胡建廷,英 永,王韶艷,王鳳乾,王汝霞
(1.山東省醫藥工業研究所,山東省化學藥物重點實驗室;2.山東省醫學科學院,山東濟南 250033)
本文探討了比格犬垂體囊腫的發生情況,為比格犬的飼養繁殖管理、提高實驗動物質量和醫藥科學研究提供重要背景資料。
1.1 實驗動物與飼養條件
Beagle犬60只,年齡為8~10月齡,雌雄各半,體重6~8 kg,均為1年內藥物安全性評價實驗對照犬,由廣州市醫藥工業研究所提供[合格證號:SCXK(粵)2008-0007]。所有犬只均注射過犬瘟熱、傳染性肝炎和狂犬病疫苗,血清布氏桿菌檢查、糞便沙門氏菌和寄生蟲卵檢查都正常,也未有疾病的臨床癥狀。
動物置不銹鋼犬籠(0.7×0.9×0.8)m中單籠飼養。室溫(19~26)℃,濕度(40~70)%。換氣次數8~10次/h,晝夜明暗交替時間12 h/12 h。實驗動物使用許可證號:SYXK(魯)20100004]。每天上午7時,下午4時定量給予全價飼料,自由飲水。每天清潔用具、籠具和地板,每周清潔消毒全部設施1次。
1.2 方法
1.2.1 動物剖檢:剖檢前16 h,所有動物禁食不禁水,經巴比妥鈉麻醉,頸動脈放血處死。垂體取材后置10%中性甲醛液中固定。
1.2.2 切片、染色及顯微鏡檢查:對垂體組織進行常規脫水、包埋、切片,根據說明書步驟分別進行HE染色和PAS染色,在光學顯微鏡下進行組織病理學檢查。
1.2.3 數據處理:實驗數據采用SPSS 13.0統計軟件進行統計處理。兩樣本率的比較采用t檢驗。P<0.05作為差異顯著性界值。
2.1 垂體囊腫的組織形態學特點
鏡下,可見垂體由遠側部、中間部和神經部三部分組成,而囊腫多出現在垂體的遠側部。囊腔一個或多個,大小不等,形態不一。囊壁由一層扁平或立方狀上皮構成,部分上皮的游離緣可見微絨毛。在上皮之間可見黏液細胞,其胞漿中含有較多灰藍色黏液。囊腔內含著色不均的淡灰色黏液狀物,PAS染色呈陽性。黏液狀物有的呈輪狀,在輪層狀的結構間有黏液溶解而形成的腔隙。有的部位周邊黏液呈灰藍色均質狀,中央部較黏稠,呈塊狀并有溶解性空腔(圖1~4見彩插3)。
2.2 垂體囊腫的發生率
肉眼觀察,所有實驗動物的垂體均未見囊性病變;顯微鏡檢查,在所有標本中,共檢出14例垂體囊腫,總體發生率為23.3%。其中雌性檢出4例,發生率為13.3%,雄性檢出10例,發生率為33.3%。對雌雄動物囊腫發生率進行比較,差異具有統計學意義(P<0.05)。
3.1 垂體囊腫的發生和組織病理學特點
垂體囊腫是犬的一種先天性疾病,一般發生于歲左右的幼齡犬[1]。本病主要發生于德國牧羊犬等較大型的犬種,而在Beagle犬等中小型犬中較少發生,國內外也少有報道。
一般認為垂體囊腫來源于垂體殘留胎生組織的Rathke's囊或殘留的顱咽管。由于垂體囊腫多數為Rathke's囊殘留,所以稱為Rathke's囊腫。其多發于垂體前葉或前葉與中葉之間,多見于大鼠、小鼠、犬等動物[2,3]。垂體囊腫除了來源于殘留胎生組織的Rathke's囊外,還可見于顱咽管的殘留,也有的來源于濾泡星狀細胞。囊腫的囊壁由纖毛立方至圓柱狀上皮及扁平上皮覆蓋,上皮細胞間有時含有黏液細胞。囊壁黏液細胞具有分泌及吸收功能[4],黏液細胞分泌的黏液進入囊腔并不斷增多。黏液經吸收、濃縮,繼而再分泌,如此反復,囊腔內便形成了輪狀的不被吸收的團塊,并在輪狀的結構間形成腔隙,使囊腔不斷擴張。囊腔內黏液狀物PAS染色呈陽性。
3.2 垂體囊腫的發生率及診斷
研究結果表明,8~10月齡Beagle犬垂體囊腫的病變發生率較高,其總體發生率為23.3%。其中雌性為13.3%,雄性為33.3%,且性別間存在著顯著性差異,提示囊腫的發生率可能與性別相關。對于垂體囊腫的診斷,可依據其組織病理學特點來進行。必要時,可進行PAS染色以明確診斷。
綜上所述,在藥物安全性評價工作中,應加強實驗動物自發性病變的監測,了解常見病變的特征和發生規律,以減少或避免自發性病變對研究結果的干擾。
[1]Koosttra HS,Voorhour G,Mol J A,et al.Combined pituitary hormone deficiency in German shepherd dogs with dwarfism[J].Dom Anim Endocrinol,2000,19(3):177-190.
[2]CHARLES C,CAPEN.Overview of structural and functional lesions in endocrine organs of animals[J].Toxicol Pathol,2001,29(1):8-33.
[3]今井清,任進.圖解毒性病理學[M].昆明:云南科技出版社.2006:263.
[4]潘耀謙,高豐,夏志平,等.犬腦垂體囊腫的病理形態學觀察[J].動物醫學進展,2002,23(1):54-56.