血漿可溶性P選擇素與炎癥因子對糖尿病腎病的影響

苗艷 閻磊 邵鳳民 曹慧霞 朱清

血漿可溶性P選擇素與炎癥因子對糖尿病腎病的影響

苗艷 閻磊 邵鳳民 曹慧霞 朱清

目的探討血漿可溶性P-選擇素(sP-selectin)及炎癥因子對糖尿病腎病的影響。方法138例糖尿病腎病患者根據尿白蛋白排泄率(UAER)分為正常蛋白尿組(DM組)、早期糖尿病腎病組(DN1組)及臨床糖尿病腎病組(DN2組)，收集相關臨床資料并檢測血漿糖化血紅蛋白(HbAlc)、空腹C肽(FCP)、三酰甘油(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、C反應蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)、UAER及sP-selectin。結果糖尿病病程、CRP、IL-6、UAER及sP-selectin在DM、DN1、DN2 3組間依次遞增，且組間差異具有統計學意義(P＜0.05或P＜0.01);FCP的水平在DM、DN1、DN2 3組間依次遞減，組間差異有統計學意義(P＜0.05或P＜0.01);在所有糖尿病患者中sP-selectin與糖尿病病程、LDL-C、CRP、IL-6、UAER呈正相關(r=0.17，P＜0.05;r=0.23，P＜0.05;r=0.39，P＜0.05;r=0.31，P＜0.05;r=0.56，P＜0.05);與FCP呈負相關(r=-0.35，P＜0.05)。多元線性回歸分析結果顯示FCP、IL-6、UAER是sP-selectin的獨立影響因素(P＜0.05)。結論可溶性P-選擇素與CRP、IL-6及LDL-C、FCP等一起參與了糖尿病腎病的發生及發展。

可溶性P-選擇素;炎癥因子;糖尿病腎病

糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病的主要微血管病變，是糖尿病患者致殘、致死的主要原因。P-選擇素(P-selectin)是細胞黏附分子選擇素家族的重要成員，被認為與糖尿病腎病的發生發展明顯相關［1］，但其作用機制仍不十分明確，可能與其介導的細胞黏附、血栓形成及促進炎癥有關。本文通過對糖尿病腎病患者血漿中可溶性P-選擇素(soluble P-selectin，sP-selectin)及炎癥因子的研究了解P-選擇素及炎癥反應對糖尿病腎病的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇符合WHO1999年2型糖尿病診斷標準，于2008年6月至2010年12月在我院內分泌、腎病內科門診和住院的2型糖尿病患者，所有患者血清肌酐(SCr)＜133 μmol/L，腎損害原因不明確者行經皮腎活檢。排除標準:合并其他原發性或繼發性腎臟疾病;進入觀察期前4周內曾合并感染性疾病、自身免疫性疾病、急性冠脈綜合征、嚴重肝功能不全、腦血管意外、惡性腫瘤;進入觀察期前4周內應用抗血小板藥物、非甾體類抗炎藥、激素、免疫抑制劑等。入組患者共138例，根據尿白蛋白排泄率(UAER)分為3組: UAER＜30 mg/24 h為正常白蛋白尿組(DM組)，共45例，其中男21，女24例，平均年齡(56.1±16.8)歲，平均病程(4.8 ±2.4)年;UAER 30～300 mg/24 h為微量白蛋白尿組，即早期糖尿病腎病組(DN1組)共43例，其中男23例，女20例，平均年齡(58.7±16.4)歲，平均病程(6.8±4.7)年;UAER＞300 mg/24為大量白蛋白尿組，即臨床糖尿病腎病組(DN2組)共50例，其中男28例，女22例，平均年齡(61.3±22.1)歲，平均病程(9.6±6.2)年。

1.2 方法

1.2.1 收集患者一般資料如年齡，性別，糖尿病病程等。患者在入組后第2天空腹12 h后抽取靜脈血，分離血清，測定血糖化血紅蛋白(HbAlc)、空腹C肽(FCP)、三酰甘油(TG)、膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDLC);應用免疫透射比濁法測定C反應蛋白(CRP);另收集空腹靜脈血標本2 ml，在4℃以3000r/min離心5 min分離血清，-80℃保存，實驗結束后采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定sP-selectin及白介素6(IL-6);所有患者于采血當天留取24 h尿，混勻后記錄總量，用放免法測定尿白蛋白濃度，并計算UAER。

1.2.2 統計學方法應用SPSS 12.0軟件進行統計學分析，計量資料用均數±標準差(±s)表示;兩組間比較采用兩獨立樣本均數比較的t檢驗;相關性分析采用Spearman相關性分析和多元線性回歸分析;P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料分析(見表1)。

表1 各組患者臨床資料

2.1.1 3組間年齡、性別差異無統計學意義，但糖尿病病程在DM、DN1、DN2 3組間依次延長，且組間差異具有統計學意義(P＜0.01)。

2.1.2 DN2組HbAlc較DN1組升高(P＜0.05)，而其余組間的HbAlc差異無統計學意義。FCP的水平在DM、DN1、DN2 3組間依次遞減，組間差異有統計學意義(P＜0.05或P＜0.01)。

2.1.3 血漿HDL-C在DM與DN1組、DN1與DN2組之間差異有統計學意義(P＜0.05)，而在DM與DN2組間差異無統計學意義;LDL-C在DM與DN2組、DN1與DN2組之間差異有統計學意義(P＜0.01)，而在DM與DN1組間的差異無統計學意義。TG、CH在3組間均差異無統計學意義。

2.1.4 CRP、IL-6、UAER及sP-selectin在DM、DN1、DN2 3組間依次遞增，組間均差異有統計學意義(P＜0.05或P＜0.01)。

2.2 sP-selectin與各指標的相關性分析在所有糖尿病患者中sP-selectin與糖尿病病程、LDL-C、CRP、IL-6、UAER呈正相關(r=0.17，P＜0.05;r=0.23，P＜0.05;r=0.39，P＜0.05;r =0.31，P＜0.05;r=0.56，P＜0.05)，與FCP呈負相關(r=-0.35，P＜0.05)。

2.3 多元線性回歸分析結果以sP-selectin為因變量，患者年齡、糖尿病病程、HbAlc、FCP、TG、TC、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6、UAER為自變量進行多元線性回歸分析，結果顯示FCP、IL-6、UAER是sP-selectin的獨立影響因素(P＜0.05)。

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病的微血管并發癥之一，其發病機制復雜，可能與多種因素如代謝紊亂、血流動力學改變、晚期糖基化終末產物、氧化應激、內皮損傷、細胞因子有關。近年來免疫、炎癥等引起的內皮功能紊亂對糖尿病腎病的影響備受關注，認為其與糖尿病發生、發展密切相關［2］。

P-選擇素為選擇素黏附分子家族中的成員之一，其表達于血小板和內皮細胞上，與中性粒細胞和單核細胞上的配體結合后介導白細胞的黏附、滾動、聚集及活化并釋放炎癥遞質，參與炎癥過程，既是啟動早期炎性反應的重要分子又是維持慢性炎癥狀態的重要因素。P-選擇素有兩種變型:可溶性的P選擇素和膜的P選擇素。可溶性P選擇素是內皮損傷或血小板活化時由部分表達于細胞表面的P選擇素釋放到血液中形成的，可以反映體內血小板活化及內皮損傷程度［3，4］。

已有多種證據表明在原發及繼發性腎小球疾病中，P-選擇素在腎小球系膜區、內皮細胞及小管上皮細胞高表達，參與了腎小球及腎小管間質的炎癥反應［5-7］。研究表明，P-選擇素與糖尿病微血管病變尤其是DN發生發展密切相關。Hirata等［8］用免疫組化方法對DN患者腎活檢組織中P-選擇素進行檢測，與其他腎小球疾病比較發現，P-選擇素在DN患者腎組織的表達程度要顯著高于正常對照組和其他腎小球疾病組; Omoto等［9］發現DN患者血液中可溶性P-選擇素水平顯著高于無并發癥組與健康對照組。本研究中亦發現可溶性P-選擇素水平與糖尿病病程及尿微量白蛋白率呈正相關，且尿微量白蛋白率是影響可溶性P-選擇素水平的獨立影響因素，這與上述的研究結果一致，即P-選擇素的持續表達可能與DN進展有關。

此外，晚近研究揭示DN的發病在代謝紊亂與血流動力學機制基礎上，炎癥機制是其持續發展的關鍵因素［10，11］。本研究證實可溶性P-選擇素與炎癥因子CRP、IL-6呈正相關，IL-6也是影響可溶性P-選擇素水平的獨立影響因素，進一步證實在體內高糖環境下P-選擇素參與慢性微炎癥狀態的持續發展，是DN進展不可忽略的因素。

本研究還發現，可溶性P-選擇素水平與LDL-C水平呈正相關，這就提示我們高水平的LDL-C可以導致內皮損傷，從而加重糖尿病腎損害。其機制可能與脂質過氧化加重氧化應激反應有關［12］。

在本研究中FCP與可溶性P-選擇素水平有著負相關性且為其獨立影響因素，這在以前的研究中尚未見報道。生理濃度的C肽在動物實驗和臨床研究中發現具有糖尿病微血管保護作用，如降低腎小球高濾過、減少尿蛋白、抑制腎小球系膜基質的增加延緩腎臟損害［13，14］;降低視網膜毛細血管通透性，延緩糖尿病視網膜病變進展等［15］。本研究結果提示C肽可能是通過對血管內皮的保護而發揮微血管保護作用的，隨著糖尿病病程的延長及胰島功能的衰竭導致C肽的減少可能是糖尿病腎損害的原因之一。

綜上所述，本研究證實了P-選擇素與炎癥因子CRP、IL-6及LDL-C、FCP等一起參與了糖尿病腎病的發生及發展，彼此之間相互影響、相互加重。為延緩糖尿病腎病進展中的抗炎、降脂及抗黏附治療提供了一定的理論依據。

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The effects of serum soluble P-selectin and inflammatory factors in patients with diabetic nephropathy

MIAO Yan，YAN Lei，SHAO Feng-min，et al．Department of Rheumatism and Nephrology，Henan Provincial People's Hospital，Zhengzhou 450003，China

ObjectiveTo investigate the effect of serum sP-select and inflammatory factors in patients with diabetic nephropathy(DN).Methods138 diabetic nephropathy patients were divided into three groups according to their urinary albumin excretion rate(UAER):normal albuminuria group(DM)，incipient DN group (DN1)and overt DN group(DN2).The relationship of clinical data was analyzed.All patients were tested for HbAlc，FCP，TG，TC，HDL-C，LDL-C，CRP，IL-6，UAER and sP-selectin.ResultsThe duration of diabetes and the level of serum CRP，IL-6，UAER，sP-selectin were more and more higher in group DM、DN1 and DN2(P＜0.05或P＜0.01)，the level of serum FCP were more and more lower in group DM、DN1 and DN2(P＜0.05或P＜0.01).The level of serum sP-selectin in all patients with diabetic nephropathy showed positive correlation with the duration of diabetes and the level of LDL-C，CRP，IL-6，UAER(r=0.17，P＜0.05;r=0.23，P＜0.05; r=0.39，P＜0.05;r=0.31，P＜0.05;r=0.56，P＜0.05)，but showed negative correlation with the level of FCP(r=-0.35，P＜0.05).The multivariate linear regression analysis showed that the level of FCP，IL-6 and UAER seemed independent risk factors for sP-selectin(P＜0.05)．ConclusionP-selectin maybe involved in the pathogenesis of diabetic nephropathy with CRP、IL-6、LDL-C and FCP．

Soluble P-selectin;lnflammatory factors;Diabetic nephropathy

450003河南省鄭州人民醫院腎病風濕免疫科

邵鳳民Email:fengminshao@medmail.com.cn