趙 斌,龍 璇,楊 昱,任志午,彭 江*,王 玉,
張 莉1,許文靜1,趙 喆1,詹勝鋒1,盧世璧1,趙 慶1
(1中國人民解放軍總醫院,北京100853;2貴陽醫學院附屬醫院;3襄陽市第一人民醫院)
2008年10月~2010年10月,我們從解剖學和組織學方面對鼠、兔、犬、人的顱外段面神經主干及各分支的結構進行對比研究,分別對其神經直徑、神經分束、軸突直徑、髓鞘厚度統計分析,深入研究面神經解剖結構,為面神經損傷后各分支修復效果提供評價依據,且總結出“一干多支”周圍神經的特點,率先提出“一干多支”周圍神經概念,為臨床中復雜部位“一干多支”周圍神經損傷的修復提供良好的理論依據。
1.1 主要實驗設備 愛德華牌TSJ-1A型自動組織脫水機(天津天利航空機電公司),BMJ-1型組織包埋機(天津天利航空機電公司),Leitz 1516型組織切片機(德國Leica公司),BH-2 OLYMPUS生物顯微鏡(日本OLYMPUS公司),實驗所需豬、犬、大鼠由解放軍總醫院動物中心提供。
1.2 神經標本制備 麻醉后,在外科顯微鏡下,從耳下,沿下頜骨做弧形切口,剝離腮腺組織,分離出顱外段面神經主干及5個分支(顳支、顴支、頰支、下頜緣支、頸支),近端切斷面神經主干,遠端切斷各個分支,即可得全面神經:大鼠約10 mm,新西蘭白兔約20 mm,犬約20 mm,人約20 mm。左右兩邊均取,各取20根全面神經。
1.3 神經直徑測量 將取得的全面神經標本置于帶標尺的顯微鏡下,測量每種動物(人)面神經主干及5個分支中點的外徑。
1.4 組織學染色 分別將各組20根全面神經主干的近端及5個分支的遠端處,各取一段2 mm長神經標本,分別行石蠟切片HE染色、半薄切片甲苯胺藍染色、超薄切片透射電鏡觀察,運用圖像分析軟件Image.pro.plus.5.0,分別記錄各種屬面神經主干及各分支的神經直徑、神經分束、軸突直徑、髓鞘厚度等結構特點。
1.5 統計學方法 應用SPSS17.0軟件進行統計學處理。計量資料以±s表示,組間差異采用單因素方差分析(One-Way ANOVA),以P≤0.05為有統計學差異。
2.1 顱外段面神經的行徑 面神經出莖乳孔后根據其行程分為腮腺前段、腮腺內段和腮腺后段。4種屬主干均為1根,在進入腮腺前發出耳后神經、二腹肌神經、莖突舌骨肌支,分別支配耳后及枕肌、二腹肌后腹和莖突舌骨肌。腮腺內段是面神經穿經腮腺實質的一段,從腮腺的后內側進入腮腺頰部實質,行于腺小葉間的疏松結締組織中,繼續向前行徑,發出5組放射狀分支,分布于頜面部5個區域的表情肌,而得名顳支、顴支、頰支、下頜緣支和頸支。
2.2 顱外段面神經的組織學結構
2.2.1 面神經各分支直徑 將取得的全面神經標本置于帶標尺的顯微鏡下,測量各種屬面神經主干及5個分支中點的外徑,測得鼠<兔<人<犬,見表1。
2.2.2 面神經各分支軸突直徑、髓鞘厚度 透射電鏡下觀察神經超微結構,可見各種屬面神經內髓鞘結構致密,形態規則,厚薄一致,包繞的軸突直徑大小相近。測量面神經主干及5個分支軸突直徑,鼠<兔<犬<人,見表2;髓鞘厚度,鼠<兔<犬<人,見表3。
表1 不同種屬面神經直徑比較(mm,±s)

表1 不同種屬面神經直徑比較(mm,±s)
注:同一分支,與鼠比較,*P<0.05;與兔比較,△P<0.05;與犬比較,▲P<0.05
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表2 不同種屬面神經各支軸突直徑比較(μm,±s)

表2 不同種屬面神經各支軸突直徑比較(μm,±s)
注:同一分支,與鼠比較,*P<0.05;與兔比較,△P<0.05;與犬比較,▲P<0.05
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表3 不同種屬面神經各支髓鞘厚度比較(μm,±s)

表3 不同種屬面神經各支髓鞘厚度比較(μm,±s)
注:同一分支,與鼠比較,*P<0.05;與兔比較,△P<0.05;與犬比較,▲P<0.05
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2.2.3 面神經各分支神經分束計數 鼠2~4束,兔2~6束,人5~9束,而犬的面神經主干及5個分支內均只有1束。束膜間質在整根神經中所占的比例,鼠85.23%±8.98%,兔66.64%±7.55%,犬84.56%±2.24%,人71.59%±6.31%。
周圍神經損傷修復的研究已有數百年的歷史,自體神經、同種異體神經、異種神經、骨骼肌等生物材料以及新興的組織工程神經等的研究,大量動物實驗獲得了成功[1~3],臨床應用也取得較好的恢復效果[4~6]。但這些研究僅局限于單根單支的周圍神經,對于特殊部位具有特殊結構的周圍神經,如面神經的“一主干五分支”結構,國內外的相關研究也只限于面神經頰支和下頜緣支這兩個主要分支,即便是對面神經的這種結構有所研究,也只是比較了大鼠和兔這兩種小型動物的面神經解剖結構的差異[7~11],并未對這種特殊結構進行深入分析。
本研究分別選取嚙齒類動物大鼠、小型哺乳動物兔、大型哺乳動物犬及人的面神經,分別對其神經直徑、神經分束、軸突直徑、髓鞘厚度等解剖學和組織學結構進行對比研究,測量結果顯示,面神經直徑鼠<兔<人<犬;軸突直徑,鼠<兔<犬<人;髓鞘厚度,鼠<兔<犬<人。經過統計學分析發現,不同種屬軸突直徑和髓鞘厚在主干和各分支內差別不大。對于人類而言,面神經主干及5個分支的直徑較細,而軸突直徑及髓鞘厚度均大于其他動物,為將來對人類面部表情肌的細致研究以及為各種動物面神經再生的恢復程度提供了一個量化的標準。
本研究發現,在大鼠、兔和人的面神經主干及5個分支內,存在多束“圓形”束膜結構,分散排列于神經內部,而犬的面神經主干和5個分支內均只有1束束膜結構,整根神經橫截面形成“同心圓”結構。
神經完全離斷后端端吻合是公認的最有效的修復方法,包括外膜縫合、束膜縫合、束—外膜聯合縫合。外膜縫合法易出現神經束組、纖維對位不佳,發生纖維受扭曲、擠壓、折疊、旋轉等移位,影響按一定規律排列的感覺和運動纖維的走向。對于鼠、兔、人等種屬的神經使用束膜縫合法,需解剖出各神經束,力求對神經功能束的準確對位,效果好,但外膜受損大,縫合費時、難度大、技術要求高[12]。而犬的面神經主干和5個分支中均只有1束神經束,若行外膜吻合,對位自然良好;若行束膜吻合,剝離的外膜也不多,技術要求大大減低。
本研究提出的“一干多支”周圍神經結構,對于周圍神經的顯微外科修復又提出了更高的要求,在以后的周圍神經修復中,對于“一干多支”周圍神經缺損,其供體要求不再是解剖結構上的“一主干多分支”,更重要的是符合“一干多支”周圍神經的內在組織學特征,了解神經干內的精細結構,清楚神經纖維的數量比例,從而有效地提高周圍神經損傷的修復效率。
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