正交試驗優(yōu)選透明質酸鈉乳膏的處方工藝

初 陽 ，陳 濤 ，2，馮婉玉 *

（1.中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院藥學部，遼寧沈陽 110001；2.重慶市巴南區(qū)第三人民醫(yī)院藥劑科，重慶 401338）

正交試驗優(yōu)選透明質酸鈉乳膏的處方工藝

初 陽1，陳 濤1，2，馮婉玉1*

（1.中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院藥學部，遼寧沈陽 110001；2.重慶市巴南區(qū)第三人民醫(yī)院藥劑科，重慶 401338）

目的：優(yōu)選透明質酸鈉乳膏劑的最優(yōu)處方。方法：以乳膏劑的外觀考察、穩(wěn)定性考察、穩(wěn)定常數(shù)測定及顯微鏡法觀察作為考察指標，采用單因素考察和正交試驗優(yōu)選最優(yōu)處方。結果：橄欖油、液體石蠟、硬脂酸的投藥比例為1∶0.8∶1，在水相中加入主藥。結論：該工藝制得乳膏劑膏體柔軟細膩，光亮美觀，涂展好，滲透快，穩(wěn)定性好，顯微鏡觀察粒子均勻。

透明質酸鈉乳膏；單因素考察；正交試驗

透明質酸（Hyaluronic acid，HA）又叫玻尿酸，是一種酸性黏多糖。它能夠吸收自身500倍以上的水分，為彈力纖維和膠原纖維提供充足的水分環(huán)境，從而保持肌膚彈性和張力[1-2]。將透明質酸鈉制成乳膏制劑，既可幫助患者延緩皮膚衰老，補充皮膚水分；又可幫助外傷患者傷口愈合，防止瘢痕產(chǎn)生[3-4]。雖然已有上市的含透明質酸的化妝品[5]，但透明質酸僅作為保濕劑出現(xiàn)，并非主要成分，因此藥用效果不明顯；同時化妝品花費較高，含量較少，也不適合大規(guī)模藥用。因此，進行透明質酸鈉乳膏劑處方工藝研究，探討工業(yè)化生產(chǎn)藥用透明質酸鈉乳膏劑工藝。

1 材料與方法

1.1 試劑

透明質酸鈉 （山東福瑞達生物化工有限公司，批號：0911062，外用級）；硬脂酸（湖南爾康制藥有限公司，批號：20090202）；液體石蠟 （湖南爾康制藥有限公司，批號：20091201）；橄欖油 （上海日尚日用品有限公司，批號：20090130）；甘油（沈陽紅旗制藥有限公司，批號：0912011）；三乙醇胺（西安東寶天元科技實業(yè)公司，批號：20090201）；海藻酸鈉（天津市遠航化學品有限公司）。

1.2 儀器

HS-6型熱恒溫箱 （太倉市華利達實驗設備有限公司）；HP8453型紫外分光光度器 （美國安捷倫公司）；AE200型電子分析天平 （遼寧省科學器材總公司）；TGL-16B型離心機（北京京立離心機有限公司）；DGF30/7-IA-HG101-1A型電熱鼓風干燥箱（南京實驗儀器廠）。

2 處方設計

2.1 基礎處方工藝

分別稱量油相（硬脂酸3 g、橄欖油2.5 g、液體石蠟2 g）和水相（甘油2.5 g、三乙醇胺0.2 g、海藻酸鈉0.15 g、防腐劑適量、純化水5 ml、透明質酸鈉0.2 g），置于燒杯中，使油相達75℃，水相達90℃，充分攪拌讓其溶化，再將油相緩緩加入水相中進行乳化，乳化時保持一定溫度并不斷勻速攪拌成乳膏狀，冷凝，即得。

2.2 考察指標

2.2.1 外觀考察 將乳膏分別置于常溫，30℃條件下3個月，考察膏體稠度、光澤性、涂展性、滲透性。

2.2.2 穩(wěn)定性考察 （離心實驗）[6]將乳劑置10 cm離心管中以3 750 r/min速度離心5 h，相當于放置1年的自然分層效果，此法可用于對乳劑的穩(wěn)定性考察。

2.2.3 穩(wěn)定常數(shù)測定[6]乳劑離心前后光密度變化百分率稱為穩(wěn)定常數(shù)，用Ke表示，其表達式如下：

式中，A0：未離心乳劑稀釋液的吸光度；A：離心后乳劑稀釋液的吸光度，Ke值愈小乳劑愈穩(wěn)定。此法是研究乳劑穩(wěn)定性的定量方法。

2.2.4 顯微鏡法測定[6]用10×10倍數(shù)的光學顯微鏡觀察粒子狀態(tài)，考察乳劑是否均勻。

2.3 單因素考察

2.3.1 主藥加入方式考察 所用藥品量為基礎處方量，通過改變主藥加入方式對乳膏劑進行外觀考察，見表1。

由表1可知，不同的主藥加入方式可影響乳膏劑的外觀。

2.3.2 水相中甘油量的考察 基礎處方中甘油量定于1.5 g、2.5 g、

4 g，其他藥品量為基礎處方中藥品量，主藥加入方式暫定為加入水相。外觀考察結果見表2。

表2 水相中甘油量的考察Tab.2 Investigation of the glycerol in aqueous phase

由表2看出，甘油的加入量對透明質酸鈉乳膏劑的外觀影響不大。

2.3.3 油相中橄欖油和液體石蠟比例考察 水相比例不變，主藥加入方式定為水相，乳化劑固定在2.5 g。分別改變橄欖油和液體石蠟的比例，分3個水平考察，其結果見表3。

表3 油相中橄欖油和液體石蠟比例的考察Tab.3 Ratio investigation of olive oil and liquid paraffin in oil phase

由表3可知，油相中橄欖油和液體石蠟的比例不同，對透明質酸鈉乳膏劑的外觀有較大影響。

2.3.4 乳化劑量考察 水相和油相（橄∶液=1∶0.8）的比例保持不變，主藥加入方式為水相。通過改變乳化劑的量，分3個水平考察，結果見表4。

表4 乳化劑量考察Tab.4 Investigation examine the amount of emulsifier

由表4看出，硬脂酸的加入量不同，對透明質酸鈉乳膏劑的外觀有較大影響。

2.4 正交試驗

通過上述實驗結果分析，水相中甘油量對實驗結果影響小，故在后面的正交試驗因素水平設計中不作考慮；而油相各成分比例和主藥加入方式及乳化劑的量對結果有明顯的影響。所以將油相配比、乳化劑用量、主藥的加入方式作為正交試驗的3個因素，選用L9（34）正交表進行試驗，見表5。

表5 正交試驗因素水平表Tab.5 Orthogonal factor level table

2.5 考察指標結果與評分

對上述正交因素進行外觀綜合考察、穩(wěn)定性考察、穩(wěn)定常數(shù)測定、顯微鏡觀察，得到結果與評分見表6～9、圖1。

表6 外觀考察結果與評分（放置3個月）Tab.6 Results and score of the exterior inspection （for 3 months）

2.6 正交試驗結果

通過正交試驗直觀分析結果顯示，A、C因素對透明質酸軟膏穩(wěn)定性的影響有統(tǒng)計學意義，B因素對其穩(wěn)定性相對較小。影響其穩(wěn)定性和外觀性狀的主次因素順序為A＞C＞B。根據(jù)正交試驗結果，選擇有較好的穩(wěn)定性又有較理想的外觀性狀，其處方配比和工藝條件是A1B1C1。

2.7 工藝確定

通過正交試驗，該處方最優(yōu)配方及工藝為乳化劑硬脂酸為2.5 g、油相中橄欖油為2.5 g、液體石蠟為2.0 g、水相中甘油為 5.06 g、三乙醇胺 0.2 g、海藻酸鈉 0.15 g、純化水 5 ml、透明質酸鈉0.20 g、防腐劑適量；主藥加入方式為水相。水相油相分別加熱到規(guī)定溫度，再將油相緩慢倒入水相中進行乳化，乳化時保持一定溫度，攪拌均勻，待膏體成型后，冷卻，即可。

表7 離心實驗結果與評分Tab.7 Results and score of the centrifugal experiment

表8 穩(wěn)定常數(shù)的測定結果與評分Tab.8 Results and score of the stability constant

2.8 加速試驗

將最優(yōu)處方乳膏劑以軟管封裝，在溫度（30±2）℃、相對濕度（65±5）%的條件[7]下放置 6個月，觀察乳膏劑外觀，外觀顯示乳膏劑無變化。

3 討論

目前關于透明質酸鈉乳劑的研究較少，僅有周福富等[8]對透明質酸鈉乳劑的處方進行了研究，主要是對乳化劑的考察以及乳劑的穩(wěn)定性考察。本實驗中，透明質酸鈉乳劑加入了橄欖油以及海藻酸鈉，在保濕的同時，還可以起到滋潤護膚的功效；同時本實驗從宏觀（外觀觀察、離心實驗以及穩(wěn)定常數(shù)的測定）和微觀（顯微鏡粒子觀察）四個方面全面考察了乳劑的質量，從中篩選出了最優(yōu)處方。

表 9 L9（34）正交試驗Tab.9 L9 （34） Orthogonal test

海藻酸鈉為親水性膠體，易溶于水形成黏稠溶液。利用其增稠穩(wěn)定性能，可用作化妝品增稠劑、穩(wěn)定劑。在本處方中用作增加水相黏度的輔助乳化劑。

橄欖油富含抗氧化物質及抑制活性氧的功效，能滲透進肌膚的基底層，送去營養(yǎng)成分，從而促進新陳代謝。橄欖油還含有多種人體所需的營養(yǎng)成分，不含香精和化學物質，其脂肪酸和多種天然脂溶性維生素對滋養(yǎng)肌膚十分有利，在本處方中作為油相。

處方中乳化劑的設計：要作出穩(wěn)定的透明質酸軟膏，處方設計中要考慮各成分的HLB值 （親水親油平衡值）等因素，其中乳化劑的選擇及比例的確定是關鍵。HLB值在3～6的表面活性劑適合用作W/O型乳化劑，HLB值在8～18的表面活性劑適合用作O/W型乳化劑。通過計算，硬脂酸三乙醇胺乳化劑的HLB值為16.7，可作O/W型乳化劑。

[1]凌沛學.透明質酸[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,2000:1-2.

[2]黃思玲,郭學平,楊桂蘭,等.透明質酸近兩年的應用研究進展[J].食品與藥品,2009,11(1):50-53.

[3]吳鋼,劉斐,張傳蕓,等.透明質酸鈉傷口愈合水凝膠促進體表膿腫切開引流術后殘腔愈合的研究[J].中國修復重建外科雜志,2008,22(9):1082-1084.

[4]賴曉文,何曉升,鐘曉春,等.不同時期增生性瘢痕組織內透明質酸含量與含水量的相關性[J].中國組織工程研究與臨床康復,2008,12(2):323-325.

[5]劉彤.透明質酸及其在化妝品中的應用[J].廣州化工,2009,37(8):71-73.

[6]崔福德.藥劑學[M].6版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:186-187.

[7]國家藥典委員會.中國藥典[S].二部.北京:化學工業(yè)出版社,2005:附錄ⅩI,ⅩC.

[8]周福富,鄭一美,甘甜,等.玻璃質酸鈉潤膚霜的處方設計探討[J].廣東化工，2009,9(36):45-46.

Optimization of the formulation and technology of Hyaluronic Acid Sodium Cream by orthogonal test

CHU Yang1,CHEN Tao1,2,FENG Wanyu1*
(1.Department of Pharmacy,the First Affiliated Hospital of China Medical University,Liaoning Province,Shenyang 110001,China;2.Department of Pharmacy,Chongqing Ba'nan District Third People＇s Hospital,Chongqing 401338,China)

Objective:To select the prescription technology of Hyaluronic acid sodium Cream.Methods:Tade the appearance of cream,stability,stability constant and the microscope observation as the indexes,used single factor and orthogonal design the optimal prescription.Results:The proportion of olive oil,liquid paraffin,stearic acid is 1 ∶0.8∶1,joined the main medicine in the aqueous phase.Conclusion:The resulting product is soft,delicate,bright,beautiful,painted a good show,infiltrate fast,stable,uniform particles are observed.

Hyaluric acid sodium Cream;Single factor study;Orthogonal design

R943

A

1673-7210（2011）02（c）-057-04

初陽（1980-），女，遼寧沈陽人，碩士學歷，講師，藥劑學專業(yè)。[通訊作者] 馮婉玉（1960-），女，教授，博士。

2010-12-02）