關節炎丸對類風濕性關節炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量的影響

葉丙霖，鄭 烈，王想福

（1.甘肅省中醫藥研究院，甘肅 蘭州 730050；2.甘肅省中醫院，甘肅 蘭州 730050）

關節炎丸對類風濕性關節炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量的影響

葉丙霖1，鄭 烈2，王想福2

（1.甘肅省中醫藥研究院，甘肅 蘭州 730050；2.甘肅省中醫院，甘肅 蘭州 730050）

目的 探討關節炎丸對類風濕性關節炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量的影響。方法 建立類風濕性關節炎大鼠模型，用放射免疫法檢測大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α的含量。結果 與空白組比較，模型組各指標含量均增高，差異有統計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，關節炎丸大、小劑量組及雷公藤陽性對照組各指標含量均有不同程度下降，差異有統計學意義（P＜0.05）；與雷公藤陽性對照組比較，關節炎丸大、小劑量組各指標含量下降，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論關節炎丸能控制類風濕性關節炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α等炎性細胞因子的活性，對類風濕性關節炎有很好的治療作用。

關節炎丸；類風濕性關節炎；血清含量

類風濕性關節炎是一種以關節滑膜慢性炎癥病變為主要特征的全身性自身免疫性疾病，其臨床表現為對稱性、慢性、進行性多關節炎并伴有全身多系統受累。屬祖國醫學痹癥之“頑痹”“白虎歷節”“骨痹”“歷節風”等范疇。《內經》云：“粗理而肉不堅者，善病痹”；“風寒濕三氣雜至，合而為痹”，指出痹證的發生與人體正氣虧虛、外感風寒濕邪有關。歷代醫家認為正氣虧虛與肝、脾、腎虧虛有密切的關系。因此，筆者在諸醫家治療的基礎上，結合現代中藥藥理學研究成果及臨床實踐，用關節炎丸來治療類風濕性關節炎獲得良好療效。為進一步探討關節炎丸治療類風濕性關節炎的作用機理，為臨床應用提供實驗依據，我們進行了相關實驗，現報告如下。

1 實驗材料與方法

1.1 實驗動物

成年 SPF 級 Wistar大鼠 50只，雌雄各半，體重（200±20）g。購于甘肅中醫學院動物實驗中心 [實驗動物質量合格證編號：SCXK（H）2004-0006-0000005]，動物飼料由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供。

1.2 實驗藥品與試劑

關節炎丸由制附片、制川烏、細辛、白芍、桂枝、黃芪、甘草等藥物組成。為棕褐色顆粒，由甘肅中醫學院附屬醫院制劑室提供。雷公藤多甙片（湖南協力藥業有限公司生產，批號：Z43020138）。弗氏完全佐劑由美國Sigma公司生產。IL-1、IL-6試劑盒由北京華英生物技術研究所提供。TNF-α試劑盒由北京科美東雅生物技術有限公司提供。

1.3 大鼠模型的建立

除正常組大鼠外，其余組大鼠用75%酒精對其右后跖進行消毒后，將弗氏完全佐劑（0.1毫升/只）注射于足跖皮下。

1.4 實驗分組及給藥

將實驗動物隨機分為5組，每組10只，雌雄各半。即空白組、模型組、雷公藤陽性對照組、關節炎丸小劑量組、關節炎丸大劑量組。

根據人和動物間體表面積的換算方法，取關節炎丸濃煎液，按生藥量計算為7.2g/ml，每天關節炎丸大劑量組每只給予3ml，關節炎丸小劑量組每只給予1.5ml，空白組和模型組每只給予等量生理鹽水，雷公藤陽性對照組每只給予6.3mg/kg。給藥至實驗結束。

1.5 實驗觀察指標

根據試劑盒說明用放射免疫法檢測大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量。

2 結果（見表1）

表1 各組大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α 含量比較（±s）

表1 各組大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α 含量比較（±s）

注：與空白組比較，※P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05；與雷公藤陽性對照組比較，aP＜0.05

組別 n空白組模型組雷公藤陽性對照組關節炎丸小劑量組關節炎丸大劑量組IL-1（ng/ml） IL-6（pg/ml） TNF-α（ng/ml）10101010 100.031±0.0110.074±0.014※0.039±0.013△0.038±0.012△a0.035±0.011△a50.230±9.62369.297±9.149※59.218±11.077△51.706±5.859△a51.282±5.066△a0.706±0.1421.056±0.191※0.786±0.131△0.767±0.166△a0.720±0.128△a

與空白組比較，模型組各指標含量均增高，差異有統計學意義（P＜0.01）。與模型組比較，關節炎丸大劑量組、小劑量組（P＜0.05）及雷公藤陽性對照組各指標含量均有不同程度下降，差異有統計學意義（P＜0.05）。與雷公藤對照組比較，關節炎丸大劑量組、小劑量組各指標含量下降，差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

細胞因子在類風濕性關節炎中發揮著重要作用。目前認為IL-1、IL-6是參與進展期關節破壞的典型炎性細胞因子，而TNF-α在炎癥反應過程中具有關鍵作用。本研究通過雷公藤陽性對照組及關節炎丸大、小劑量組對類風濕性關節炎大鼠治療前后的細胞因子進行比較，發現模型組大鼠血清炎性細胞因子IL-1、IL-6和TNF-α含量明顯高于空白組（P＜0.01），用關節炎丸治療后血清炎性細胞因子水平低于模型組，說明中藥關節炎丸大、小劑量均具有降低大鼠血清炎性細胞因子的作用，與雷公藤陽性對照組比較有統計學意義（P＜0.05）。由此說明關節炎丸對類風濕性關節炎的治療作用可能是通過降低炎性細胞因子，從而消除滑膜細胞炎癥而實現的。俞小芬等[1]研究表明，關節炎丸可通過抑制細胞因子的釋放，從而改善關節紅腫、疼痛癥狀。

現代藥理學研究證實，制附片具有促進吞噬細胞的吞噬功能和抗炎作用，附子抗炎作用與興奮腎上腺皮質功能有關。鹿角霜有直接抗炎鎮痛的作用，與興奮腎上腺皮質功能有關[2]。防風有解熱、鎮痛、抗炎作用，并對大鼠類風濕性關節炎有一定的抑制作用。桂枝具有解熱、鎮靜、鎮痛、抗過敏、抗炎作用。黨參對損傷具有一定的保護作用。血管內皮生長因子及IL-6、成纖維細胞生長因子和TNF-α等炎性細胞因子均被證明能刺激和參與血管新生過程，而川芎能夠改善微循環，使血流速度加快，流態改善，毛細血管內或小靜脈內血栓溶解，毛細血管網開放數增加[3]。黃芪皂甙能抑制血小板聚集而發揮抗血栓形成、延長動脈血栓形成時間的作用[4]。該方諸藥合用聯合治療類風濕性關節炎，其抗炎鎮痛、調節血管內皮細胞和改善微循環等作用，對修復類風濕性關節炎患者已被侵襲和破壞的關節軟骨和骨質，改善關節功能，阻止骨質破壞有非常重要的意義，從而達到緩解癥狀、防止病情進展的目的。

[1]俞小芬，薛盟舉，鄭烈.關節炎丸對大鼠類風濕性關節炎治療作用的實驗研究[J].世界中醫藥，2008，3（2）：113.

[2]沈映君，王濤，陳春，等.麻黃、桂枝藥發汗解熱作用的實驗研究[J].中藥藥理與臨床，1985，10：21.

[3]張義洪.RΑ發病機制及其治療方法研究進展[J].細胞與分子免疫學雜志，2005，21：88.

[4]高建，徐先祥，徐先俊，等.黃芪總皂甙抗血栓形成作用實驗研究[J].中成藥，2002，10（3）：160.

R285.5

B

1671-1246（2010）13-0084-02