加味四逆散治療DU患者前后細胞因子變化研究

[摘要] 目的 通過觀察治療前后IL-12、IFN-γ的變化，探討加味四逆散治療十二指腸潰瘍的可能機制。方法 觀察中藥加味四逆散治療十二指腸潰瘍患者治療前后IL-12、IFN-γ的變化，36例十二指腸潰瘍患者給予加味四逆散治療1周，19例健康者為對照組。結果 Hp感染的DU球部黏膜IL-12、IFN-γ水平顯著增高;治療后，Hp陰轉，球部潰瘍愈合，IL-12和IFN-γ水平明顯下降。結論 加味四逆散治療十二指腸潰瘍，可有效降低血清細胞因子IL-12、及IFN-γ，可能是治療DU的作用機制之一。

[關鍵詞] 加味四逆散; 十二指腸潰瘍; 中醫藥療法

[中圖分類號] R573 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701(2010)15-47-02

幽門螺桿菌(Helicobactor pylori，Hp)作為慢性胃炎和消化性潰瘍的重要致病因素已得到證實。近年來有關細胞因子在Hp致病過程中的作用已引起了人們的關注[1]。但中藥加味四逆散是否通過IL-12、IFN-γ在Hp感染的十二指腸潰瘍(DU)中起作用，目前國內尚未見報道。本研究旨在探討中藥加味四逆散治療十二指腸潰瘍的作用機制。

1 對象與方法

1.1 病例選擇

選擇我院2008年1月~2010年1月間經胃鏡檢查和病例檢查確診為活動性DU患者36例，男19例，女17例;年齡17~75歲，平均(47.1±13.4)歲;病程0.5~10年，平均(3±0.4)年;其中Hp陽性30例，陰性6例。對照組為健康志愿者16例，男9例，女7例;年齡17~63歲，平均(30.1±11.3)歲。選擇的所有患者2周內未接受過抗生素、鉍劑、抑酸劑治療，未服用過激素及非甾體類抗炎藥，且除外心、肝、腎功能不全及內分泌疾病者。中藥治療組給予加味四逆散(柴胡10g，枳實10g，白芍10g，生甘草6g，蘇梗10g，陳皮10g，厚樸10g，炒萊菔子10g，焦三仙各15g)加減治療，治療1周。停藥4~6周后復查胃鏡，每位患者做2次胃鏡檢查時，在球部潰瘍邊緣或愈合后潰瘍瘢痕處活檢黏膜組織1~2塊，并在胃竇距幽門2~3cm處鉗取黏膜組織3塊備用。診斷均按2000年中華消化學會井岡山分會標準[2]。

1.2 Hp感染診斷標準

快速尿素酶試驗Hp檢測試紙(由珠海克隆科技有限公司提供)1min內由黃色變為櫻紅色為強陽性，5min內變成櫻紅色為弱陽性，不變色為陰性;Giemasa染色法結果判斷:鏡下見典型細菌則診斷為Hp陽性，Hp感染密度根據悉尼分類進一步分為Hp(+)~Hp(+++)。兩項均陽性者，判為Hp陽性，僅一項陽性者，不列為研究對象。

1.3 IL-12、IFN-γ的檢測

球部黏膜組織稱重、勻漿、離心，取上清液，置-70℃低溫冰箱保存待測，采用ELISA法，檢測上清液中IL-12、IFN-γ的含量(試劑盒均購自中美合資海南華美生化有限公司)。

1.4 統計學方法

計量資料以均數±標準差(χ±s)表示，用SPSS17.0軟件多組間比較采用F檢驗，兩兩比較采用q檢驗。P<0.05 為統計學上有顯著性差異。

2 結果

36例十二指腸潰瘍患者中，Hp陽性的患者為29例(80.55%)，Hp陰性患者為7例。停藥4~6周后，有1例失訪(1例失訪為Hp陰性患者)，29例Hp陽性患者28例Hp轉位陰性，占96.55%。潰瘍愈合31例，占91.18%。

我們發現Hp感染的十二指腸潰瘍球部黏膜IL-12水平顯著增高(t=2.231，P<0.05);治療后，Hp陰轉，球部潰瘍愈合，IL-12水平下降至正常水平，與治療前比較有統計學差異(t=2.357，P<0.05);IFN-γ的分泌顯著多于對照組(t=2.216，P<0.05)，隨著Hp陰轉，球部潰瘍愈合，黏膜IFN-γ分泌也明顯降低，與治療前比較有統計學差異(t=2.421，P<0.05)。

治療前后IL-12、IFN-γ含量變化見表1。

3 討論

Hp是一種非侵襲性病原微生物，感染胃黏膜后在局部可誘導出IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、TNF-α、IFN-γ、EGF等一系列細胞因子表達的上調。這些細胞因子構成一個復雜的炎癥免疫調節網絡，在Hp相關胃黏膜損害機制中發揮重要作用，其詳細作用機制和作用方式目前尚不十分清楚。

我們的實驗發現，Hp感染的十二指腸潰瘍球部黏膜IL-12水平顯著增高，治療后，Hp陰轉，球部潰瘍愈合，IL-12水平下降至正常水平。這與林海[3]發現的Hp感染后，大多數患者胃黏膜有IL-12表達，IL-12mRNA表達水平明顯增高，因而認為IL-12在Hp所致的胃黏膜損害過程中有重要作用。而IFN-γ的分泌顯著多于對照組，隨著Hp陰轉，球部潰瘍愈合，黏膜IFN-γ分泌也明顯降低。這與Rieder[4]發現的Hp感染的胃黏膜IFN-γmRNA水平增高，mRNA表達水平與炎癥程度呈正相關[4]，及閆峻[5]、榮榮[6]發現的Hp感染的胃炎患者血液中IFN-γ mRNA表達水平顯著高于正常人[1]的結果相似。

根據其辨證的主要依據是臨床主癥，臨床運用辨證分析、對證治療，采用疏肝和胃之法，運用加味四逆散為基本方治療，方中柴胡疏肝理氣，調暢氣機;枳實行氣消痞，理脾導滯;白芍柔肝緩急，使肝不橫逆，疏泄條達，與生甘草同用可以緩急止痛;蘇梗理氣舒郁，順氣止痛;陳皮理氣健脾，燥濕化痰;厚樸燥濕散滿，消食散痞;炒萊菔子下氣止嘔，消食化痰;焦三仙則為消食導滯、健運脾胃之良藥，諸藥共用，既能疏肝理脾、消食導滯，又能除濕止嘔，調中止痛，促進胃黏膜修復，諸癥自愈。

同時，中藥加味四逆散治療十二指腸潰瘍患者治療后IL-12、IFN-γ比治療前明顯降低，說明其治療十二指腸潰瘍一部分是通過降低IL-12、IFN-γ發揮的作用。

綜上所述，本文為中藥加味四逆散治療十二指腸潰瘍提供了理論依據。

[參考文獻]

[1] 余躍，侯曉華. 細胞因子在幽門螺桿菌致病過程中的作用[J]. 國外醫學·消化系疾病分冊，2009，18(2):77-81.

[2] 中國醫學會消化病學分會. 全國慢性胃炎研討會共識意見[J]. 中華消化雜志，2007，20(2):199-201.

[3] 林海，杜奕奇，李淑德，等. 幽門螺桿菌陽性與消化性潰瘍患者IL-8、IL-10、IL-12及NF-κB表達的關系研究[J]. 現代中西醫結合雜志，2008，35:27-28.

[4] Rieder G，Hatz RA，Stolte M，et al. mRNA transcript for inflammatory mediators in Hp-associated gastritis[J]. Gut，2005，37(supp1 l):A81.

[5] 閆峻，陳小燕，杜兵，等. 隆起糜爛性胃炎患者血清白細胞介素-4、干擾素-γ水平的變化[J]. 全科醫學臨床與教育，2009，4:32-33.

[6] 榮榮，周曾芬，王廷華. 幽門螺桿菌感染者胃IL-4和IFN-γ表達的免疫組織化學研究[J]. 昆明醫學院學報，2006，3:17-18.

(收稿日期:2010-03-18)