可溶性Fas和sFasL檢測(cè)在冠心病診療中的臨床價(jià)值

楊兆穎，李金梁，吳綏生

（1.黑龍江省醫(yī)院老年心內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036；2.黑龍江省醫(yī)院心內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036；3.吉林大學(xué)第一醫(yī)院干部病房，吉林長(zhǎng)春 130021）

可溶性Fas和sFasL檢測(cè)在冠心病診療中的臨床價(jià)值

楊兆穎1，李金梁2，吳綏生3

（1.黑龍江省醫(yī)院老年心內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036；2.黑龍江省醫(yī)院心內(nèi)科,黑龍江哈爾濱 150036；3.吉林大學(xué)第一醫(yī)院干部病房，吉林長(zhǎng)春 130021）

目的：探討冠心病患者血清可溶性Fas（sFas）和sFasL水平變化的臨床意義。方法：應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對(duì)入選的90例冠心病患者（急性心肌梗死患者28例，不穩(wěn)定型心絞痛患者35例，穩(wěn)定型心絞痛患者27例）的外周血sFas和sFasL水平進(jìn)行檢測(cè)，并與30例正常對(duì)照者進(jìn)行比較。結(jié)果：急性心肌梗死組和不穩(wěn)定型心絞痛組血清sFas和sFasL水平明顯高于穩(wěn)定型心絞痛組和正常對(duì)照組（P＜0.05），隨訪期各組心血管事件發(fā)生率與各組sFas和sFasL水平的梯度差異一致。結(jié)論：sFas和sFasL的升高在冠心病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，是反映斑塊不穩(wěn)定的指標(biāo)之一，其水平變化對(duì)了解病情，觀察預(yù)后有重要的臨床價(jià)值。

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病；血清可溶性Fas（sFas）；血清可溶性Fas配體（sFasL）

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病 （coronary heart disease，CHD）已成為現(xiàn)代社會(huì)常見(jiàn)病、多發(fā)病，是全球性致殘和致死的最主要原因之一。細(xì)胞凋亡和炎癥免疫反應(yīng)可能參與動(dòng)脈硬化斑塊的發(fā)生發(fā)展[1]。研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)as/FasL系統(tǒng)是引起細(xì)胞凋亡的主要途徑之一[2]，為進(jìn)一步防治冠心病的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后提供了新的思路。本研究就血清中sFas和sFasL在不同類(lèi)型冠心病患者中的水平進(jìn)行研究分析，并觀察其隨訪時(shí)的心血管事件發(fā)生率，旨在探討血清sFas和sFasL水平與冠心病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系及對(duì)冠心病近期預(yù)后的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2009年11月～2010年6月在我院住院治療的冠心病患者90例。診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)葉任高、陸再英主編內(nèi)科學(xué)第6版冠心病的分型標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)病史、臨床表現(xiàn)及心電圖、心臟超聲心動(dòng)圖、心肌酶學(xué)檢查等相關(guān)檢查分為急性心肌梗死（AMI）組28例、不穩(wěn)定型心絞痛（VAP）組35例、穩(wěn)定型心絞痛（SAP）組27例。另選擇在我院進(jìn)行體檢的健康體檢者30例作為正常對(duì)照組，經(jīng)病史詢(xún)問(wèn)無(wú)心血管疾病史。根據(jù)臨床及實(shí)驗(yàn)室檢查等情況明確排除心臟疾患。各入選患者均排除近期急慢性感染性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤性疾病、慢性纖維增生性疾病、播散性血管內(nèi)凝血和嚴(yán)重肝、腎功能不全。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 AMI組和VAP組患者在急性發(fā)病來(lái)院時(shí)抽取外周靜脈血5 ml，自然凝固后常溫下3 000 r/min離心10 min，分離血清于-70℃低溫冰箱保存待測(cè)sFas和sFasL，SAP組和正常對(duì)照組于入院后次日清晨空腹12 h后采取靜脈血4 ml。

1.2.2血清sFas和sFasL水平測(cè)定 采用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）測(cè)定，試劑盒購(gòu)自上海森熊科技實(shí)業(yè)有限公司，操作按說(shuō)明書(shū)。

1.2.3 隨訪 隨訪期為住院期及出院后共6個(gè)月時(shí)間，觀察主要心血管事件：心源性死亡、再次心肌梗死、再發(fā)心絞痛。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組患者血清sFas和sFasL水平

各組患者血清sFas和sFasL水平檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 各組患者血清sFas和sFasL水平比較（±s）Tab.1 Comparison of serum sFas and sFasL levels in coronary heart disease（±s）

表1 各組患者血清sFas和sFasL水平比較（±s）Tab.1 Comparison of serum sFas and sFasL levels in coronary heart disease（±s）

*與對(duì)照組比較，P＜0.01，F(xiàn)（sFas）=35.402 4，F(xiàn)（sFasL）=30.502 4；與SAP組比較，P＜0.05，F(xiàn)（sFas）=21.017 6，F(xiàn)（sFasL）=28.636 5；#與UAP組比較，P＜0.05，F(xiàn)（sFas）=30.601 5Compared with controls，4P＜0.01,F（sFas）=35.402 4,F（sFasL）=30.502 4;compared with SAP group,P＜0.05,F（sFas）=21.017 6,F（sFasL）=28.636 5; compared with UAP group,#P＜0.05,F（sFas）=30.601 5

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2.2 sFas和sFasL水平與冠心病近期預(yù)后的關(guān)系

本研究隨訪期平均為92.2 d，共出現(xiàn)心血管事件44例，均發(fā)生在冠心病組中。各組間呈明顯的梯度差異，P＜0.05。這與各組sCD40L水平的梯度差異一致。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 各組患者6個(gè)月內(nèi)主要心血管事件比較[n(%)]Tab.2 Comparison of primary coronary intervention in 6 months[n(%)]

3 討論

近年研究提示動(dòng)脈粥樣硬化在冠心病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。研究表明[3-4]，由易損斑塊破裂引起的心腦血管病事件遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于單純血管狹窄引起的事件。隨著有關(guān)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的研究進(jìn)展，尋找能反映不穩(wěn)定斑塊特點(diǎn)的敏感特異性標(biāo)志物尤其是血清學(xué)指標(biāo)，以早期預(yù)測(cè)冠心病已成為當(dāng)今的研究熱點(diǎn)。

Fas系統(tǒng)是細(xì)胞凋亡調(diào)控信號(hào)途徑的重要部分，是機(jī)體維持自身穩(wěn)定的一條重要調(diào)控途徑。Fas抗原主要表達(dá)于激活的T細(xì)胞、B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞的表面，與FasL結(jié)合后介導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。sFas是由Fas抗原在轉(zhuǎn)錄水平地不同拼接而成，游離于血清中，可阻斷Fas配體傳導(dǎo)的信號(hào)。通過(guò)檢測(cè)血清中sFas和sFasL對(duì)于進(jìn)一步認(rèn)識(shí)和診療冠心病有重要作用。Boylle等[5]提出sFas增高介導(dǎo)的VSMCs凋亡增多，纖維帽張力下降可直接導(dǎo)致斑塊破裂，參與急性冠脈事件的發(fā)生。另有研究發(fā)現(xiàn)[6]冠心病患者sFas水平升高可能是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的一個(gè)重要使動(dòng)因素，由于激活的T淋巴細(xì)胞凋亡受抑制造成T淋巴細(xì)胞自身持久及過(guò)度活化，一方面加速平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移[7]，促使動(dòng)脈硬化斑塊的形成，另一方面可能造成斑塊內(nèi)細(xì)胞成分的破壞，致斑塊不穩(wěn)定[8]，從而導(dǎo)致冠脈事件的發(fā)生發(fā)展。

本實(shí)驗(yàn)顯示，AMI組和UAP組sFas和sFasL水平明顯高于SAP組和正常對(duì)照組。冠心病患者易損斑塊較穩(wěn)定性斑塊炎癥反應(yīng)活躍，sFas和sFasL作為血清炎性標(biāo)志物，在ACS患者（包括AMI和UAP組）中的水平明顯增加。且隨著病情的加重其水平更高，與上述文獻(xiàn)報(bào)道一致。在6個(gè)月的近期隨訪中，觀察到冠心病患者在住院后6個(gè)月內(nèi)的心血管事件發(fā)生率較正常對(duì)照組高。且在AMI組、UAP組和SAP組呈明顯梯度差異，說(shuō)明sFas和sFasL與冠心病的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)。因此我們可預(yù)測(cè)高水平的sFas和sFasL可能代表斑塊的不穩(wěn)定狀態(tài)。提示其可能作為冠心病病情判斷和預(yù)后估計(jì)的敏感血清學(xué)指標(biāo)，具有很廣闊的臨床應(yīng)用前景。

[1]HanssonGK.Immunemechanismsinatherosclerosis[J].ArtheriosclerThromb Vasc Biol,2001,(21):1876-1890.

[2]Okayama M,Yamaguchi S,Nozaki W,et al.Serum levels of soluble form of Fas molecule in paitients with congestive heart failure[J].Am J Cardio, 1997,79(12):1698-1701.

[3]Boyle JJ.Macrophage activation in atherosclerosis:pathogenesis and pharmacology of plaque rupture[J].Curr Vasc Pharmacol,2005,3(1):63-68.

[4]Saam T,Hatsukami TS,Takaya N,et al.The vulnerable,or high-risk, atherosclerotic plaque:nonivasive MR imaging for characterization and assessment[J].Radiology,2007,244(1):64-77.

[5]Boyle JJ,Bowyer DE,Weissberg PL,et al.Human blood derived macrophage induce apoptosis in human plaque-derived vascular smooth muscle cells by Fas-ligand/Jas interactions[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2001,21:1402-1407.

[6]葛長(zhǎng)江,胡申江,鄭霞,等.冠心病患者血清sFas和sFasL及sIL-2R的水平[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2002:31(5):337-339.

[7]Elahi AW,Vijayakumar AN,Lichetein E,et al.Interplay of antibody and T cell responses in acute myocardial infarction[J].Lab Clin Med,2001,138 (2):112-118.

[8]BoyleJJ,BowyerDE,WeissbergPL,etal.Humanblood-derived macrophage induce apoptosis in human plaque-derived vascular smooth muscle cells by Fas-Ligand/Fas interactions[J].A rterioscler Thromb Vasc Biol,2001,21 (9):1402-1407.

Clinical value of detection of serum soluble fas and sFasL levels in coronary heart disease

YANG Zhaoying1,LI Jinliang2,WU Suisheng3
(1.Department of gerontal Cardiology,Heilongjiang Province Hospital,Harbin 150036,China;2.Department of Cardiology, Heilongjiang Province Hospital,Harbin 150036,China;3.Department of Cadre Ward,The First Hospital of Jilin University,Changchun 130021,China)

Objective:To investigate the clinical significance of the serum levels of soluble Fas(sFas)and sFasL in coronary heart disease(CHD).Methods:Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was used to measure sFas and sFasL in 90 patients with coronary heart disease(28 with acute myocardial infarvction,35 with unstable angina pectoris and 27 with stable angina pectoris)and 30 matched healthy controls.Results:sFas and sFasL levels were significantly higher in patients with acute myocardial infarction and unstable angina pectoris than that of stable angina pectoris and controls.Incidence of high risk of cardiovascular event during follow-up period was higher in patients with high sFas and sFasL levels than that of those with lower levels.Conclusion:The levels of sFas and sFasL increase in coronary heart disease,which may be related to the pathogenesis of CHD,can be used as a potential marker of plaque instability,and the changes of sFas could reflect the disease status as well as progress of disease in patients with coronary heart disease.

Coronary heart disease;Soluble Fas(sFas);Soluble Fas ligand(sFasL)

R446.1

A

1673-7210（2011）02（c）-022-02

楊兆穎（1978.6-），女，主治醫(yī)師，現(xiàn)于吉林大學(xué)第一醫(yī)院干部病房攻讀博士學(xué)位；研究方向：冠心病的臨床研究。

2010-12-16）