如何快速檢測(cè)蜂蜜中抗生素殘留

文/翟小敏

抗生素的快速檢驗(yàn)方法研究是世界各國(guó)關(guān)心的問題之一。在我國(guó)鮮乳中抗生素殘留量的快速檢測(cè)方法有多種，其中有：紙片法、TTC法、酶聯(lián)免疫法等。用丹麥漢森Betastar快速檢測(cè)儀來檢測(cè)鮮乳抗生素殘留的方法是近幾年從國(guó)外引進(jìn)的，此方法具有時(shí)間短，操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，有利于嚴(yán)把農(nóng)產(chǎn)品原料乳質(zhì)量安全關(guān)。本文對(duì)用丹麥漢森Betastar快速檢測(cè)儀來檢測(cè)蜂產(chǎn)品中的抗生素殘留快速檢驗(yàn)方法方面進(jìn)行了研究，研究結(jié)果表明，方法是可行的，適用于蜂蜜及其產(chǎn)品中的抗生素快素檢測(cè)。

材 料

1.儀器

丹麥漢森Betastar抗生素快速檢測(cè)儀、高壓滅菌器、電熱恒溫水浴鍋、渦旋混合器、電熱恒溫培養(yǎng)箱或恒溫干燥箱。

2.試劑

丹麥漢森專用試劑盒：青霉素試劑盒、鏈霉素試劑盒、四環(huán)素族類試劑盒。

滅菌無抗脫脂乳：115℃滅菌20min。

磷酸鹽緩沖溶液（PH6.0）：取8g無水磷酸二氫鉀和2g無水磷酸起氫二鉀用1000mL定溶。

青霉素、鏈霉素、四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)品。

試驗(yàn)方法

1.樣品的前處理：稱取蜂蜜0.5～1.0樣品于50ml滅菌小燒杯中，加9mL無抗滅菌脫脂乳用渦旋混合器混勻備用。

2.樣品的測(cè)定：移取以上備用液0.2mL，加入至丹麥漢森Betastar抗生素快速檢測(cè)儀專用試劑瓶中于47.5℃培養(yǎng)3分鐘；取出，將配套試劑條置入試劑瓶中，再于47.5℃培養(yǎng)2分鐘，取出試劑條觀察并記錄；同時(shí)，做陰性和陽性樣品對(duì)照。

3.結(jié)果觀察與判定：

3.1 試劑條上如果沒有出現(xiàn)紅色帶，則該結(jié)果視為無效。

3.2 試劑條上如果第一條色帶比參考色帶紅色要深，則結(jié)果為陰性（未檢出）。

3.3 試劑條上如果第一條色帶接近或淺于參考色帶的紅色，則結(jié)果為陽性（檢出）。

3.4 試劑條上如果第一條色帶無顏色，參考色帶為紅色，則結(jié)果為強(qiáng)陽性（檢出）。

結(jié)果與討論

1.丹麥漢森Betastar鮮乳抗生素快速檢測(cè)儀測(cè)定蜂蜜中抗生素的可行性研究。此方法可行與否，關(guān)鍵因素是解決丹麥漢森專用試劑盒所適應(yīng)的背景介質(zhì)問題，因?yàn)榈湞h森專用試劑盒對(duì)應(yīng)的是乳液為測(cè)定液的基質(zhì)背景，故我們?nèi)绾握_選擇溶劑，來溶解和稀釋待測(cè)樣本是研究的重點(diǎn)。為此，本研究設(shè)定了用無抗滅菌脫脂乳和滅菌水為溶解基質(zhì)的兩條路線，分別用上述方法對(duì)八組樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明：以滅菌脫脂乳做溶劑，溶解蜂蜜樣品，用抗生素快速檢測(cè)儀檢測(cè)樣品中的抗生素是可行的。而用滅菌水溶解樣品，用抗生素快速檢測(cè)儀檢測(cè)蜂蜜中的抗生素的方法不可行。

2.最低檢出限試驗(yàn)。本次實(shí)驗(yàn)方法最低檢出限研究是采取加標(biāo)的方法實(shí)現(xiàn)的。據(jù)丹麥漢森Betastar鮮乳抗生素快速檢測(cè)儀說明書明確規(guī)定，乳制品中的抗生素最低檢出限為2μg/L；用0.02μg青霉素標(biāo)液加入到10g的蜂蜜樣品中混勻，制作成抗生素濃度相當(dāng)于2μg/kg的陽性樣本。通過試驗(yàn)表明，此方法蜂蜜中的青霉素的最低檢出限也能達(dá)到2μg/kg。

3.精密度與回收率實(shí)驗(yàn)研究。取已知含有0.045mg/kg抗生素殘留蜂蜜樣品，分別用丹麥漢森Betastar快速檢測(cè)儀和GB/T5009.116-2003高效液相色譜法連續(xù)測(cè)定7次，測(cè)定結(jié)果用丹麥漢森Betastar法測(cè)得的抗生素有較好的重現(xiàn)性，但取樣量不同會(huì)導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果有偏差。把一定量的抗生素對(duì)照品加入已知抗生素含量的蜂蜜樣品中做回收率實(shí)驗(yàn)，回收率范圍在 98.44%～100.1%。