.

[4] 王建英, 任引哲, 王迎新. 氧自由基與人體健康[J]. 化學世界, 2006(1): 61-63.

[5] 劉芝蘭. 自由基與衰老及延緩衰老藥物干預[J]. 臨床身心疾病雜志,2005, 11(2): 192-193.

[6] 保健食品檢驗與評價技術規范[S]. 2003.

[7] 劉睿, 龔晨睿, 何興旺. 大豆磷脂和VE抗氧化、調節血脂功能的研究[J]. 中國油脂, 2006, 31(10): 53-56.

[8] 趙克然, 楊毅軍, 曹道俊. 氧自由基與臨床[M]. 北京: 中國醫藥科技出版社, 1995: 134-135.

[9] 桑乃華. 小麥胚芽的營養價值及開發應用[J]. 糧食與油脂, 1992(1):1-7.

Antioxidant Effect of Wheat Germ Oil Capsules in Mice

SONG Yu-qing1,WANG Shi-rang2,WEI Zhen-wei1,WANG Jun-guo1,YU Dian-yu2,*
(1. Jilin College of Industry and Business, Changchun 130062, China;2. School of Food Science, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China)

O547

A

1002-6630(2010)15-0257-03

2009-12-07

吉林省教育廳“十一五”科學技術研究項目(吉教科合字[2008]第09號)

宋玉卿(1964—),女,副教授,研究方向為油脂工程。E-mail:syq196412@sina.com

*通信作者:于殿宇(1964—),男,教授,碩士,研究方向為大豆油脂加工技術。E-mail:dyyu2000@yahoo.com.cn

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