復方前列安顆粒的質量標準分析

陳毅華，楊志華

1.廣東省汕頭市中醫醫院，廣東汕頭515041；2.廣東省汕頭市皮膚性病防治院，廣東汕頭 515041

復方前列安顆粒制劑是汕頭市中醫醫院制劑室自制藥品，已取得汕頭市臨床科研用藥（試用）項目，批準文號為粵Z20080089。該產品由赤芍、淫羊霍、澤瀉、延胡索、制乳香、王不留行等藥味組成，具有活血化瘀、理氣通絡之功效，適用于氣滯血瘀型的前列腺炎、前列腺增生等病癥。其顆粒采用醇提和傳統的水提工藝相結合，再經過濃縮、干燥、一步制粒等現代先進技術制備而成，為了控制復方前列安顆粒的質量，本文參照文獻[1-4]一方面采用薄層色譜法對該制劑中的淫羊霍、澤瀉、延胡索藥材進行了定性鑒別分析；另一方面采用高效液相色譜法進一步測定制劑中的主要成分之一芍藥苷的含量，為控制復方前列安顆粒的藥品內在質量提供有效的保證。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

薄層鋪板器；定量毛細血管；瑞士CAMAG Reprostar薄層成像系統；色譜柱：Kromasil KR100-5 C18ODS柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；SPD-6A 型檢測器（日本島津），P-2000 泵；BP211D電子天平；2170AA數據處理軟件系統。硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）；LC-10AVP高效液相色譜儀（日本島津）。

1.2 試劑

甲醇為進口色譜純，水為重蒸餾水，其他試劑均為分析純。

1.3 試藥

芍藥苷、延胡索、淫羊霍對照品，澤瀉對照藥材均購于中國藥品生物制品檢定所。復方前列安顆粒（20100422、20100425、20100508、20100512）由汕頭市中醫醫院制劑室自制，所用藥材均為生產用同批號藥材。

2 方法與結果

2.1 定性鑒別

2.1.1 淫羊霍的薄層色譜鑒別 取本品粉末6 g，加醋酸乙酯50 ml，提取3次，合并醋酸乙酯，用水20 ml洗2次，醋酸乙酯提取液蒸干，殘渣加甲醇2 ml使溶解，即得供試品溶液。精密稱取淫羊霍對照品適量，加甲醇制成1 mg/ml的溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述溶液各10 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲醇-水（10∶1∶1∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（254 nm）下檢視。供試品在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的熒光斑點，陰性無干擾（見圖1）。

2.1.2 澤瀉的鑒別 取本品粉末5 g，置錐形瓶中，加甲醇50 ml，超聲處理30 min，過濾，濾液蒸干，殘渣加水10 ml溶解，以乙酸乙酯提取3次(20、15、15 ml)合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇5 ml使溶解，作為供試品溶液。另取澤瀉對照藥材2 g，加甲醇5 ml，按照供試品溶液制備方法制得對照藥材溶液。同樣按處方比例，取缺澤瀉的其他各味藥，按制備工藝加工制成陰性樣品，按供試品制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄)試驗，吸取上述溶液各8 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10∶2∶0.7)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以 10%硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同紫紅色的斑點，陰性無干擾（見圖 2）。

2.1.3 延胡索的薄層色譜鑒別 取本品粉末5 g，加甲醇20 ml，熱溶解，超聲處理30 min，過濾，濾液蒸干，殘渣加水5 ml使溶解，加氨試液0.5 ml，調pH值至7.0，加乙醇提取3次，每次5 ml，提取液合并，蒸干，加甲醇2 ml溶解，作為供試品溶液。另取延胡索乙素對照品適量，加甲醇溶解，制成1 mg/ml的溶液，作為對照品溶液。再按處方取不含延胡索的其他藥材，按本品制備工藝和上述供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法試驗，分別吸取供試品溶液、對照品溶液、陰性對照溶液各10 μl，分別點于用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以正己烷-氯仿-甲酸(7.5∶4∶1)為展開劑，展距15 cm，取出，晾干，以碘蒸氣薰至斑點顯色清晰，揮盡碘后(10 min)，置紫外燈(365 mm)下檢視，在Rf為0.3處，供試品色譜與對照品色譜顯一相同黃棕色熒光斑點，陰性對照品無此斑點（見圖3）。

2.2 芍藥苷的含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱：Kromasil KR100-5 C18ODS柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：0.01%磷酸水-乙腈（83∶17）；檢測波長：230 nm；柱溫：室溫；流速：1.0 ml/min[1,3]。

2.2.2 溶液的制備 取本品2.5 g，研細，加乙醇20 ml，振搖，超聲波提取10 min，過濾，濾液蒸干，殘渣加乙醇1 ml溶解，即得供試品溶液。另取芍藥苷對照品精密稱定，加乙醇制成每1 ml含芍藥苷0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。再按處方自配不含赤芍的群藥，依法制成陰性對照溶液。

2.2.3 標準曲線繪制 精取芍藥苷對照品（0.5 mg/ml）2、4、6、8、10 μl注入液相色譜儀，以峰面積 Y 對進樣量 X（μg）進行回歸處理。回歸方程：Y=10 570.95X-836.40，r=0.999 4。結果表明芍藥苷的進樣量在1.704～8.520 μg范圍內與其峰面積呈良好線性關系。

2.2.4 精密度試驗 精取一定量的上述芍藥苷對照品溶液，按上述色譜條件，重復進樣5次，求得RSD為0.14%(n=5)，儀器精密度良好。

2.2.5 重現性試驗 精取同一批號樣品溶液5份，按樣品含量測定項下的方法操作測定。結果RSD為4.03%（n=5），試驗重現性良好。

2.2.6 穩定性試驗 精取同一樣品溶液，在不同時間連續進樣5次，RSD為1.93%，儀器穩定性良好。

2.2.7回收率試驗 采用加樣回收法測定回收率，取已知含量的樣品精密稱重，分別加入芍藥苷對照品適量。依樣品溶液項下方法操作測定，平均回收率為97.45%，RSD為1.78%，結果見表1。

表1 芍藥苷的回收率試驗（n=6）

2.2.8 樣品測定 取供試品進樣，按上述色譜條件測定，測定結果見表2。

表2 供試品中芍藥苷的含量測定結果

3 討論

復方前列安顆粒中淫羊霍與澤瀉的定性鑒別采用TCL法，并分別與各自的陰性對照液進行了對照試驗，結果沒有干擾，斑點明顯，專屬性好，收到良好效果。

延胡索薄層色譜鑒別中使用碘薰后，延胡索乙素氧化成更具熒光的氧化物，經試驗發現驅趕碘的時間須在5 min以上，否則斑點上仍有棕色碘覆蓋，在紫外燈下顯黑色暗斑，故定為10 min。

芍藥苷作為本制劑的主要成分之一，本文根據《中國藥典》2010版一部中赤芍藥材項下的含量測定方法，采用HPLC對該成分的含量進行測定，對復方前列安顆粒的內在質量控制有重要意義。結果顯示該方法適宜于本制劑中芍藥苷的含量測定，色譜峰分離度高、峰型好，且陰性無干擾[5-7]。

在本實驗檢測過程中，對不同批號的制劑樣品的含量進行比較，發現含量相差較大，這可能與所用原藥材不是同一批號有關，因此，控制原藥材質量與確保制劑的質量關系非常密切。

本文測定方法經各項實驗考察，結果表明該方法簡便快捷，結果精確，重現性好，可作為復方前列安顆粒制劑的質量控制標準。

[1]國家藥典委員會.中國藥典[S].一部.北京：中國醫藥科技出版社,2010.

[2]康廷國.中成藥薄層色譜鑒別[M].北京：人民衛生出版社,1995：145.

[3]陳發奎.常用中草藥有效成分含量測定[M].北京：人民衛生出版社,1997：123.

[4]魏璐雪.中藥制劑分析[M].上海：上?？茖W技術出版社,2003：311.

[5]苗明三,李振國.現代實用中藥質量控制技術[M].北京：人民衛生出版社,2003.

[6]應海燕,沈國興.前列安顆粒的質量標準研究[J].江西中醫藥,2009,45(5)：156-157.

[7]沈國興,應海燕;前列安顆粒的質量標準研究[J].海峽藥學;2009;21(6)：75-77.