徐慶 顧國平 張立紅
(江蘇省無錫市中醫醫院檢驗科 江蘇無錫 214001)
膽囊結石患者膽道幽門螺桿菌的檢測探析
徐慶 顧國平 張立紅
(江蘇省無錫市中醫醫院檢驗科 江蘇無錫 214001)
目的 探討膽道幽門螺桿菌是否形成膽囊結石的重要因素。方法 在我院選取2008年6月至2010年8月的膽結石患者50例作為實驗組,另外選取非膽結石患者35例作為對照組,并采用酶聯免疫吸附試驗以及免疫組織化學技術對實驗組與對照組的結石、膽囊黏膜中的幽門螺桿菌以及結石進行檢測。結果 實驗組中膽汁與結石幽門螺桿菌的陽性率明顯高于膽囊黏膜的陽性率,具有明顯差異。結論 單純的幽門螺桿菌并不能促成膽囊結石的形成,但是不能排除它是形成膽囊結石的因素之一。
膽囊膽石 膽道 幽門螺桿菌
膽結石在我國是一個高發率的疾病,而且也會導致其他的疾病。它是引起重癥膽道感染最終產生膽道腫瘤的首要原因。因此預防以及治療膽道結石就具有很重要的迫切性。我們需要加深對膽結石形成機制的探索,從而能夠更好的對膽結石進行研究。本研究就這方面進行了研究,取得了較好的效果,報道如下。
在我院選取2008年6月至2010年8月的膽結石患者50例作為實驗組,男性26例,女性24例,年齡27~81歲,平均年齡51歲。所有被試都因患有慢性膽囊炎或膽囊結石進行了腹腔鏡膽囊切除手術。另外選取非膽結石患者35例作為對照組,男性12例,女性13例。年齡26~82歲,平均年齡50歲。所有被試因非膽結石病進行過膽囊切除術。實驗組患者在手術前3d沒有服用抗生素。膽囊組織采用中性的福爾馬林固定。其膽汁和結石標本也在無菌條件下利用無菌注射器進行采集,置于冰箱內保存。
采用酶聯免疫吸附試驗以及免疫組織化學技術對實驗組與對照組的結石、膽囊黏膜中的幽門螺桿菌以及結石進行檢測。
2.2.1 膽汁、結石檢測步驟 刮取被試結石表面與中心成分大約6kg,碾碎并且加入5mL的生理鹽水,抽取其中的2mL放入PV管中。膽汁的標本在常溫下融化,再抽取其中的1mL放進PV管,加入1mL的生理鹽水。將其在混合器進行搖勻混合,再采取以下步驟: (1)把PV管放入4℃的離心機中,12000轉,10min離心,4℃保存,等待檢測;(2)拿出酶標版,按照順序依次加入100uL陽性、100uL陰性對照液以及100uL待測樣品,并對標本進行編號;(3)在對照液與樣品液中都假如50uL的酶標溶液,進行徹底搖勻混合;(4)在恒溫箱中孵育1h;(5)進行6洗滌,每次洗滌之間間隔15s;(6)每孔加入A、B液各50uL;(7)在恒溫下孵育15min;(8)每孔加進50uL終止液,終止其反應。
2.2.2 膽汁、結石檢測標準 30min后在酶標儀上讀取數值。臨界值:陰性值×150%+0.06;樣品值大于臨界值則為陽性,小于臨界值則為陰性。
利用PV9000免疫組化對膽囊黏膜中的幽門螺桿菌進行檢測。

表1 實驗組膽汁、結石與膽囊黏膜的幽門螺桿菌檢測結果
SPSS 13.0對數據進行處理,采用卡方檢驗,P<0.05則差異顯著。
實驗組結石、膽汁以及膽囊黏膜的幽門螺桿菌檢測結果。在實驗組中,50例膽囊黏膜中有11例幽門螺桿菌檢測呈陽性,36例膽汁標本中有22例成陽性,42例結石標本中有30例成陽性。膽汁與結石的幽門螺桿菌的陽性率明顯高于膽囊黏膜組的,差異顯著,(表1)。
在對照組中,35例膽囊黏膜中有10例幽門螺桿菌檢測呈陽性, 26例膽汁標本中有15例呈陽性,膽汁的幽門螺桿菌的陽性率明顯高于膽囊黏膜組的,差異顯著。
幽門螺桿菌呈S形或者是螺旋狀,其中主要的毒性因子具有粘附素、粘液酶、尿素酶等等。幽門螺桿菌的感染成遍及式分布。不同國家,不同地區它的感染力都存在著明顯的差異。隨著年齡的增長,感染還會出現明顯的家族聚集性。從研究中可以發現對照組也就是非膽結石患者于膽結石患者的膽囊黏膜與膽汁的陽性率之間并沒有顯著差異。但是也不能因此而妄下結論認為幽門螺桿菌對于膽結石的形成沒有相關性。它可能會有以下可能性:(1)幽門螺桿菌成為致病菌可能需要一定的條件,也就是說可能需要一定的條件才會導致膽結石的形成;(2)可能與油門螺桿菌的毒性有關,雖然有感染可是并不一定會引起發病;(3)幽門螺桿菌可能是形成膽結石的因素之一,通過與其他因素的共同作用最最終才會導致膽結石的形成。
不管怎樣,目前對于膽道系統螺桿菌的檢測還處于初級階段,檢測結果還有很大的差異,對于螺桿菌與膽結石形成之間的相關性還沒有完全確定。所以,隨著關于這方面研究的不斷深入,螺桿菌與膽結石的形成、惡化之間的關系會日益明朗化。
[1]董秀山.膽囊結石患者膽道幽門螺桿菌的檢測及意義[D].山西醫科大學第一臨床醫學院,2007.
[2]韓天權.關于膽固醇結石成因機制及預防的研究動態[J].外科理論與實踐,2010,6(3).
[3]陳東分.幽門螺桿菌對體外原代培養的人膽囊上皮細胞損傷作用[J].世界華人消化雜志,2004,12(8).
[4]朱雷明,蔡瑞.膽固醇結石病人與非膽結石癥人群膽道細菌感染狀況與免疫球蛋白相關性的對照研究[J].中華肝膽外科雜志,2003,9(7).
R7
A
1674-0742(2011)09(a)-0168-01
2011-08-13