正交試驗法優選止痛散中總揮發油提取工藝的研究

劉鏡聯 劉佳舉 林鳳梅 蔣永和 覃文紅

廣東省廣州市東升醫院，廣東 廣州 510140

止痛散是廣州市東升醫院經廣東省食品藥品監督管理局批準的醫院制劑 (批準文號:粵Z20070660)，它由乳香、沒藥、沉香、木香、黃連、胡黃連等多味中藥加工而成，是我院名老中醫經多年治療驗證，反復運用而得;具有活血化瘀、行氣止痛之功效，臨床上外用于氣滯血瘀所致之痛證。本文采用正交實驗法優選止痛散中揮發油的最佳提取工藝，為規范制劑質量標準提供科學依據。

1 材料與儀器

乳香、沒藥、沉香等藥均購于廣東省藥材公司中藥飲片廠;蒸餾水(自制);PTHW型電熱套，鞏義市英峽予華儀器廠;FA2004型電子分析天平，上海恒平科學儀器有限公司;揮發油提取器(上海玻璃儀器廠)。

2 實驗方法與結果

2.1 正交試驗設計 參考有關文獻［1，2］和大量預實驗，以總揮發油得率和為考察指標，采用正交試驗方法對提取工藝參數影響較大的3個因素:加水量 (A)、浸泡時間(B)、蒸餾時間劑用量 (C)3個因素進行考察。用L9(34)正交表安排試驗。因素水平見表1。

表1 正交試驗因素水平

2.2 樣品的制備 稱取9份干燥的處方藥材粗粉 (20目)，每份100.00g，置圓底燒瓶中，加水，照《中國藥典》2010年版一部附錄XD揮發油測定甲法［3］。按照正交設計表用L9(34)各工藝參數提取揮發油，測得總揮發油得率，見表2。

表2 正交試驗設計結果

2.3 方差分析 將正交試驗結果進行方差分析，結果見表3。

以揮發油總量為考察指標，由表2中極差R值大小顯示，RC＞RB＞R A，各因素作用主次依次為C、B、A;由表3中方差分析結果表明B(浸泡時間)及C(蒸餾時間)兩因素的影響具有顯著性意義，以B3C3為最佳，A(加水體積)因素影響無顯著性意義，故選擇A2B3C3為最佳工藝，即藥材加水5倍量、浸泡2小時、蒸餾5小時。

2.4 驗證試驗 為了進一步驗證正交實驗優選出的最佳提取組A2B3C3方案的可行性，按照2.2重新做了3組平行實驗，結果見表4，測得平均總揮發油率為0.63。結果表明，提取工藝穩定可行。

表3 正交試驗方差分析結果

表4 驗證試驗結果

3 討論

考慮到本方劑中多味藥均含揮發油成分，作者曾對方中具芳香性的單味藥分類單獨提取與合并提取的揮發油比較，發現兩者的得油率相近，且化學成分均未發生變化，由此綜合考慮提取總揮發油。本試驗最佳提取工藝是藥材加水5倍量、浸泡2小時、蒸餾5小時;由驗證性試驗測得平均總揮發油率高達0.63%，RSD%為0.01;因此該提取工藝可行、效率高。

［1］沈紅，狄留慶，徐俊福，等.乳香、沒藥提取工藝可行性研究［J］.南京中醫藥大學學報，2003，19(5):292－293.

［2］李麗，周軍，張瑩，等.多指標綜合評分法優化痛風寧顆粒提取工藝［J］.中成藥，2007，29(2):281－283.

［3］國家藥典委員會.中國藥典 (一部) ［S］.北京:化學工業出版社，2010:附錄63.