中藥退黃外洗液的質量標準研究

林冬杰 廣西梧州食品藥品檢驗所生測室（543002）

中藥退黃外洗液的質量標準研究

林冬杰 廣西梧州食品藥品檢驗所生測室（543002）

目的 建立中藥退黃外洗液的質量標準。方法 用薄層色譜法鑒定薄荷腦；采用高效液相色譜法對枳殼中的柚皮苷進行含量測定，色譜柱：Agilent SB-C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，流動相：以乙腈-水，流速1.0ml/L檢測波長：λ=283nm，柱溫：30℃。結果 柚皮苷在47.6～1190ng范圍內線性關系良好（r=0.9999）,平均回收率為99.25%，RSD=0.54%(n=6)。陰性對照無干擾。結論 該法操作簡便，結果準確可靠，可作為中藥退黃外洗液的質量控制方法。

中藥退黃外洗液；HPLC；柚皮苷；中藥化學；中成藥研究

中藥退黃外洗液是由梔子、茵陳、大黃、柴胡、枳殼等16種中藥組成。具有行氣解郁，利膽退黃功效，主要用于預防和治療新生兒黃疸，黃疸性肝炎等疾病。該藥用于臨床療效較好。為控制該藥品的質量，本文采用TLC方法鑒別中藥退黃外洗液中薄荷腦，HPLC方法檢測中藥退黃外洗液中柚皮苷的含量。

1 儀器與試藥

安捷倫AgilentLC-1200高效液相色譜儀 ,ChemStation色譜工作站，可變波長檢測器，日本AND GR-202電子分析天平。中藥退黃外洗液由南寧市第一人民醫院制劑室提供；薄荷腦（批號：110728-200506，供含量測定用），柚皮苷（批號：110722-200309，供含量測定用）對照品購于中國藥品生物制品檢定所；乙腈為色譜純；水為純化水；其他化學試劑均為分析純。

2 薄層鑒別

取本品10ml，置具塞錐形瓶中，加乙醚10ml，振搖數分鐘，靜置分層，分取乙醚層，濃縮至2.5ml，作為供試品溶液。另取薄荷腦對照品，加乙醚制成每1ml含2mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷-醋酸乙酯(17:3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。按同法實驗，其缺薄荷腦的陰性對照無干擾。（見圖1）

圖1 中藥退黃外洗液薄層色譜圖

2.1 色譜條件與系統適用性試驗 色譜柱 Agilent SB-C18柱(250 mm×4.6 mm，5μm)；流動相乙腈-水（20∶80）；流速1.0ml/min；波長283nm。柱溫：30℃，進樣量10μl，理論板數按柚皮苷峰計算，應不低于3000。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取柚皮苷11.90mg，置50 ml量瓶中加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，作為對照品儲備液（濃度：柚皮苷238μg/ml）,精密吸取對照品儲備液1ml置10 ml量瓶中加甲醇稀釋至刻度，作為對照品溶液（濃度：柚皮苷23.8μg/ml）。

2.3 供試品溶液的制備 用內容量移液管精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，加甲醇至刻度,搖勻，用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續濾液，即得。

2.4 陰性對照溶液的制備 取缺枳殼樣品按供試品溶液制備方法制備缺梔子陰性對照樣品，按2.3 項下供試品溶液的制備方法制備缺枳殼陰性對照溶液。

2.5 專屬性試驗 分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液和對照品溶液各10μl 注入液相色譜儀，記錄色譜圖2。由圖2可見，供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，有相同保留時間的色譜峰，陰性對照試驗無干擾。

圖2 HPLC色譜圖A . 對照品 B. 樣品 C. 缺枳殼陰性樣品 1柚皮苷

2.6 精密度試驗 取同一份對照品溶液(柚皮苷濃度為23.8μg/ml)，按2.1項下色譜條件，連續進樣6次，測定峰面積積分值，柚皮苷RSD為0.35%（n=6）。結果表明，儀器精密度良好。

2.7 線性關系考察 分別精密量取對照品儲備液0.5、1、2、3、5ml置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得不同濃度的對照品溶液。按2.1項下的色譜條件分別吸取上述對照品溶液10μl注入色譜儀，測定，以峰面積積分值為縱坐標（Y），對照品進樣量（ng）為橫坐標（X）繪制標準曲線，得柚皮苷的回歸方程為：Y＝26.84X -11.22（r=0.9999）。結果表明：柚皮苷在47.6～1190ng范圍內，進樣量與峰面積積分值呈良好的線性關系。

2.8 穩定性試驗 取同一份樣品溶液，分別在0，2，4，8，12h，按2.1項下色譜條件進樣測定，分別測定峰面積積分值，柚皮苷RSD為1.05%（n =5）。結果表明，柚皮苷在12小時內穩定。

2.9 重復性實驗 精密稱取同一批(批號：091009)樣品 6份，按2.1色譜條件和2.3項下方法試驗，結果柚皮苷平均含量是0.742 mg.mL-1，RSD＝1.05%（n =6）。結果表明，本方法重復性良好。

2.10 加樣回收率實驗 精密量取已測定含量的中藥退黃外洗液(柚皮苷含量為0.742 mg/ml)0.5、1、2ml置25ml量瓶中，平行取樣6份，精密加入柚皮苷濃度為0.364mg/ml的對照品溶液0.5、1、2ml，加甲醇稀釋至刻度，按2.1項下色譜條件及2.3項下的方法制備供試品溶液、測定，計算回收率，結果見表1。柚皮苷的平均回收率為99.25%，RSD=0.54%。結果表明，本方法回收率良好,符合定量分析要求。

2.11 樣品含量測定 按上述含量測定方法，測定了本品3批樣品中的柚皮苷含量，結果見表2。

3 討論

3.1 檢測波長的選擇 參考《中國藥典》2005年版一部枳殼中柚皮苷的檢測，選定283nm作為柚皮苷的檢測波長。

3.2 流動相的選擇 本方法考察了流動相乙腈-0.1%磷酸（20∶80）、乙腈-0.5%磷酸（20∶80）、乙腈-水（15∶85）、乙腈-水（20∶80）洗脫條件下對樣品中柚皮苷與雜峰分離的情況，結果發現采用乙腈-水（20∶80）洗脫時，樣品中的柚皮苷能得到較好的分離，峰形良好，效率高，且流動相配制簡單，故采用乙腈-水（20∶80）進行洗脫。

Quality standard for Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion

Lin Dong-jie Wuzhou institute for food and drug control,Wuzhou 543002,China

Objective To establish quality standard for Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion．Methods Menthol was identified by TLC；Naringin were determined by HPLC． A Agilent SB-C18 Column(250 mm×4.6 mm，5μm) was used．The mobile phase was Acetonitrile一H2O The column temperature was 30℃，The waveleng detection was at 283nm，flow rate was 1.0 ml.min-1.Results The linear range of Naringin was within 47.5～1190ng(r=0.9999)．The average revovery was 99.25%，RSD was 0.54%(n=6).The negative sample had no interference. Conclusion This method is simple，accurate and suitable for its assaying．It can be used for quality control in production of Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion.

Zhongyaotuihuangwaixiye Lotion；HPLC；Naringin

10.3969/j.issn.1672-2779.2010.10.170

1672-2779（2010）-10-0194-02

2010-03-05）

表1 柚皮苷回收率測定結果（n=6）

表2 樣品測定結果（n=3）