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雞血材料的實驗室準備

2011-01-01 00:00:00湯井林
中學生物學 2011年5期

DNA是遺傳物質,是重要的生物大分子。高中生物選修教材中有一個課題研究的是DNA的粗提取和鑒定方法。雞血是較好的實驗材料,但雞血的實驗室準備則是很煩瑣的過程。為了更好地完成實驗的準備工作,提供一些參考供大家鑒用。

1 聯系農貿市場活禽宰殺批發店

在學生分組實驗之前一周聯系采集雞血地點。

學生實驗往往需要大量的雞血。農貿市場零售的賣雞攤位所能提供的雞血一般不能滿足學生實驗的用量需要。如果遇到零售處大量集中宰殺活雞則是可以的。在大型農貿市場里一般都至少有一家活禽宰殺批發店,每天都要宰殺大量的活雞供應市場,所以活禽宰殺批發店是采集雞血的最好地點。

聯系時要定好采集雞血的時間、地點、用量和價格等。

2 抗凝劑檸檬酸鈉溶液的配制和分裝

在聯系好采集雞血的地點以后、學生分組實驗的幾天之前配制抗凝劑。 取1000mL燒杯一只,注入蒸餾水1000mL。稱取檸檬酸鈉白色粉末100g,把檸檬酸鈉加入燒杯中,用玻璃棒攪拌使其全部溶解。這樣就配制好了1000mL濃度為10%的檸檬酸鈉抗凝劑。根據實驗的需要可以配制500mL、2000mL、3000mL或更多的抗凝劑。 清洗若干個容量為600mL的飲料瓶,撕去瓶外的塑料商標薄膜。在瓶體的中上方貼上雞血標簽。在每個瓶中加入150mL的抗凝劑密封。計劃在采血時加入450mL的雞血,相當于100mL的雞血中加入3.3g的檸檬酸鈉,實踐證明抗凝血的效果非常好。

3 采集雞血前的其他準備

配制好抗凝劑檸檬酸鈉溶液并分裝好以后就可以到市場去采集雞血。準備一個大的塑料袋,把分裝好的抗凝劑裝入袋中,還要帶一支玻璃棒和一只1000mL的燒杯。

為了防止采集雞血時雞血濺到自己的衣服上,采集雞血的老師還要穿上工作服或者舊的衣服。如果有雞血濺到衣服上,回來后就用加酶洗衣粉洗滌。活禽宰殺批發店往往都在清晨大量集中宰殺活雞,所以老師要早早地起床并帶好器具去采血地點。這些都要在采集雞血之前做好時間上的準備。

4 宰殺活雞的現場采集雞血

取出1000mL的大燒杯放置到宰殺活雞的平臺或裝雞網上。取出一瓶抗凝劑,把其中的150mL抗凝劑全部倒人大燒杯。請宰殺活雞的師傅把雞血淌入燒杯,教師則同時用玻璃棒不停地攪拌雞血,使得雞血和抗凝劑充分混合。

當雞血和抗凝劑混合的量達到600mL的時候就把它們倒入剛剛倒出抗凝劑的那個飲料瓶中密封。取出第二個裝有抗凝劑的飲料瓶。把其中的150mL抗凝劑全部倒人大燒杯。剩余的操作同上。如此可以采集到若干瓶未凝固的雞血,每瓶600mL。

5 雞血的保存和沉降

雞血采集完后就把雞血帶回實驗室。用自來水沖洗雞血瓶的瓶體,把它沖洗干凈,同時也把燒杯和玻璃棒洗滌干凈。把雞血瓶放到冰箱中保存備用。雞血就會發生沉降作用。

如果學校沒有冰箱,可以把雞血帶回自己家的冰箱中保存備用。也可以在實驗室進行簡便的保存。取一只塑料桶,在其中注入適量的清冷的自來水。把雞血瓶放到桶中,使得自來水浸沒雞血瓶,保持瓶體垂直。把塑料桶放置在陰冷的環境中讓雞血發生沉降作用。

6 雞血使用前血漿和紅細胞的分離

雞血和抗凝劑的混合液沉降24h以后就可以把紅細胞分裝給學生實驗使用了,但此時的雞血瓶中還有大部分的血漿需要去除。600mL的雞血抗凝劑混合液沉降以后大約可以得到330mL的紅細胞液。其中血漿的分離是要講究方法的。如果用倒出的辦法,也就是把瓶體傾斜讓血漿流出,很容易把紅細胞也倒出來了,或者血漿和紅細胞不能完全分離。較好的辦法是用注射器吸出。取一只20mL的注射器,再取一只滴管,去掉滴管的膠頭,把滴管安裝到注射器上使用。為了增強它的密封性和牢固度,需要在注射器的管頭部位外圍纏繞一些塑料薄膜。這樣,用注射器就可以分若干次把混合液中的血漿吸出。

7 雞血紅細胞的分裝和分發

每瓶雞血和抗凝劑的混合液去除血漿以后得到330mL的雞血紅細胞液可以滿足一個班的實驗需要。輕輕地震蕩瓶體使得紅細胞混合均勻。把紅細胞液倒人容量為500mL的燒杯等待分裝。清洗30個容量為50mL的小燒杯。用量筒量取10mL的蒸餾水加入一只小燒杯內,觀察其中蒸餾水的高度。把大燒杯中的雞血紅細胞液分裝到小燒杯中,每只小燒杯中加入10mL的雞血紅細胞液。對照蒸餾水的高度,每只小燒杯中注入的紅細胞液的量不要超過10mL。這樣分裝得到的30杯雞血紅細胞液馬上供給學生實驗使用。剩余的3杯作為備用,防止學生實驗失敗的再需要。

教師在準備雞血紅細胞液給學生實驗使用時,可以每次準備兩個班的量,即準備66杯雞血紅細胞液。這樣,如果兩個班連續做實驗,在兩節課的課間就可以快速地把雞血分發給后一個班的學生實驗使用。其余的工作依此類推。

任何一件復雜的工作都可以分解成若干個簡單的工作。在組合這些簡單工作時,要注意簡單工作的連接、程序以及時間分配等。實驗室的教師為學生實驗準備雞血紅細胞液就是一件比較復雜的工作。在準備時只要按照上述幾個關鍵的步驟把這些簡單的工作做好就可以把雞血紅細胞液準備好。

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