不同證型緩解期哮喘兒童的T細(xì)胞亞群狀態(tài)初探

馮金環(huán) 秦 璞 王 霖

山東省青島市海慈醫(yī)療集團(tuán)海慈醫(yī)院（青島 266033）

支氣管哮喘是一種以氣道高反應(yīng)性和氣道慢性炎癥為特征的變態(tài)反應(yīng)性疾病，有多種炎性細(xì)胞參與了炎癥過程，T淋巴細(xì)胞在發(fā)病過程中發(fā)揮了重要作用。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為哮喘的發(fā)生與肺虛、脾虛及腎虛有關(guān)。為此，筆者檢測了不同證型支氣管哮喘兒童緩解期的血清T細(xì)胞亞群。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 對照組38例，男性17例，女性21例；平均年齡7歲；均來于健康查體兒童，無貧血及免疫性疾病等，無應(yīng)用免疫抑制劑或增強(qiáng)劑用藥史。選擇2006年10月－2007年10月海慈醫(yī)院兒童哮喘門診的年齡4～12歲的哮喘兒童，另設(shè)哮喘（緩解期）組54例，男性28例，女性26例；平均年齡6歲5個(gè)月；均符合全國兒科哮喘協(xié)作組制定的哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]中的輕度－中度哮喘，經(jīng)激素吸入療法治療后癥狀、體征消失、峰值呼氣流速≥80%預(yù)計(jì)值并維持4周以上，且無應(yīng)用全身免疫制劑史。參照文獻(xiàn)[2]方法，辨證屬肺虛型15例，男性8例，女性7例，年齡4歲1個(gè)月至12歲；脾虛型17例，男性8例，女性9例，年齡4至12歲；腎虛型21例，男性11例，女性10例，年齡4歲6個(gè)月至11歲8個(gè)月。兩組在年齡、性別及病情程度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法 采用單克隆抗體間接免疫熒光法檢測外周血CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞百分率，試劑購自武漢生物技術(shù)研究所，操作嚴(yán)格按說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

見表1。哮喘組CD4+及CD4+/CD8+明顯低于對照組，CD8+明顯高于對照組（P ＜0.01）；CD3+與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。肺虛型、脾虛型、腎虛型之間CD3+差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。肺虛型與脾虛型CD4+/CD8+均明顯低于對照組及腎虛型（P ＜0.05或0.01），但以肺虛型為甚（P ＜0.01）；兩型之間CD4+、CD8+無差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但與對照組及腎虛型差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。腎虛型CD4+、CD8+與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05），CD4+/CD8+低于對照組（P ＜ 0.05）。

表1 各組T細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較 (%,）

表1 各組T細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較 (%,）

與對照組比較,*P＜0.05，**P＜0.01；與腎虛型比較，△P＜0.05，△△P ＜ 0.01；與脾虛型比較，?P ＜ 0.05，??P ＜ 0.01

組別對照組哮喘組肺虛型脾虛型腎虛型n 38 54 15 17 22 CD3+62.59±4.11 61.21±3.21 61.13±4.31 61.19±3.79 62.10±4.05 CD4+36.12±2.16 33.34±1.94**32.95±1.02**△△33.11±1.43**△△35.96 ± 3.15??CD8+27.11±2.13 30.16±3.10**30.97±1.78**△△29.98±1.47**△△27.96 ±1.24??CD4+/CD8+1.43±0.14 1.02±0.24**1.01 ±0.13**??△△1.24±0.21**△1.35±0.11*?

3 討論

T淋巴細(xì)胞按細(xì)胞表面抗原分為CD4+細(xì)胞和CD8+細(xì)胞等,按免疫功能分為輔助性T細(xì)胞 (Th）、抑制性T細(xì)胞(Ts）和細(xì)胞毒T細(xì)胞(Tc）亞群。CD3+是成熟T細(xì)胞的表面標(biāo)志,CD4+分子表達(dá)在Th細(xì)胞表面,CD8+分子多表達(dá)在Ts和Tc細(xì)胞。Th/Ts在維持正常機(jī)體免疫反應(yīng)過程中發(fā)揮重要作用。T細(xì)胞亞群在哮喘患者如何改變還有爭議。但哮喘患者均存在T細(xì)胞亞群的失衡。研究表明，哮喘兒童發(fā)作期CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值明顯高于正常對照組，哮喘兒童治療后血CD3+、CD4+、CD8+明顯低于正常對照組,而CD4+/CD8+比值則明顯高于正常對照組。本觀察顯示緩解期哮喘兒童CD4+、CD4+/CD8+均顯著低于對照組，CD8+明顯高于對照組，而CD3+無明顯變化，表明T細(xì)胞亞群失衡與哮喘發(fā)病有密切關(guān)系，緩解期哮喘兒童仍存在這種免疫紊亂，從該角度表明哮喘在緩解期繼續(xù)治療的必要性。本觀察結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道不盡相同，原因可能為：（1）T細(xì)胞亞群的測定方法不同，敏感度與準(zhǔn)確度也不同，選取標(biāo)本的差異等導(dǎo)致結(jié)果不盡相同；（2）CD4+T細(xì)胞在活化、增殖和分化過程中受到多種因素的影響；（3）CD8+T細(xì)胞在殺傷靶細(xì)胞后迅速凋亡，發(fā)病時(shí)在外周血中含量不穩(wěn)定[4]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為肺脾腎三臟虧虛與哮喘發(fā)作、纏綿反復(fù)，遷延難愈有密切關(guān)系。《證治準(zhǔn)繩·喘》亦謂“肺虛則少氣而喘”。脾主運(yùn)化，為后天之本，氣血生化之源，若脾運(yùn)失司，則肺氣不足而喘，李東恒《脾胃論》所云“脾胃一虛，則肺氣先絕”，“肺金受病，由脾胃虛，不能生肺”。腎主納氣“肺主呼氣，腎主納氣”，“肺氣之主，腎為氣之根”，腎虛則根本不固，吸入之氣不歸納于腎，則出現(xiàn)動則氣急，呼吸困難的喘證。

本研究顯示，肺虛型CD4+、CD4+/CD8+最低，肺虛型患兒癥見自汗，怕風(fēng)，易感冒，氣短聲低，或喉中常有輕度哮鳴音，咯痰清稀色白，面色白，舌淡苔薄白，脈細(xì)弱等，每因外邪變化而誘發(fā)哮喘，提示肺虛組患兒CD4+、CD4+/CD8+降低最著與肺虛相關(guān)，肺虛型哮喘在常規(guī)治療的同時(shí)，應(yīng)著重增強(qiáng)患兒的細(xì)胞免疫功能，以加強(qiáng)其抗感染的能力，防止哮喘的發(fā)作。脾虛型CD4+/CD8+低于腎虛型，但高于肺虛型，脾虛型患兒可出現(xiàn)食少脘痞，大便不實(shí)，食油膩后易腹瀉，倦怠，氣短，語言無力，舌質(zhì)淡，苔薄膩或白滑，脈細(xì)軟等脾胃虧虛之證，常由飲食不當(dāng)（實(shí)際可能包括部分食物過敏的癥狀）誘發(fā)哮喘，提示脾虛組患兒CD4+/CD8+降低與脾胃失調(diào)相關(guān)。腎虛型組T細(xì)胞亞群紊亂較其他兩型均輕，腎虛型哮喘證見短氣息促，動則為甚，吸氣不利，腰膝酸軟，勞累后喘哮易發(fā)，小便清長，尿頻，注意力不集中，精力不足，煩躁易怒，下肢不溫，皮膚毛發(fā)不澤等證；腎氣虛證往往見于久病之后，雖傷及腎氣，但病勢反較肺、脾氣虛證有所緩和，與兩證差異較大，恰與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符合。因小兒為純陽之體，生機(jī)旺盛，雖久病之后，先天之本受損，故臨床癥狀多與典型腎虛癥狀有所不同，而病勢反見緩和，考慮與中醫(yī)“衛(wèi)出下焦”的理論相吻合。《靈樞·營衛(wèi)生會》云“營出于中焦，衛(wèi)出于下焦”。衛(wèi)氣的源泉在足少陰腎，其根于腎命陽氣而出下焦。衛(wèi)氣是腎陽經(jīng)過氣化通過太陽經(jīng)而行于體表的，可見“衛(wèi)陽主外”，“衛(wèi)出下焦”正反映了衛(wèi)氣本質(zhì)以及衛(wèi)氣與臟腑之間的聯(lián)系。

本研究只是對哮喘兒童緩解期免疫進(jìn)行了初步研究，小兒哮喘免疫失衡與證型間的聯(lián)系尚需進(jìn)行大樣本、多層次的前瞻性深入研究。

[1]中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會呼吸學(xué)組，中華兒科雜志編輯委員會.兒童支氣管哮喘防治常規(guī) (試行）[J].中華兒科雜志，2004，42(2）：100 ～ 107.

[2]楊運(yùn)高.小兒病證妙諦 [M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2008：95.

[3]楊運(yùn)剛，陳茂榮.T淋巴細(xì)胞在兒童支氣管哮喘發(fā)生中的作用[J]. 實(shí)用兒科臨床雜志，2003，18(8）：615 ～616.

[4]Lees Y，Kim SJ，Kwon SS，et al.Distribution and cytokine Production of CD4and CD8T－1ym Phocyte subsets in Patientswith acute asthma attacks[J].Ann Allery Asthma Immunol，2001，86(6）：659.