淺談動物傳染病的診斷

中圖分類號：Ｓ８５４．４文獻標識碼：B文章編號：１００７－２７３Ｘ（２０11）05-0029-02

動物傳染病種類繁多，錯綜復雜，特別是近年來又陸續發現部分新的傳染病，給動物傳染病的防控工作增加了難度。但是，每種傳染病都有其固有的特點，盡管有些病有很多相似之處，但總能找出它們的不同，這就屬于動物傳染病的診斷范疇。動物傳染病的診斷就是依靠人的感官或利用其他方法對疫情進行分析、對動物及其代謝產物進行檢查，從而做出綜合判斷。及時、準確、有效的診斷是防控和撲滅動物傳染病的關鍵，及時準確診斷傳染病能有效地組織撲滅措施，做到有的放矢。診斷的方法和手段很多，在實際工作過程中，只需根據傳染病的特點采用幾種方法，甚至一、兩種方法便可做出準確的判斷。

１臨床綜合診斷

１．１流行病學診斷

流行病學診斷是針對患病動物群體、經常與臨床診斷聯系在一起的一種診斷方法。某些家畜疫病的臨床癥狀雖然非常相似，但其流行特點和規律卻差別很大。因此，這種方法在傳染病的診斷工作中具有極大的實用價值。

１．１．１動物流行病學調查步驟根據檢測材料的不同，動物流行病學調查分為臨診流行病學調查、血清流行病學調查和病原流行病學調查。一旦發生傳染病，流行病學調查是確保疫病診斷正確的重要環節。實踐中，流行病學調查可采取多種方式進行，如以座談方式向畜主或相關知情人士詢問疫情，或對現場進行仔細觀察、檢查，取得第一手資料，然后進行綜合歸納、處理，作出初步診斷。

１．１．２動物流行病學調查內容

（１）疫病流行情況。最初發病的時間、地點、蔓延的情況，目前的疫情分布。疫區內各種動物的數量和分布情況，發病家畜的種類、數量、年齡、性別，疫病傳播速度和持續時間等。是否進行過診斷，采取過哪些措施，效果如何。動物防疫情況如何，是否做過免疫監測。發病前有無飼養管理、飼料、用藥、氣候等變化或其他應激因素存在。查明其感染率、發病率、死亡率、病死率，它們均反映了動物傳染病的發病嚴重程度。

（２）疫情來源情況。本地過去是否發生過類似的疫情，流行情況如何，是否經過確診，何時采取過何種措施，效果如何。若本地未發生過，附近地區是否發生過，這次周邊地區有無疫情。是否近期引進畜禽或其產品，是否有外來人員進入本場或本地區進行參觀、訪問或購銷活動等。

１．２臨床診斷

利用人的感官或借助一些最簡單的器械如體溫計、聽診器等直接對病畜進行檢查，該法簡便易行，有時也包括血、糞、尿的常規檢驗。檢查內容主要包括患病動物的精神、食欲、體溫、脈搏、體表及被毛變化、分泌物和排泄物特性、呼吸系統、消化系統、泌尿生殖系統、神經系統、運動系統及五官變化等。有些傳染病具有特征臨床癥狀，經過仔細的臨床檢查可以做出診斷，如破傷風、狂犬病和放線菌病等。但在很多情況下，臨床診斷只能提出可疑疫病的大致范圍，必須結合其他診斷方法才能做出確診。在進行臨床診斷時，應注意對整個發病畜群所表現的綜合癥狀加以分析判斷，以免誤診。

１．３病理解剖學診斷

很多傳染病都有特征性的病理變化，因此，病理解剖學檢查是診斷傳染病的重要方法之一。它既可驗證臨床診斷結果的正確與否，又可為實驗室診斷方法和內容的選擇提供參考依據。作病理解剖檢查時應注意操作順序，先觀察尸體外觀變化，包括有無尸僵出現、被毛及皮膚變化；天然孔有無分泌物、排泄物和出血及其性質；體表有無腫脹或異常；四肢、頭部及五官有無變化等。然后檢查內臟，先胸腔再腹腔；先看外表（漿膜）再切開實質臟器和漿膜；先檢查消化道以外的器官組織，最后檢查消化道，以防消化道內容物溢出而影響觀察并造成污染。檢查時注意實質臟器有無炎癥、水腫、出血、變性、壞死、萎縮、腫瘤等異常變化。對家禽還應注意觀察氣囊和法氏囊。由于每種傳染病的所有病理變化不可能在每一個病例身上都充分表現出來，應盡可能多的選擇癥狀較典型、病程長的、未經治療的自然死亡病例進行剖檢。此外，病理剖檢應由獸醫人員在規定的地點和場所來完成，不可任意隨地剖檢，以免造成污染，散播疾病。如果懷疑炭疽時則嚴禁剖檢。

２實驗室診斷

２．１病理組織學診斷

有些疫病引起的大體病變并不明顯，僅靠肉眼很難作出判斷，還需作病理組織學檢查才有診斷價值，例如傳染性海綿狀腦病、豬圓環病毒病、腫瘤等。有些病還需檢查特定的組織器官，如疑為狂犬病時應取腦海馬角組織進行包涵體檢查。

２．２微生物學診斷

２．２．１病料的采集正確采集病料是微生物學診斷的重要環節。病料應力求新鮮，最好能在瀕死時或死后數小時內采取；應從癥狀明顯、瀕死期或自然死亡而且未經治療的病例取材；要求盡量減少雜菌污染，用具器皿應盡可能嚴格消毒。通常可根據所懷疑病的類型和特性來決定采取哪些器官或組織。原則上要求采取病原微生物含量多、病變明顯的部位，同時易于采取，易于保存和運送。如果缺乏臨床資料，剖檢時又難以分析診斷可能屬何種病時，應比較全面地取材，例如血液、肝、脾、肺、腎、腦和淋巴結等，同時要注意采取帶有病變的部分。

２．２．２病料涂片、鏡檢通常把有顯著病變的組織器官涂片數張，進行染色、鏡檢。此法對于一些具有特征性形態的病原菌如炭疽桿菌、巴氏桿菌等可以迅即做出診斷，但對大多數傳染病來說，只能提供初步依據或參考。

２．２．３分離培養和鑒定分離培養細菌、真菌、螺旋體等可選擇適當的人工培養基，分離培養病毒可選用禽胚、動物或細胞組織等。分離得病原體后，再進行形態學、培養特性、動物接種、免疫學及分子生物學等鑒定。

２．２．４動物接種試驗將病料用適當的方法處理后人工接種敏感的動物，然后根據對動物的致病力、癥狀和病理變化特點來幫助診斷。一般常用的實驗動物有家兔、小鼠、豚鼠、倉鼠、家禽、鴿子等。當實驗動物對病原體無感受性時，可以采用有易感性的本種動物，在一定條件下進行動物接種試驗。

２．３免疫學診斷

２．３．１血清學試驗可以用已知抗原來測定被檢動物血清中的特異性抗體，也可以用已知的抗體來測定被檢材料中的抗原。常用的血清學試驗方法有：中和試驗、凝集試驗（直接凝集試驗、間接凝集試驗、間接血凝試驗、協同凝集試驗和血細胞凝集抑制試驗）、瓊脂擴散沉淀試驗、補體結合試驗、免疫熒光試驗、免疫酶技術（ＥＬＩＳＡ）。這些方法已成為傳染病快速診斷的重要工具。

２．３．２變態反應動物患某些傳染病（主要是慢性傳染病）后，可對該病病原體或其產物（某種抗原物質）的再次進入產生強烈反應，即變態反應。能引起變態反應的物質（病原體或其產物或抽提物）稱為變應原，如結核菌素、鼻疽菌素等，將其注入患病動物時，可引起局部或全身反應，故可用于傳染病的診斷。

２．４分子生物學診斷

分子生物學診斷又叫基因生物學診斷，其中使用最廣泛的要數ＰＣＲ技術。ＰＣＲ即聚合酶鏈式反應，是在ＤＮＡ聚合酶催化下，以母鏈ＤＮＡ為模板，以特定引物為延伸起點，通過變性、退火、延伸等步驟，體外復制出與母鏈模板ＤＮＡ互補的子鏈ＤＮＡ的過程，是一項ＤＮＡ體外合成放大技術，能快速特異地在體外擴增任何目的片段，從而可檢測出許多動物傳染病病原。