米諾環素對臨床幾種常見假絲酵母菌體外藥敏的初步探究

鄧 群,李澤玉,余 旻

(三峽大學人民醫院宜昌市第一人民醫院檢驗科,湖北宜昌 443000)

米諾環素對臨床幾種常見假絲酵母菌體外藥敏的初步探究

鄧 群,李澤玉＊,余 旻

(三峽大學人民醫院宜昌市第一人民醫院檢驗科,湖北宜昌 443000)

探究米諾環素在體外對常見酵母菌的藥敏特點。采用Rosco紙片擴散法對168株常見的幾種假絲酵母菌進行米諾環素的藥敏試驗。米諾環素有抑菌環的比率:白假絲酵母菌41%,光滑假絲酵母菌1.2%,熱帶假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌沒有抑菌環。在常見幾種酵母菌中,米諾環素幾乎只對白假絲酵母菌在體外有抗菌活性。

米諾環素;假絲酵母;抗菌活性

目前住院患者侵襲性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)備受關注,據統計,深部真菌感染的絕大多數由酵母菌引起,占67.29%[1],其中以白假絲酵母菌(Candida albicans)的比例最高,且深部白假絲酵母菌感染的致死率達40%[2-3]。分離出酵母菌最多的部位是呼吸道,占真菌標本的76.39%,其種類以白假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌和熱帶假絲酵母菌為主,分別占72.42%、13.45%和10.07%[4]。目前我院臨床分離的假絲酵母菌構成比為白假絲酵母菌66.27%,光滑假絲酵母菌15.23%,熱帶假絲酵母菌12.17%,克柔假絲酵母菌3.12%,其他酵母菌3.21%。市場上抗真菌的藥物都各具特點,但都有不同程度的不良反應,而且隨著新藥的研發,抗真菌藥的價格不斷攀升。在日常工作中發現米諾環素(Minocycline,別名二甲胺四環素)具有不同于其他抗細菌藥物的特點,就是K-B紙片擴散法在M-H瓊脂上對白假絲酵母菌有抑菌環。本實驗力圖通過體外Rosco紙片擴散法對168株常見的幾種酵母菌進行米諾環素的藥敏試驗,分析其產生抑菌環的構成比。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 自2010年3月至2010年7月臨床分離的168株假絲酵母菌(其中白假絲酵母菌115株、光滑假絲酵母菌27株、熱帶假絲酵母菌19株、克柔假絲酵母菌7株);病人年齡23～90歲,平均年齡(70.16±10.24)歲,分別來自痰、咽拭子、纖支鏡沖洗液、血液、中段尿、分泌物等標本。均用科瑪嘉顯色培養基進行初步鑒定,然后用API20C AUX鑒定到種。

1.1.2 標準菌株 白假絲酵母菌ATCC 90028。

1.1.3 培養基 沙保羅培養基(蛋白胨10 g/L,葡萄糖40 g/L,瓊脂13 g/L,PH 5.6±0.2);科瑪嘉顯色培養基;Shadomy瓊脂培養(廣州迪景)。

1.1.4 藥敏紙片 米諾環素紙片(美國歐賽)。

1.1.5 儀器 電熱恒溫培養箱PBX-272(上海博訊實業有限公司醫療設備廠)。

1.2 方法

1.2.1 培養[5]將臨床各種標本接種于沙保培養基,35℃培養24～72 h,生長出可疑菌落經革蘭染色確定為真菌后,用API20C AUX真菌D板條進行鑒定分型。

1.2.2 菌懸液制備 將沙保瓊脂上的待檢假絲酵母菌轉種于科瑪嘉顯色培養基,35℃24～48 h;Shadomy瓊脂培養基先置35℃干燥20～25 min,挑取直徑＞1 mm的純培養菌落用生理鹽水制成菌懸液,0.5麥氏濁度,備用。

1.2.3 Rosco紙片擴散法 將0.5麥氏單位菌懸液用生理鹽水1∶1稀釋傾倒于Shadomy瓊脂培養基,用L型玻棒涂抹均勻,吸走多余的液體,35℃干燥10 min,貼米諾環素紙片,培養18～24 h后量取抑菌環直徑(抑菌環邊緣少量菌落生長忽略不計)。

2 結 果

2.1 標準菌株

抑菌環直徑平均14～15 mm。

2.2 藥敏實驗

臨床分離株藥敏實驗結果(圖1)。其中,米諾環素對白假絲酵母菌的作用最好,有抑菌環的構成比為41%;米諾環素對光滑假絲酵母菌、熱帶假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌等的作用很差(見表1)。

圖1 米諾環素在白假絲酵母菌平板上的抑菌環Fig.1 Inhibitory ring of minocycline on Candida albicansplate

表1 假絲酵母菌屬臨床分離株對米諾環素藥物紙片的敏感試驗結果Table 1 Sensitivity experiment results of clinically Candidaspp.isolates to minocycline sheet

3 討 論

盡管米諾環素(Minocycline)是抗細菌藥物, CLSI指南上只有抗細菌的解釋標準,Rosco紙片擴散法也沒有抗真菌的解釋標準,但本研究中發現米諾環素對白假絲酵母菌在體外有抗菌活性,而且抑菌環直徑多在11～15 mm,且有抑菌環的構成比為41%;光滑假絲酵母菌僅有2株有抑菌環,直徑在7～10 mm,熱帶假絲酵母菌和克柔假絲酵母菌沒有抑菌環,也不排除非白假絲酵母菌株數少的原因。酵母菌是深部真菌感染的主要病原菌[1],而白假絲酵母菌又是酵母菌感染里的最大構成比[2],因此白假絲酵母菌感染的治療是抗真菌治療的重點。由于白假絲酵母菌對唑類抗真菌藥物耐藥問題的日益凸顯,而兩性霉素B的毒副作用也不容忽視,米諾環素在體外表現出對白假絲酵母菌的抗菌活性給體內藥理學研究打下了良好的基礎。

[1]馮文莉,楊靜,奚志琴,等.侵襲性真菌醫院內感染的流行病學調查[J].中華流行病學雜志,2009,30(10):1043-1046.

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[3]Lockhart S R,Messer S A,Dickema D J,et al.identification of Candida nirariensis and Candada bracarensisin a large global collection of Candida glabrataisolates:comparison to the literature[J].J Chin Microbiol,2009,47(4):1216-1217.

[4]鐘曉艷,陳慧玉,何加寧,等.1182株假絲酵母菌感染特性及耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志,2009,30(8):816-817.

[5]中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程(第3版)[S].南京:東南大學出版社,2006:920-922.

Initial Drug Sensitivity Exploration of Minocycline to Common Candidaspp.in V itro

DENG Qun,LI Ze-yu,YU Min
(First People’s Hosp.of Yichang City;Dept.of Lab.,Three Gorges Uni.People’s Hosp.,Yichang443000)

Drug sensitivity of minocycline was tested to 168 strains of common C and idaspeciesin vitroadopting Rosco disc diffusion method Methods:The results showed that the rate of bacteriostat ring to minocycline:Candida albicans was 41%,and C.glabrata1.2%;while C.tropicalis and C.kruseihad no bacteriostat ring.Therefore minocycline had the antifungal activity only on Candida albicans in vitro.

minocycline;C andidaspp.;antifungal activity

R379.4

B

1005-7021(2010)06-0086-03

宜昌市2009年醫療衛生科技攻關計劃項目(A09301-15)

鄧群 女,副主任技師。主要從事臨床微生物檢驗。E-mail:dq0.1234@163.com

＊通訊作者。E-mail:53666135@qq.com

2010-10-18;

2010-11-15