龍膽蒼耳合劑的制備及薄層色譜鑒別

歐明洪 ，陳向東 ，王 育 ，袁 林

(1.四川省達州市中心醫院，四川 達州 635000; 2.四川省達州市食品藥品檢驗所，四川 達州 635000)

龍膽蒼耳合劑由龍膽草、川芎、黃芩、薄荷、蒼耳子等中藥制成，具有清熱通竅、祛風止痛的功效，臨床用于治療急慢性鼻炎、副鼻竇炎或感冒引起的頭痛、鼻塞不通、流黃稠涕等癥，經我院多年臨床應用，療效確切，治療費用低，深受患者歡迎。為保證龍膽蒼耳合劑安全、有效，質量穩定、可控，筆者對其制備工藝及處方中龍膽草等藥材的薄層色譜鑒別進行了研究，現報道如下。

1 儀器與試藥

硅膠GF254薄層板、硅膠G薄層板(天津思利達色譜技術開發公司);醫用超聲波儀(上海冠特超聲儀器有限公司);Sartorius電子天平(賽多利斯科學儀器有限公司);玻璃點樣毛細管。對照品、對照藥材均購于中國藥品生物制品檢定所，龍膽苦苷(批號為110770－200207)、黃芩苷(批號為110715－200805)供含量測定用，川芎(批號為120918－200608)、薄荷腦(批號為110728－200506)供鑒別用;龍膽蒼耳合劑(醫院制劑室自制，批號分別為091217，100112，100210);水為蒸餾水，試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 處方與制備

處方:辛荑 60 g，蒼耳子 60 g，白芷 60 g，柴胡 60 g，薄荷 60 g，龍膽草 60 g，桔梗 60 g，荊芥 100 g，茯苓 100 g，川芎 100 g，梔子 60 g，黃芩60 g，木通60 g，加水制成1 000 mL。

制備:以上13味，辛荑、白芷、薄荷、荊芥、川芎、柴胡加水蒸餾提取芳香水，收集芳香水80 mL，藥渣與其余蒼耳子等7味加水煎煮2次，每次1 h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20(70～80℃)的清膏，加乙醇使含醇量達56%，攪勻，靜置過夜，濾過，濾液回收乙醇，趁熱加入羥苯乙酯0.5 g、苯甲酸0.5 g，攪勻，放冷，加入上述芳香水，混勻，加純化水至1 000 mL，攪勻，即得。

2.2 質量控制

2.2.1 性狀

本品為深棕黃色至深棕褐色液體;氣芳香，味苦。

2.2.2 薄層色譜鑒別

龍膽草:取本品20 mL，蒸干，殘渣加甲醇10 mL，攪拌使溶解，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取龍膽苦苷對照品，加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液，作為對照品溶液。取不含龍膽草的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備，即得陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版《中國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯－甲醇－水(20∶2∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254 nm)下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相對應位置上顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照品溶液無干擾(圖1 A)。

川芎:取本品30 mL，用三氯甲烷振搖提取2次，每次30 mL，合并三氯甲烷提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對照藥材0.5 g，加三氯甲烷20 mL，浸漬20 min，時時振搖，濾過。濾液蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為對照藥材溶液。取不含川芎的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備，即得陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版《中國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(60～90℃)－乙酸乙酯(9∶1)的溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的熒光主斑點，陰性對照品溶液無干擾(圖1 B)。

黃芩:取本品30 mL，加稀鹽酸調pH至2，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1 mL含2 mg的溶液，作為對照品溶液。取不含黃芩的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備，即得陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版《中國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各2 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水(5∶3∶1∶1)的溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾(圖1 C)。

薄荷:取本品30 mL，用石油醚(60～90℃)振搖提取2次，每次30 mL，合并石油醚液，濃縮至2 mL作為供試品溶液。另取薄荷腦對照品，加石油醚(60～90℃)制成每1 mL含2 mg的溶液，作為對照品溶液。取不含薄荷的陰性樣品，按供試品溶液制備方法制備，即得陰性對照品溶液。照薄層色譜法[2005年版《中國藥典》(一部)附錄ⅥB]試驗，吸取上述3種溶液各2 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯－乙酸乙酯(19∶1)的溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%香草醛硫酸溶液－乙醇(1∶4)的混合溶液。在100℃烘5～10 min。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，陰性對照品溶液無干擾(圖1 D)。

圖1 薄層色譜圖

3 討論

辛荑、白芷、薄荷、荊芥、川芎、柴胡含揮發性成分，故用蒸餾法提取芳香水，藥渣與其余蒼耳子等7味加水煎煮，進一步提取其有效成分，方法可靠，提取完全。薄層色譜法鑒別龍膽蒼耳合劑中的龍膽草、川芎、黃芩、薄荷，專屬性強，靈敏度高，重現性好，檢出斑點清楚，為龍膽蒼耳合劑的質量控制提供了可靠的檢測方法。

醫院制劑一般為長期在臨床使用的經驗方，經加工整理形成獨具特色、療效確切的制劑，在保障患者健康方面發揮著難以替代的巨大作用。因此，《藥品管理法》、《醫療機構藥事管理暫行辦法》及《醫療機構制劑配制質量管理規范》均明確規定，醫院應根據醫療、科研的實際需要及時準確地制備制劑。過去，由于醫院條件限制，沒有一套比較完整的質量控制標準，使得醫院制劑的質量和療效難以保證，從而限制了醫院制劑的發展。為了有效保障醫院制劑的安全性、有效性和質量的穩定性、可控性，提升醫院制劑的總體質量，促進醫院制劑的發展，進一步加強對中藥制劑工藝及質量標準的控制及研究十分必要。