ABO血型實驗的室內質控方法探討

[摘要] 目的 探討ABO血型實驗的室內質控方法。方法 用抗-A、抗-B標準血清驗證A、B、O試劑紅細胞，用A、B、O試劑紅細胞驗證抗-A、抗-B標準血清。質控結果正常后，進行獻血者血型鑒定實驗，并觀察實驗凝聚效果。結果 2009年1 ~ 10月，室內質控共發現3次血型試劑異常情況，經更換合格試劑后正常。本站22 051份無償獻血者血液標本的ABO血型檢測結果均正常，未發生錯報血型結果的情況。結論 血型實驗的室內質控，可以進一步提高血型實驗的準確性;血站檢驗科在每天工作開始時，應進行血型實驗的室內質控，以進一步提高輸血安全水平。

[關鍵詞] ABO血型; 室內質控

[中圖分類號] R457.1+1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)11-85-02

血型鑒定是一項具有高度科學性和高度責任性的工作，是獻血者血液檢測的重要項目，鑒定結果正確與否，直接影響輸血安全。《血站實驗室質量管理規范》要求[1]，應建立與檢測項目相適應的室內質量控制程序，衛生部對血站實驗室的督導檢查中，要求對血型實驗進行常規質控，以進一步提高血型實驗的準確性。目前，生化實驗、免疫學實驗的室內質控，有較為成熟的理論和方法，而血型實驗的室內質控如何進行，未發現有具體的規定和方法。為此，筆者結合本單位工作實際，對血型實驗的室內質量控制方法進行了探討，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象

2009年1~10月本站無償獻血者血液標本22 051份。

1.2 試劑

抗-A、抗-B標準血清(長春生物制品研究所博德公司提供);ABO試劑紅細胞(上海血液生物醫藥有限責任公司提供)。以上試劑均經中國藥品生物制品檢定所批檢合格，在有效期內使用。

1.3 主要儀器

STAR全自動樣本處理系統(瑞士Hamilton公司);Xantus全自動血型儀(瑞士Xantus公司);KA-2200細胞洗滌離心機(日本Kubota);HTⅢ掃描酶標儀(奧地利Anthos公司);T.S溫控孵育振蕩器(奧地利Anthos公司);Labofuge400平板離心機(美國Beckman公司);96孔硬質U形微板(丹麥Nunc公司)。

1.4 應用軟件

Xantus全自動血型儀采用Xantus軟件(深圳愛康醫療電子有限公司提供);Auslab實驗室管理軟件(北京AUSBIO公司);現代血站標準管理系統(河北唐山現代軟件有限公司)。

1.5 方法

1.5.1 ABO血型試劑的進貨確認 每批血型試劑進貨后，質控科要進行進貨驗證。檢查項目有:外觀檢查、效價滴定、特異性檢測、親和力測定。均合格后，試劑才能準予使用。

1.5.2 ABO血型實驗的室內質控 檢驗科每日工作前，首先進行血型實驗的室內質控。方法是，用抗-A、抗-B標準血清驗證A、B、O試劑紅細胞，用A、B、O試劑紅細胞驗證抗-A、抗-B標準血清。操作步驟如下:①取潔凈小試管6支，分別標明α+A(抗A+A細胞)、α+B(抗A+B細胞)、α+O(抗A+O細胞)、β+A(抗B+A細胞)、β+B(抗B+B細胞)、β+O(抗B+O細胞);②用移液器按表1分別加注標準血清及試劑紅細胞;③將試管輕輕混勻，置久保田KA2200離心機離心，按鍵NO.設置為2，離心時間15s;④輕輕搖動試管，重懸細胞扣，觀察紅細胞是否凝集或溶血;如果未見凝聚或溶血現象，再以低倍鏡觀察。判讀質控結果是否正確，抗A+A細胞及抗B+B細胞應凝集，其余均不凝集;⑤對血型實驗的室內質控結果按ABO血型實驗室內質控記錄表進行記錄。

1.5.3 無償獻血者血液標本的檢測 血型質控結果正常后，進行獻血者血型鑒定實驗，并觀察實驗凝聚效果。ABO血型正定型應用Xantus全自動血型儀進行檢測，反定型應用全自動微板法進行檢測[2]。

2 結果

2009年1~10月，血型實驗室內質控共發現2次異常情況。經進一步研究分析，1次為標準血清異常，因使用中的抗B血清效價降低，致凝集強度下降，影響了凝集效果，更換新的標準血清后，質控結果正常;2次為試劑紅細胞異常，均為使用中的試劑接近失效期所致，使用新批號的試劑紅細胞后正常。

通過血型實驗的室內質控后，對本站22 051份無償獻血者血液標本，進行ABO血型正、反定型，結果均正常，未發生錯報血型的情況。

3 討論

ABO血型鑒定的原理是基于抗原抗體反應所產生的細胞凝集反應，通過正定型(紅細胞定型試驗)和反定型(血清定型試驗)，判定ABO血型。為進一步提高ABO血型鑒定結果的準確性，必須對血型實驗進行全面質量管理;包括對血型試劑進行進貨驗證、搞好庫存管理、做好室內質控、制定血型鑒定的標準操作規程并嚴格執行等措施，而血型實驗的室內質控是其中的重要環節。

筆者通過實踐認為，血型實驗的室內質控應注意以下幾個方面:(1)采供血機構一般使用各種自動化儀器設備進行加樣、檢測，應當對儀器試劑槽中現用的試劑，或準備用于當天實驗的試劑，進行室內質控，而不能使用庫存的當天不用于實驗的試劑進行質控。(2)試管標記應正確，以免誤讀結果。(3)加樣順序為先加血清，后加紅細胞，以免漏加試劑。(4)加樣量準確、離心條件正確。(5)讀取結果方法正確，一次只讀1支試管，應輕輕搖動試管，仔細觀察結果，不能用力過大。(6)質控結果記錄表格化，以便標準化、規范化地做好實驗記錄，便于檔案管理。通過進行血型實驗的室內質控，可以及時發現不符合質量標準試劑的非預期使用，保證ABO血型結果的準確性。血站檢驗科在每天工作開始時，應進行血型實驗的室內質控，確保為臨床提供安全有效的血液及血液制品，進一步提高輸血安全水平。

[參考文獻]

[1] 中華人民共和國衛生部. 血站實驗室質量管理規范[S]. 衛醫發(2006)，183號.

[2] 張國平，韓惠云，王林. 兩種方法檢測ABO血型結果比較[J]. 山東醫藥，2004，44(29):23.

(收稿日期:2010-02-04)