胃癌組織中P16蛋白和VEGF蛋白的表達及臨床意義

[摘要] 目的 探討抑癌基因P16蛋白和VEGF蛋白在胃癌組織中的表達情況及與胃癌組織發生、發展的關系。方法 用免疫組化MaxVisionTM法對60例胃癌及癌旁組織檢測P16蛋白和VEGF蛋白。結果 P16蛋白的總陽性率為63.33%(38/60，P<0.05)，P16蛋白的陽性表達與胃癌組織的分化程度、癌組織的浸潤程度、淋巴結有無轉移及伴不伴有神經浸潤有關。VEGF的總陽性率為61.67%(37/60，P<0.05)，VEGF的陽性表達與胃癌組織的分化程度及浸潤程度沒有相關性，與淋巴結有無轉移和伴不伴有神經浸潤有關。結論 P16蛋白和VEGF蛋白與胃癌組織的發生、發展、預后關系密切，可作為胃癌患者術后預后、評估檢測的指標。

[關鍵詞] 胃癌; P16和VEGF蛋白; 免疫組織化學

[中圖分類號] R735.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)11-88-03

Expression of P16 and VEGF Proteins in Gastric Cancer and Its Clinical Significance

YANG Hong

Pathological Department，General Hospital ofPingdingshan Coal Group，Pingdingshan 467000，China

[Abstract] ObjectiveTo explore the expression of P16 and VEGF proteins in the gastric cancer tissue and the relationship between their expression and the occurrence and development of gastric cancer. MethodsThe P16 and VEGF expression in 60 cases of gastric cancer and its adjacent tissue was detected by MaxVisionTM immunohistochemical method. ResultsThe positive rate of P16 protein was 68.33(41/60，P<0.05)，and the P16 protein expression was correlated with gastric cancer tissue differentiation，cancer infiltration，lymph node metastasis and nerve infiltration. The positive rate of VEGF was 61.67%(37/60，P<0.05). The VEGF protein expression was not correlated with gastric cancer tissue differentiation and cancer infiltration，but was correlated with lymph node metastasis and nerve infiltration. ConclusionThe expression of P16 and VEGF proteins is closely correlated with the occurrence，development and prognosis of gastric cancer，which can be used to evaluate the biological behavior and prognosis of gastric cancer.

[Key words]Gastric cancer; P16 and VEGF proteins; Immunohistochemistry

胃癌是消化系統常見的惡性腫瘤之一。目前，胃癌仍然嚴重地威脅著人們的健康。近年來越來越多的研究表明，癌基因和抑癌基因在胃癌組織發生、發展的過程中起著至關重要的作用。本文應用免疫組化法對60例胃癌及癌旁組織進行P16蛋白和VEGF蛋白檢測，旨在探討其表達與胃癌組織的發生、發展及臨床病理意義。

1 材料與方法

1.1 材料

收集我院2007年1月～2009年12月60例胃癌根治術標本。其中高分化腺癌6例，中分化腺癌11例，低分化腺癌43例。選擇遠離胃癌組織的正常胃黏膜作為對照觀察。上述標本均經10%的中性福爾馬林固定，石蠟包埋3μm連續切片，分別做HE、P16蛋白、VEGF蛋白染色，DAB顯色，蘇木精復染，光鏡觀察。

1.2 方法

采用免疫組織化學MaxVisionTM法，切片經常規脫蠟水化后，高壓抗原修復。鼠抗P16、鼠VEGF、DAB顯色試劑盒均為即用型，均購自福州邁新生物技術有限開發公司。所有染色均用已知陽性片作對照，PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 免疫組化陽性結果判斷

根據陽性細胞占全部腫瘤細胞的比例將其分為(1)陽性細胞數<10%為陰性;(2)陽性細胞占10%～25%為+;(3)陽性細胞占25%～75%為++;(4)陽性細胞>75%為+++。

1.4 統計學方法

統計學采用四表格χ2檢驗。

2 結果

P16蛋白定位于細胞核和細胞漿，以細胞核為主(圖1);VEGF蛋白定位于細胞漿，呈棕黃色顆粒(圖2)。P16蛋白的總陽性率為63.33%(38/60)，P16蛋白的陽性表達與胃癌組織的分化程度有關，其中高分化(5/6，83.33%)高于中分化(8/11， 72.73%)、低分化(25/43，58.14%)(χ2=0.928，P<0.05)(表1)，淋巴結轉移組(8/21，38.01%)明顯低于淋巴結無轉移組(30/39，76.92%)(χ2=8.86，P<0.05)。伴有神經浸潤組(12/32， 37.50%)低于不伴有神經浸潤組(26/28，92.86%)(χ2=19.71，P<0.05)(表2)。P16的陽性表達與胃癌組織浸潤程度呈負相關，隨著浸潤程度加深P16表達的陽性率逐漸降低。其中癌組織浸潤黏膜下層的陽性率為100%，高于肌層(80%，4/5)、全層(66.67%，18/27)，高于漿膜外脂肪組織(62.50%，15/24)(χ2=7.92，P<0.05)(表3)。VEGF的總陽性率為(61.67%，37/60)，VEGF的陽性表達與胃癌組織的分化程度及浸潤程度沒有相關性，與胃癌組織的淋巴結有無轉移、伴不伴有神經浸潤有關。中分化(9/11，81.82%)高于低分化(26/43，60.47%)，明顯高于高分化(2/6，33.33%)(χ2=5.55，P>0.05)(表1)，淋巴結無轉移組(20/39，51.28%)低于淋巴結轉移組(17/21，80.95%)(χ2=5.08，P<0.05)，伴有神經浸潤組(25/32，78.13%)高于不伴有神經浸潤組(12/28，42.86%)(χ2=7.86，P<0.05)(表2)，與浸潤程度無關，黏膜下層(3/4，75%)高于全層(17/27，62.96%)，高于漿膜外脂肪組織(15/24，62.50%)，基層VEGF的表達陽性率最低達40%(2/5)(χ2=1.32，P>0.05)。

3 討論

P16基因是近年發現的直接參與細胞生長增殖負調控的抑癌基因[1]。P16通過與細胞周期素D1以競爭方式結合CDK4，抑制CDK4活性，使細胞停滯于G0期或G1期，而抑制細胞分裂、增殖[1-4]。P16基因位于人類染色體9P21位置，全長8.5kb，完整的P16記憶由兩個內含子和三個外顯子組成，三個外顯子共同編碼一種已知的細胞周期素依賴性激酶CDK4的抑制蛋白。分子量為15.8KD，簡稱P16。它具有周期依賴性表達模式，能特異性地抑制CDK4的激酶活性，并參與某些組織細胞的分化及增殖的調控[1，6]。本文顯示，P16蛋白的總陽性率為63.33%(38/60)。P16蛋白的陽性表達與胃癌組織的分化程度及浸潤程度、有無淋巴結轉移、伴不伴有神經浸潤有關。本文研究表明，P16的陽性表達率隨著胃癌組織的分化程度的降低、淋巴結的轉移，伴有神經的浸潤及癌組織浸潤程度的加深而逐漸減弱，提示P16基因的缺失在胃癌組織的進展過程中起著重要的作用，同時也表明P16高表達患者預后較好(表1，2，3)。VEGF(血管內皮生長因子)是一分子量為35～46KD同型二聚體的高度糖基化的堿性蛋白，其基因位于6p21.3染色體上，VEGF與腫瘤血管生成密切相關，是促進腫瘤血管生成的眾多因子中最重要的一種，并能誘導宿主細胞毛細血管新生并長入腫瘤，為腫瘤的生長和浸潤提供物質基礎[7，8]。本文VEGF的總陽性率為(61.67%，37/60)。研究結果表明VEGF的陽性表達與胃癌組織的分化程度及浸潤程度沒有相關性(P>0.05)，與胃癌組織的淋巴結有無轉移、伴不伴有神經浸潤有關(P<0.05)。中分化(9/11，81.82%)高于低分化(26/43， 60.47%)，明顯高于高分化(2/6，33.33%)(表1)，淋巴結無轉移組(20/39，51.28%)低于淋巴結轉移組(17/21，80.95%)，伴有神經浸潤組(25/32，78.13%)高于不伴有神經浸潤組(12/28， 42.86%)(表2)。與浸潤程度無關(P>0.05)，黏膜下層(3/4，75%)高于全層(17/27，62.96%)，高于漿膜外脂肪組織(15/24，62.50%)，基層VEGF的表達陽性率最低達40%(2/5)。本文顯示P16蛋白和VEGF的表達與胃癌諸多臨床病理指標相關，與胃癌組織的發生、發展、預后關系密切，可作為胃癌患者術后預后、評估檢測的指標。

[參考文獻]

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(收稿日期:2009-12-25)