玄冬顆粒澄清工藝的研究

謝靜 楊宏圖 常翠 張娓

玄冬顆粒澄清工藝的研究

謝靜 楊宏圖 常翠 張娓

目的澄清劑用于玄冬顆粒的澄清工藝。方法比較了澄清劑與乙醇對口服液的主要成分含量的差異。結果澄清劑用于中藥提取液的澄清在主要成分含量較乙醇有所提高。結論在中藥提取液的澄清工藝中可用澄清劑替代乙醇。

澄清劑;工藝;含量測定

玄冬顆粒由金銀花、玄參、麥冬、天冬、甘草等中藥組成，是在臨床應用多年的醫院制劑。玄冬顆粒具有清熱養陰，解毒散結的功效。臨床主要用于慢性咽喉炎及咽喉干痛等癥。通常工藝采用水提醇沉工藝制備。本實驗分別用ZTC1+1天然澄清劑、乙醇對其水提液作澄清處理，以處方中主藥金銀花所含成分綠原酸為指標，進行含量比較，并以正交設計法優選ZTC1+1天然澄清劑的最佳澄清工藝。

1 藥品、試劑和儀器

中藥材購自深圳市藥材公司;綠原酸對照品購于中國藥品生物制品檢定所;ZTC1+1天然澄清劑購于天津正天成澄清技術有限公司;所用試劑均為AR。

儀器:LC-10A高效液相色譜儀(日本島津)，SPD-10AV紫外-可見光分光光度檢測器(日本島津)，色譜柱:Sperisorb C185 μm 4.6 mm×250 mm(大連化物所)，Kromasil C18柱(F4.6×200 mm，5 mm)。

2 綠原酸的含量測定方法［1］

2.1 色譜條件 色譜柱為WondasiC18柱(150 mm×4.6 mm，5μm)，流動相:甲醇-水-冰醋酸(20:80:1);流速為1.0 ml/ min;柱溫:25℃;紫外檢測波長:327 nm;進樣量:20 μl。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液 精密稱取綠原酸對照品9.25 mg置于100 ml棕色容量瓶中，加50%甲醇溶解至刻度，制成1 ml含92.5 μg的綠原酸貯備液，搖勻，精密量取上述溶液2～5 ml量瓶中用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液(2℃～8℃保存)。

2.2.2 供試品溶液 精密量取玄參藥液供試品2～25 ml容量瓶中，加50%甲醇定容至刻度，搖勻，用0.45 μm微孔濾膜濾過，取續濾液，即得。

2.2.3 陰性對照溶液 按照玄參藥液的制備工藝制備不含金銀花的樣品，按2.2.2項下的方法制成陰性對照溶液。

2.3 線性關系的考察 精密量取綠原酸對照品儲備液1.0、2.0、4.0、8.0、16 ml分別至25 ml容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，再分別精密吸取該對照品溶液各20 μl，按2.1色譜條件進樣，測定綠原酸峰面積。以綠原酸進樣量(X)為橫坐標，以峰面積(Y)為縱坐標繪制標準曲線，其回歸方程為Y= 3045283X-15789，r=0.9993，線性范圍:0.074～1.184 μg。

2.4 精密度考察 取供試品溶液，重復進樣6次，測定峰面積積分值的RSD為0.4%(n=6)，表明精密度良好。

2.5 回收率實驗 采用加樣回收法取樣品6份，精密加入綠原酸對照品溶液適量，測定峰面積積分值的RSD為0.8%(n =6)，表明重現性良好。

2.6 穩定性試驗 對同一供試品溶液分別在0、2.5、5、8、11、15、16 h進樣測定，其峰面積積分值的RSD為0.4%。從結果可以看出，供試品溶液在室溫下放置16 h內穩定。

2.7 空白試驗 以缺金銀花藥材的空白樣品按同樣條件提取及測定，結果在與綠原酸相同位置無色譜峰出現。表明陰性對照試驗對本品的測定無干擾。

2.8 樣品含量測定 分別吸取樣品，按以“2.2.2”方法制備，分別吸取供試品溶液及對照品溶液各20 μl注入液相色譜儀中，測定峰面積，按外標法計算含量。

3 不同澄清液澄清工藝的比較

取處方水提液10 ml(相當含金銀花2 g)各3份，按下述方法分別處理:1號工藝:40%乙醇沉淀，過濾，濾液水浴揮干;2號工藝:加熱至60℃，按ZTC1+1天然澄清劑溶液5B: 3A的比例先加入組分B攪拌使其均勻分散再加入組分A沉淀，過濾，濾液水浴揮干;3號工藝:未經任何澄清處理，直接水浴揮干。分別測定綠原酸含量，結果為1號為471.23 μg/ ml、2號為528.36 μg/ml、3號為563.25 μg/ml。

4 均勻設計優選ZTC1+1天然澄清劑最佳澄清工藝

4.1 均勻設計因素和結果 根據ZTC1+1天然澄清劑本身的特點以及實際應用的情況，確定影響澄清效果的相關因素: ZTC1+1天然澄清劑加入量(A)、藥液濃度(B)、藥液的pH值(C)、綠原酸含量(Y)，使用均勻設計表U7(76)，因素和結果見表1。4

表1 均勻試驗因素和結果

.2 結果分析 在計算機上用均勻設計程序軟件處理試驗數據，引入或剔除自變量的F臨界值設定為0.1，可得如下逐步回歸方程:Y=316.34+59.50A+115.26B+23.82C-15.8A2-32.57B2(r=0.915，F=54.72，n=7)查表，得F1-0.01 (2，6)=10.9，F＞F1-0.01(2，6)，故回歸方程具有顯著意義，置信度達99%以上。

通過對ZTC1+1天然澄清劑加入量(A)、藥液濃度(B)、藥液的pH值(C)3個因素方差分析，表明天然澄清劑加入量(A)、藥液濃度(B)有顯著性差異(P＜0.05)、藥液的pH值(C)無顯著性差異(P＞0.1)。計算機處理所得各因素最優化值為A=1.83，B=1.5。綜合上述分析并結合實際經驗，確定澄清工藝的最佳條件為:加入1.83 g ZTC1+1天然澄清劑量、藥液濃度為1.5 g/ml、藥液的pH值為5.0。

按優化條件安排試驗，所得質量評價結果在理論預報范圍內，說明回歸方程是可信的，預測的結果是準確的。

5 討論

5.1 ZTC1+1天然澄清劑是一種新型食品添加劑，它具有安全無毒、不殘留、不引入異味等優點［2］。由A、B兩種組分組成，兩組分依次加入，先與藥液中的可溶性大分子形成復合物，進而形成絮狀物沉淀下來，以達到去除雜質的目的。

5.2 用ZTC1+1天然澄清劑除雜質較乙醇法能夠提高有效成分的含量，從而提高了產品的內在質量，使綠原酸含量提高了15%左右。

5.3 天然澄清劑的使用，可縮短生產周期，降低生產成本，提高產品質量，值得推廣。

［1］彭波．高效液相色譜法測定抗破傷風合劑中綠原酸的含量．中國醫院藥學雜志，2008，28(22):1970-1971．

［2］趙軍，沈季元，李獻林，等．芍丹乙肝口服液澄清工藝的研究．中國現代應用藥學，2004，21(5):411-413．

Study on Clearing Process in Jixueteng Penyan Keli

XIE Jing，YANG Hong-tu，CHANG Cui，et al．Depart- ment of Pharmacy，the Second Clinical Medicin College of Jinan University，and the People’s Hospital of Shenzhen City．Shenzhen 518020，China

ObjectiveTo use clarification agent in clearing process of Xuan Dong Keli．Methods To compare clarification agent with alcohol by measuring quantitative analyses of paeoniflorin．ResultsIt was shown that main components quantity of koufuye using calrification agent were higher than that alcohol did．Conclusion Clarification agent can be used to clear herbal extract instead of alcohol．

Clarificatin agent;Preparation technology;Content determination

518020 暨南大學第二臨床醫學院/深圳市人民醫院藥學部