尿素維E珍珠乳膏的制備及質(zhì)量控制

汪 剛，張 松，劉效筠（湖北黃石市第一醫(yī)院藥劑科，黃石市 435001）

尿素維E珍珠乳膏的制備及質(zhì)量控制

汪 剛＊，張 松，劉效筠（湖北黃石市第一醫(yī)院藥劑科，黃石市 435001）

目的：制備尿素維E珍珠乳膏并建立其質(zhì)量控制方法。方法：以尿素、維生素E、珍珠粉等為組方，用水包油基質(zhì)制備尿素維E珍珠乳膏；分別采用高效液相色譜法和紫外分光光度法測定制劑中維生素E和尿素的含量。結(jié)果：所制制劑為白色乳膏，各項(xiàng)檢查均符合《中國藥典》相關(guān)規(guī)定；維生素E、尿素檢測濃度的線性范圍分別為40.0～200.0、125.0～500.0μg·mL－1（r＝0.9999、0.9998），平均回收率分別為99.9%（RSD＝1.0%，n＝9）、100.4%（RSD＝1.4%，n＝9）。結(jié)論：本制劑制備工藝簡單，質(zhì)量控制方法均較靈敏、準(zhǔn)確、重復(fù)性好、專屬性強(qiáng)，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

尿素維E珍珠乳膏；制備；質(zhì)量控制；尿素；維生素E；高效液相色譜法；紫外分光光度法

尿素維E珍珠乳膏（鄂藥制字H20081867）系黃石市第一醫(yī)院自行研制的復(fù)方制劑，該制劑由尿素、維生素E、珍珠粉、甘油等主藥組成，主要用于皮膚角化癥及皮膚干燥瘙癢癥的治療及祛斑美容、防曬祛痘。該制劑制備工藝簡單，質(zhì)量穩(wěn)定，經(jīng)醫(yī)院多年臨床驗(yàn)證顯示，療效顯著。為有效控制制劑質(zhì)量，本文參照相關(guān)文獻(xiàn)[1～4]，用化學(xué)及高效液相色譜（HPLC）法對其中的尿素、維生素E（VE）進(jìn)行定性鑒別；并采用紫外分光光度法及高效液相色譜法對制劑中尿素及VE分別進(jìn)行含量測定。現(xiàn)將其制備及質(zhì)量控制方法報道如下。

1 儀器與試藥

紫外分光光度計（美國Waters公司）；HPLC儀（美國Agilent公司）。

尿素維E珍珠乳膏（黃石市第一醫(yī)院制劑室，批號：20090101、20090208、20090316，含量：尿素5g·100g－1，VE 2g·100g－1）；尿素標(biāo)準(zhǔn)品（批號：0963-200803，純度：99.99%）、VE標(biāo)準(zhǔn)品（批號：0978-200805，純度：99.99%）均由中國藥品生物制品檢定所提供；VE原料藥（天津天藥藥業(yè)股份有限公司，批號：091016，純度：98.95%）；尿素原料藥（湖南省芙蓉制藥廠，批號：091127，純度：99.63%）；甘油、珍珠粉、依地酸二鈉、氮酮均為藥用標(biāo)準(zhǔn)，甲醇、乙醚為色譜純，硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、三乙醇胺、氫氧化鈉均為分析純，水為注射用水。

2 處方與制備

2.1 處方

尿素50g，VE 20g，甘油20mL，珍珠粉2g，氮酮10mL，依地酸二鈉0.1g，冷霜加至1000g。

2.2 制備

2.2.1 冷霜的制備。取硬脂酸（120g）、單硬脂酸甘油酯（35g）、液體石蠟（50g）、凡士林（10g）、羊毛脂（50g），加入油相加溫反應(yīng)釜中，加熱到80℃熔融保溫備用；另取三乙醇胺（4g）、注射用水（730mL），加入水相加溫反應(yīng)罐中加熱到80℃溶解保溫；再將80℃油相基質(zhì)緩慢加入到80℃的水相中，邊加邊朝同一方向攪拌至乳化成型即得冷霜。

2.2.2 尿素維E珍珠乳膏的制備。取尿素，珍珠粉研細(xì)過篩后，用甘油研勻，加入適量冷霜中攪勻，依次加入VE、氮酮、依地酸二鈉，邊加邊攪拌，將冷霜加至1000g，攪勻，即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為白色乳膏。

3.2 鑒別[1]

3.2.1 尿素。取本品1g，加氫氧化鈉試液1mL，加熱，即有氨臭能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)。

3.2.2 VE。在“樣品含量測定”項(xiàng)下的色譜中，供試品溶液應(yīng)呈現(xiàn)與VE標(biāo)準(zhǔn)品保留時間相同的色譜峰。

3.3 檢查

3.3.1 裝量。本品標(biāo)示裝量為30g，經(jīng)檢測供試品結(jié)果符合規(guī)定。

3.3.2 微生物限度。按《中國藥典》2005年版微生物限度檢查法檢測符合規(guī)定[3]。

3.3.3 其他。應(yīng)符合《中國藥典》2005年版二部附錄ⅠF乳膏劑項(xiàng)下的各有關(guān)規(guī)定[3]。

3.4 含量測定

3.4.1 VE。

（1）溶液制備。①供試品溶液：精密稱取供試品1g，置于燒杯中，加聚山梨醇酯2g，充分?jǐn)嚢?0min，加水30mL攪拌使溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，加水分次洗滌燒杯，洗液并入量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，過濾即得供試品溶液。②標(biāo)準(zhǔn)品溶液：精密稱取VE標(biāo)準(zhǔn)品約20mg，置于燒杯中，加入聚山梨醇酯0.2g，充分?jǐn)嚢?min，其余操作同“供試品溶液的制備”項(xiàng)下方法即得。

（2）色譜條件。色譜柱：Kromasil C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇；流速：1.0mL·min－1；柱溫：30℃；檢測波長：284nm，理論板數(shù)按VE峰計算應(yīng)不低于2000。

（3）檢測波長選擇。取標(biāo)準(zhǔn)品溶液在200～400nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果VE在285nm波長處有最大吸收，故選擇其為測定波長。

（4）專屬性試驗(yàn)。取供試品溶液與標(biāo)準(zhǔn)品溶液、不含VE的空白溶液（取除VE外，其余組方及制備方法與樣品相同的空白乳膏，同“供試品溶液”項(xiàng)下方法制備空白溶液），分別進(jìn)樣，結(jié)果供試品溶液呈現(xiàn)與VE標(biāo)準(zhǔn)品溶液保留時間相同的色譜峰，而空白溶液未見該色譜峰，說明空白樣品不干擾供試品的測定，色譜詳見圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.標(biāo)準(zhǔn)品；B.供試品；C.空白樣品；1.VEFig 1 HPLC chromatogramsA.reference substance；B.test sample；C.blank sample；1.vitamin E

（5）線性范圍。精密稱取VE約40mg，按標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備方法制備成濃度為40.0、80.0、120.0、160.0、200.0μg·mL－1系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液。分別進(jìn)樣10μL，測定峰面積，以濃度（C）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得線性方程：A＝228C－2441.8（r＝0.9999，n＝5）。結(jié)果VE檢測濃度的線性范圍為40.0～200.0μg·mL－1。

（6）穩(wěn)定性試驗(yàn)。取供試品溶液分別于0、1、2、4、8h分別測定其峰面積，結(jié)果RSD＝0.66%，結(jié)果表明待測溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

（7）回收率試驗(yàn)。取空白樣品9份，分別精密加入VE標(biāo)準(zhǔn)品溶液適量（約相當(dāng)于制劑中VE含量的80%、100%、120%），依法測定VE含量，計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果Tab 1 Results of recovery test

（8）精密度試驗(yàn)。取同一批號樣品5份，制備成供試品溶液5份，分別進(jìn)樣10μL，依法測定其含量，結(jié)果，RSD＝1.2%，表明本方法精密度良好。

（9）樣品含量測定。取供試品3批，每批2份，制備成供試品溶液，精密吸取10μL，進(jìn)樣測定。按外標(biāo)法定量，用線性方程求得樣品含量，結(jié)果見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果Tab 2 Content determination of samples

3.4.2 尿素。

（1）溶液的制備。①標(biāo)準(zhǔn)品溶液：精密稱取尿素標(biāo)準(zhǔn)品0.25g，加10%氯化鈉溶液制成濃度為250μg·mL－1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。②供試品溶液：精密稱取樣品0.5g，置于燒杯中，加10%氯化鈉溶液20mL，置于水浴上加熱，充分?jǐn)嚢枋鼓蛩厝芙猓糜诒≈欣鋮s，濾過，將濾液用100mL容量瓶收集，沉淀物用10%氯化鈉溶液同法處理4次（20、20、15、15mL），濾過后的濾液均并入量瓶中，用10%氯化鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，即得。

（2）檢測波長選擇。取標(biāo)準(zhǔn)品溶液4mL，置于具塞試管中，精密加對二甲氨基苯甲醛溶液（對二甲氨基苯甲醛2g→94mL乙醇及6mL鹽酸）4mL，在暗處放置20min，顯色后在400～450nm波長范圍內(nèi)掃描，結(jié)果尿素呈現(xiàn)一寬幅吸收，最大吸收波長約為430nm，故選擇其為測定波長。

（3）專屬性試驗(yàn)。取本項(xiàng)下標(biāo)準(zhǔn)品溶液與供試品溶液及不含尿素的空白溶液（取除尿素外，其余組方及制備方法與樣品相同的空白乳膏，以“供試品溶液”項(xiàng)下的方法制備空白溶液），分別按“檢測波長選擇”項(xiàng)同法處理后進(jìn)行紫外掃描。結(jié)果供試品溶液與標(biāo)準(zhǔn)品溶液在430nm波長處呈現(xiàn)有相同的吸收峰，而空白溶液呈一直線，在430nm波長處未見有吸收，說明空白樣品不干擾供試品的測定。紫外吸收光譜詳見圖2。

圖2 紫外吸收光譜A.標(biāo)準(zhǔn)品；B.供試品；C.空白樣品；1.尿素Fig 2 UV absorption spectrumA.reference substance；B.test sample；C.blank sample；1.urea

（4）線性范圍。精密稱取尿素標(biāo)準(zhǔn)品0.25g，置于100mL容量瓶中，加10%氯化鈉溶液，并稀釋至刻度，精密量取0.5、1、1.5、2、2.5mL置于10mL容量瓶中，加10%氯化鈉溶液至刻度，搖勻，制成系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液。各精密量取5mL，分別置于具塞試管中，精密加對二甲氨基苯甲醛溶液（對二甲氨基苯甲醛2g→94mL乙醇及6mL鹽酸）4mL，在暗處放置20min，并以10%氯化鈉溶液4mL，同法處理作空白，照分光光度法在430nm波長處測定吸光度。以濃度（C）為橫坐標(biāo)、吸光度（A）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得線性方程：A＝0.0042C－0.004（r＝0.9998，n＝5）。結(jié)果尿素檢測濃度的線性范圍為125.0～500.0μg·mL－1。

（5）穩(wěn)定性試驗(yàn)。取供試品溶液分別于0、1、2、4、8h分別測定其吸光度，結(jié)果RSD＝0.75%。結(jié)果表明待測溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

（6）回收率試驗(yàn)。取空白樣品9份，分別精密加入尿素適量（約相當(dāng)于制劑中尿素含量的80%、100%、120%），依法測定尿素含量，計算回收率，結(jié)果見表1。

（7）精密度試驗(yàn)。取同一批號樣品5份，同法測定其含量，結(jié)果RSD＝1.8%，表明本方法精密度良好。

（8）樣品含量測定。取樣品3批制備成供試品溶液，依法測定含量，結(jié)果見表2。

4 討論

本制劑是在尿素維生素E乳膏的基礎(chǔ)上加珍珠粉等組分研制而成的水包油型乳膏制劑，方中珍珠粉具有美白祛斑、控油祛痘、消炎解毒、防曬防輻射的作用，從而提高制劑祛斑美容、防曬祛痘的功效。所得制劑質(zhì)量穩(wěn)定，各項(xiàng)檢查均符合《中國藥典》2005年版各有關(guān)規(guī)定，定性鑒別呈正反應(yīng)。

根據(jù)VE的理化性質(zhì)，并參照相關(guān)文獻(xiàn)[2，4]，在制備供試品溶液和標(biāo)準(zhǔn)品溶液時加入表面活性劑聚山梨醇酯對VE起助溶作用，試驗(yàn)結(jié)果顯示助溶效果顯著。同時以甲醇為流動相，采用HPLC法，對標(biāo)準(zhǔn)品的峰形和供試品的分離情況進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，二者在相同保留時間內(nèi)其峰形完好，樣品中VE峰的保留時間為14.538min，而基質(zhì)（雜質(zhì)）峰保留時間為2.865min，二者分離效果良好。此外參照《中國醫(yī)院制劑規(guī)范》中“尿素乳膏”項(xiàng)下方法[1]，以10%氯化鈉溶液為提取溶媒，即確保了尿素的溶解提取，又克服了VE的溶入，從而使二者得到有效分離；同時以對二甲氨基苯甲醛溶液為顯色劑，采用紫外分光光度法對尿素維E珍珠乳膏中的尿素進(jìn)行含量測定研究。結(jié)果顯示，以HPLC法測定樣品中VE含量，以紫外分光光度法測定其中尿素的含量，其方法均較靈敏，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，專屬性強(qiáng)，可用于該制劑的質(zhì)量控制。

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部編.中國醫(yī)院制劑規(guī)范（西藥制劑）[S].第2版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，1995：140.

[2] 樸淑娟，張 純，李樸清，等.用HPLC法測定維生素E乳劑中維生素E的含量[J].藥學(xué)服務(wù)與研究，2006，6（5）：337.

[3] 國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：278～279，附錄ⅪJ、ⅠF.

[4] 宋金春，李韻秋，曾俊芬.HPLC法測定注射用12種復(fù)合維生素中維生素D2、維生素A與維生素E的含量[J].中國藥房，2007，18（31）：2456.

Preparation and Quality Control of Urea Vitamin E Pearl Cream

WANG Gang，ZHANG Song，LIU Xiao-yun（Dept.of Pharmacy，Huangshi Municipal First Hospital of Hubei Province，Huangshi 435001，China）

OBJECTIVE：To prepare urea vitamin E pearl cream，and to establish quality control method of it.METHODS：Urea vitamin E pearl cream was prepared with urea，vitamin E，pearl powder and oil-water matrix，etc.UV spectrophotometry and HPLC were used to determine the content of urea and vitamin E.RESULTS：The prepared preparation was white cream and its quality was in line with the standard stated in Chinese Pharmacopeia（2005edition）.The linear ranges of vitamin E and urea were 40.0～200.0μg·mL－1（r＝0.9999）and 125.0～500.0μg·mL－1（r＝0.9998）.The average recoveries were 99.9%（RSD＝1.0%，n＝9）and 100.4%（RSD＝1.4%，n＝9）.CONCLUSION：The preparation method is simple.The quality control method is accurate and sensitive，specific，and reproducible for the quality control of urea vitamin E pearl cream.

Urea vitamin E pearl cream；Preparation；Quality control；Urea；Vitamin E；HPLC；UV spectrophotometry

R927.11；R986

A

1001-0408（2010）33-3126-03

＊主管藥師。研究方向：醫(yī)院藥學(xué)。電話：0714-3062031。E-mail：wangyuhan621@163.com

2010-05-19

2010-06-09）