豬斷奶后多系統衰弱綜合征(PMWS)的診斷與防治措施

摘要：豬圓環病毒２型（ＰＣＶ－２）所引起的斷奶豬多系統衰弱綜合征（ＰＭＷＳ）已給世界各國養豬業造成巨大的經濟損失，且近年來呈現不斷擴散的趨勢。５~１２周齡仔豬是豬圓環病毒感染的主要對象，癥狀表現為生長緩慢、精神不振、食欲減退、咳嗽、呼吸困難等，少數伴有腹瀉和中樞神經癥狀。可依據臨床癥狀和病理變化給出初步的診斷，進一步確診需運用分子生物學手段。要通過采取綜合性措施進行預防，以減少養豬場ＰＭＷＳ的發病率。

關鍵詞：豬多系統衰弱綜合征（PMWS）；豬圓環病毒；斷奶豬

中圖分類號：Ｓ８5８．28文獻標識碼：B文章編號：１００７－２７３Ｘ（２０11）05-0027-02

斷奶豬多系統衰弱綜合征（ｐｏｓｔｗｅａｎｉｎｇ ｍｕｌｔｉｓｙｓｔｅｍｉｃ ｗａｓｔｉｎｇ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＰＭＷＳ）主要由豬圓環病毒２型（ＰＣＶ－２）所致，１９９１年在加拿大西部首次發現［１］，如今已廣泛分布于各國，美國、法國、德國、意大利、日本、中國、荷蘭、墨西哥等國均有報道。該病臨床癥狀主要表現為斷奶豬皮膚蒼白、體質下降，該病被公認為是繼繁殖與呼吸障礙綜合征之后的又一個重要的豬傳染性疾病。２０００年至今，我國大陸范圍內發生了多起斷奶豬多系統衰弱綜合征，由于未使用恰當的防治方法進行控制，該病發病率和死亡率較高，嚴重地區死亡率可達４０％，給養豬業帶來巨大的經濟損失。本文就此病的病原、臨床癥狀、發病機理、診斷方法、防治措施等方面進行了論述。

１病原與臨床癥狀

豬圓環病毒（ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ，ＰＣＶ）屬于圓環病毒科圓環病毒屬［２］，１９７４年最初由Ｔｉｓｃｈｅｒ從豬腎傳代細胞系ＰＫ－１５中分離得到。該科病毒特性與現存的病毒不同，是最小的動物病毒之一，直徑為１４～１７ｎｍ，結構呈對稱２０面體，懸浮密度為１．３７ｇ／ｃｍ3，沉降系數５２Ｓ。核酸是單股環狀的負鏈ＤＮＡ，基因組大小約為１．７６ｋｂ。病毒衣殼蛋白分子量為３６ ０００Ｕ，由一條多肽鏈組成。ＰＣＶ能抵抗外界ｐＨ值為３的酸性環境，甚至在７２℃的高溫下也能存活，氯仿對其無失活作用，缺乏血凝活性。根據豬圓環病毒核苷酸序列、抗原等差異分為ＰＣＶ－１和ＰＣＶ－２兩種血清型，ＰＣＶ－１無致病性，包括ＰＣＶ－ＰＫ１５和其他存在于豬群內但無致病性的ＰＣＶ；ＰＣＶ－２有致病性，目前有從北美、歐洲等地的ＰＭＷＳ病體中分離出來的一些毒株被列入ＰＣＶ－２。

患病的斷奶仔豬主要表現為漸進性消瘦、生長緩慢、精神不振、食欲減退、咳嗽、呼吸困難等，少數伴有腹瀉或黃疸癥狀，患病仔豬扎堆。感染后期淋巴結腫大，免疫能力大幅度降低，并且常與其他疾病混合感染，急性暴發死亡率可達１０％以上，病后一般２～８ｄ死亡，即使存活下來，其發育也會受阻而成為僵豬。剖檢后可發現全身的淋巴結腫大，以腹股溝淺淋巴結腫大最明顯，有白色壞死點分散在腎臟皮質和髓質。膽汁粘稠，混有細小顆粒，胰臟、脾臟和胸腺萎縮。少數仔豬可出現皮膚出血、壞死及腎衰竭。

２發病機理

ＰＣＶ－２型病毒是引起ＰＭＷＳ的主要病原，有報道指出如果不存在ＰＣＶ－２，斷奶豬就不可能發生該病，有時發病和免疫刺激存在一定相關性［２］，ＰＭＷＳ還可與豬肺炎支原體、沙門氏菌、豬鏈球菌Ⅰ型、多殺性巴氏桿菌等病原的協同感染有關，使ＰＣＶ－２的破壞性被這些病毒所利用，從而引起組織機能障礙和免疫抑制作用。此外，在ＰＣＶ－２存在時，通風不好、豬舍潮濕寒冷、豬群密度大、管理不善、不同年齡豬混合飼養等不利的環境因素均可誘發該病且進一步加速擴散。ＰＣＶ-2易感于５～１２周齡斷奶豬，水平、垂直傳播均可。可經呼吸道、口腔感染不同年齡的豬，少數母豬也可經胎盤垂直感染給仔豬，此外ＰＣＶ－２也可隨精液傳播。通過人工對豬接種ＰＣＶ-2試驗，發現同一豬群的感染率竟高達１００％，感染豬的糞便、鼻分泌物中均可分離出ＰＣＶ－２。

也有試驗報道豬體內存在ＰＣＶ－２，但沒有引起ＰＭＷＳ。事實上，ＰＣＶ－２感染是產生ＰＭＷＳ的必要條件，在病豬的體內能提取出大量的ＰＣＶ－２抗原或ＤＮＡ；不過豬血清中存在ＰＣＶ－２抗體不一定能使豬發病。如今很多國家的養豬場都檢測到ＰＣＶ，但是并沒有全部暴發ＰＭＷＳ，這主要是由于不同的病毒類型或者是不同的環境因素導致的。

３診斷

３．１剖檢診斷

對死亡或發病晚期的病豬進行解剖以做出初步診斷，一般可發現肺間質變寬，紅色或灰褐色斑點呈現于組織表面，偶爾可見肺臟化膿性病變。對于免疫系統而言，通常為全身淋巴結腫大，腸系膜、腹股溝和頜下淋巴結等部位的腫大尤為明顯。

３．２實驗室診斷

若需確診該病，必須依靠實驗室診斷方法。可取出病豬的淋巴結、肺臟或脾臟利用分子生物學手段進一步診斷，方法主要包括間接免疫熒光試驗（ＩＩＦ）、免疫熒光技術、間接免疫過氧化物酶技術、酶聯免疫吸附試驗（ＥＬＩＳＡ）、競爭性酶聯免疫吸附試驗（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）、聚合酶鏈式反應技術（ＰＣＲ）、ＤＮＡ原位雜交（ＩＳＨ）、電鏡觀察等。現簡要介紹ＰＣＲ、免疫熒光技術、ＤＮＡ原位雜交、酶聯免疫吸附試驗等方法。

３．２．１聚合酶鏈式反應（ＰＣＲ）Ｏｕａｒｄａｎｊ建立一種多重ＰＣＲ方法，該法是根據ＰＣＶ和谷氨酸鏈中的開放讀碼序列而設計，包括兩套可對ＰＣＶ檢測和定型的引物。第一套含兩對引物，其中一對通過擴增ＯＲＦ２上的４８８ｂｐ來檢測ＰＣＶ－１和ＰＣＶ－２；另外一對擴增的對象不同，為ＰＣＶ－１中ＯＲＦ１上的３７５ｂｐ。第二套也包括兩對引物，第一對和第二對引物分別擴增ＯＲＦ１上的６４６ｂｐ和ＰＣＶ－１的ＯＲＦ２上的４２５ｂｐ。

３．２．２免疫熒光技術Ｄｕｌａｃ等較早建立免疫熒光技術，此方法通過對豬血清中的病毒抗體進行檢測以確定ＰＣＶ的感染情況。步驟是先滴加１０倍稀釋待檢豬的血清于ＰＣＶ感染的ＰＫ－１５單層細胞之上，待其反應３０ｍｉｎ后吸干洗滌，滴加異硫氰酸熒光素標記的兔抗豬抗體在此反應３０ｍｉｎ后吸干、洗滌、鏡檢，設置未感染的ＰＫ－１５細胞作為空白對照，若鏡檢發現熒光細胞則結果為陽性。

３．２．３ＤＮＡ原位雜交技術（ＩＳＨ）利用圓環病毒特異探針檢測核酸從而在病變組織細胞中觀察到明顯標記。Ａｌｌａｎ用ＰＣＶ－ＰＫ１５的ＲＦ型ＤＮＡ作為探針，能夠檢測到固定組織細胞中的病毒核酸。這種方法特異性強、靈敏度高，且能精確定位ＰＣＶ在組織器官中的位置，不足之處在于無法區分ＰＣＶ的血清型。

３．２．４酶聯免疫吸附試驗（ＥＬＩＳＡ）郎洪武等用ＰＣＶ－２克隆化的特異性表達抗原對反應板進行包被［３］，然后利用ＥＬＥＳＡ檢測豬血清中的ＰＭＷＳ抗體，如果被檢測的樣品ＯＤ值與對照樣品的ＯＤ值之比大于３，則結果為陽性，小于３則為陰性。

４防治措施

４．１注射疫苗或血清

目前國內已經有ＰＣＶ－２疫苗可以進行免疫接種，也可采取病豬的臟器如肺臟、淋巴結等組織制作自家組織滅活疫苗，對養豬場內的健康豬進行接種，能達到一定的預防效果。仔豬在１０日齡左右接種，而母豬在產前２０ｄ時接種一次。研究表明豬藍耳病病毒（PRRSV）和豬細小病毒（PPV）是ＰＭＷＳ的并發性病原體，為預防ＰＣＶ與其他病毒混合感染，斷奶前對仔豬接種ＰＰＶ和ＰＲＲＳ疫苗可以降低ＰＭＷＳ的發病率，不過應禁止在急性ＰＣＶ－２感染期間接種疫苗。此外還可利用血清療法進行預防［４］，血清的制備方法是將本養豬場健康的母豬用感染仔豬的臟器自然感染后，使母豬體內產生相應的抗體，收集母豬血液，分離血清對斷奶期仔豬采取肌肉注射和腹腔注射。注意應使用本養豬場的豬血清，選擇合適的供血母豬，注意血清的貯存和注射方法。

４．２加強飼養管理

由于ＰＭＷＳ是通過呼吸道、口腔、糞便等接觸傳播，首先應該保證豬場內部實行全進全出的管理制度，禁止從疫區引豬，來訪的車輛及貨物等需要嚴格控制，同時防止其他動物如鼠、飛鳥等進入豬場，以阻斷豬群之間的傳播途徑；其次豬群密度不應過大，豬舍通風換氣良好，嚴格消毒，仔豬早斷奶，不允許將不同年齡的豬進行混群飼養，盡量每欄只養一窩豬，及早對病豬或死豬進行隔離、深埋，最大程度避免交叉感染；再次，應將豬斷奶、斷水、換料、轉群等過程中產生的應激因素降到最低。飼料中應加入充足的維生素、氨基酸和各種微量元素等，提高豬的抵抗力。在易感時期，為進一步防范免疫抑制作用，也可在飼料中加入免疫增強劑和一定量的霉菌毒素吸附劑。另外，給病豬喂食粥料或濕拌料能提高病豬的采食量。

４．３添加藥物

豬感染ＰＣＶ－２后，可繼發感染支原體、胸膜肺炎放線桿菌、副豬嗜血桿菌等病原菌，因此添加能控制病原菌繼發性感染的藥物可起到一定的預防作用，且需對母豬和仔豬同時用藥。例如可在產前、產后母豬以及仔豬飼料中添加支原凈１００ｍｇ／ｋｇ＋金霉素３００ｍｇ／ｋｇ＋阿莫西林２００ｍｇ／ｋｇ，分別連續使用一周或兩周，可殺滅豬體內的病原菌，還能阻斷母豬、仔豬間的垂直傳播。

通過綜合運用上述各種方法可降低ＰＭＷＳ發病率，減少經濟損失。其中飼養管理措施是最重要的，不能過度依賴藥物及疫苗，應結合當地具體的情況采取相應的綜合手段，盡可能完善養豬場內的飼養條件。

參考文獻：

［１］ＬＩＵ Ｑ，ＷＡＮＧ Ｌ，ＷＩＬＬＳＯＮ Ｐ，ｅｔ ａｌ． Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ， ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ ＰＣＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｐｏｒｃｉｎｅ ｃｉｒｃｏｖｉｒｕｓ ＤＮＡ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ｆｒｏｍ ｐｉｇｓ ｗｉｔｈ ｐｏｓｔｗｅａｎｉｎｇ ｍｕｌｔｉｓｙｓｔｅｍｉｃ ｗａｓｔｉｎｇ ｓｙｎｄｒｏｍｅ［Ｊ］． Ｊ Ｃｌｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０００，３９（９）：３４７４－３４７７．

［２］戴益民，何厚軍．豬圓環病毒病（ＰＣＶＤ）研究進展［Ｊ］．動物科學與動物醫學，２００３，20（１０）：３８－４０．

［３］左玉柱，丁壯． 豬斷奶后多系統衰弱綜合癥（ＰＭＷＳ）［Ｊ］．畜牧市場，２０１０（３）：１０－１２．

［４］銀梅，唐海蓉，陳桂香，等． 斷奶仔豬多系統衰弱綜合征［A］． 中國畜牧獸醫學會獸醫病理學分會第十三次學術討論會和中國病理生理學會動物病理生理專業委員會第十二次學術討論會論文集［Ｃ］，２００５．