布地奈德霧化吸入對(duì)哮喘患兒外周血Th1/Th2平衡的調(diào)節(jié)作用

趙敏芳，吳香君

(1.浙江省臺(tái)州市黃巖區(qū)計(jì)劃生育指導(dǎo)站，浙江 臺(tái)州 318020; 2.浙江省臺(tái)州市第一人民醫(yī)院，浙江 臺(tái)州 318020)

支氣管哮喘是一種以氣道高反應(yīng)性和慢性炎癥性氣道阻塞為特征的變態(tài)反應(yīng)性疾病，許多細(xì)胞因子和炎性介質(zhì)參與了這個(gè)病理過程。近年來的研究證實(shí)，支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)制主要與T1/T2型細(xì)胞因子比例失衡密切相關(guān)[1]，而白細(xì)胞介素4(IL－4)和γ－干擾素(IFN－γ)是維持Th1/Th2細(xì)胞比例的關(guān)鍵分子。布地奈德混懸液屬第2代腎上腺皮質(zhì)激素，有較高的糖皮質(zhì)醇受體結(jié)合力，抗感染效果強(qiáng)，是目前唯一可霧化給藥的吸入型皮質(zhì)激素[2－3]。近年來動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，布地奈德霧化吸入具有調(diào)節(jié)哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡的作用[4]，但對(duì)哮喘患兒外周血Th1/Th2細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用國內(nèi)外鮮有報(bào)道。筆者觀察布地奈德霧化吸入對(duì)哮喘患兒外周血IL－4，IFN－γ，IgE水平的干預(yù)及患兒肺功能的影響，并以健康兒童作對(duì)照，探討其對(duì)外周血Th1/Th2平衡的調(diào)控作用及防治哮喘的作用機(jī)制。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇臺(tái)州市第一人民醫(yī)院兒科門診2009年6月至2010年3月就診急性發(fā)作期的哮喘患兒45例作為治療組，診斷均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科分會(huì)呼吸學(xué)組制訂的哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn);其中男24例，女21例;年齡9～14歲，平均(11.7±1.9)歲;所有患兒在納入研究前4周內(nèi)均無感染性疾病史和免疫抑制劑應(yīng)用史，未曾用過類似白三烯受體拮抗劑、色甘酸鈉、酮替芬或其他抗組胺類藥物，排除合并皮質(zhì)醇增多癥、佝僂病、營(yíng)養(yǎng)不良者，無心、肝、腎等嚴(yán)重的器質(zhì)性疾病。另取正常兒童(本院同期健康體檢兒童)30例作為對(duì)照組，其中男 16例，女 14例;年齡 8～14歲，平均(11.5±1.7)歲。兩組患者在性別、年齡方面比較無顯著性差異(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法

治療組予以布地奈德混懸液(即普米克令舒，阿斯利康制藥有限公司)1 mL/次，采用壓縮霧化吸入機(jī)霧化吸入，2次/d，15～20 min/次，連用1周。分別在治療前后抽取靜脈血檢測(cè)IL－4和IFN－γ，并進(jìn)行日夜間癥狀評(píng)分，而對(duì)照組僅在入組前測(cè)定1次。

1.3 觀察指標(biāo)

IL－4和IFN－γ檢測(cè):用淋巴細(xì)胞分離液從肝素抗凝血分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，1×109/mL細(xì)胞加入植物血凝素(PHA)100 g/L，37℃、5%CO2培養(yǎng) 48 h，收集上清液，用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)IL－4和IFN－γ含量。試劑盒購于法國Daclone公司，嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行操作。

日夜間癥狀評(píng)分:日間癥狀記分0分為無咳嗽、胸悶、氣喘、呼吸困難等癥狀;1分為癥狀輕或間隙出現(xiàn)，僅輕微不適，可能被忽視;2分為癥狀中度或頻繁出現(xiàn)，表現(xiàn)為不適或影響正常活動(dòng)至少1次;3分為癥狀持續(xù)，影響活動(dòng)。夜間癥狀記分0分為夜間無癥狀;1分為憋醒1次或早醒癥狀;2分為憋醒2次以上(包括早醒的癥狀);3分為夜間經(jīng)常憋醒，但可間斷入睡;4分為失眠，端坐呼吸，不能平臥。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組治療前后患兒血漿IL－4和IFN－γ水平變化

治療組患兒治療前培養(yǎng)上清PBMC中IL－4水平明顯高于對(duì)照組，IFN－γ水平明顯低于對(duì)照組(均 P＜0.01)，經(jīng)布地奈德霧化吸入治療1周后，患兒IL－4水平較治療前明顯降低，IFN－γ水平較治療前上升(P＜0.01或 P＜0.05)。結(jié)果見表1。

表1 對(duì)照組與治療組治療前后IL－4和IFN－γ水平比較(±s)

表1 對(duì)照組與治療組治療前后IL－4和IFN－γ水平比較(±s)

注:與對(duì)照組比較，▲P ＜0.01;與治療前比較，＊P＜0.05，#P ＜0.01(下表同)。

對(duì)照組(n=30)治療組(n=45)治療前治療1周后32.25 ± 14.67 68.57 ± 21.63▲39.67 ± 16.81#45.91 ± 19.68 24.82 ± 8.26▲39.52 ± 17.42＊

2.2 治療組患兒治療前后日夜間癥狀評(píng)分

治療組患兒經(jīng)布地奈德霧化吸入治療1周后，日夜間癥狀評(píng)分均較治療前明顯降低(均 P＜0.01)。見表2。

表2 治療組患兒治療前后日夜間癥狀評(píng)分(±s)

表2 治療組患兒治療前后日夜間癥狀評(píng)分(±s)

治療前治療1周后2.8 ± 0.6 0.8 ± 0.3#3.2 ± 0.8 1.0 ± 0.4#

3 討論

隨著免疫學(xué)、分子生物學(xué)的發(fā)展，越來越多的研究證明Th1/Th2失衡引起的免疫功能紊亂在哮喘發(fā)病機(jī)制中起著重要作用[5]。正常情況下，Th1細(xì)胞分泌IL－2和IFN－γ，促進(jìn)Th0細(xì)胞向Th1分化，同時(shí)抑制Th2型細(xì)胞因子的分泌;Th2細(xì)胞分泌IL－4，IL－5，IL－13等，其中IL－4是關(guān)鍵分子，可抑制IFN－γ分泌，促進(jìn)Th0細(xì)胞向Th2分化，促進(jìn)Th2細(xì)胞分泌IL－5和IL－13，從而募集嗜酸性粒細(xì)胞，介導(dǎo)B細(xì)胞分泌IgE，最終導(dǎo)致哮喘的一系列病理生理變化。哮喘時(shí)Th1/Th2型細(xì)胞因子平衡失調(diào)，Th2型細(xì)胞效應(yīng)增強(qiáng)，Th1型細(xì)胞效應(yīng)減弱，尤其是IL－4/IFN－γ的比例與哮喘的進(jìn)展密切相關(guān)，因而常以此比例來間接反映Th1/Th2的比例。調(diào)整Th1/Th2平衡，糾正Th1細(xì)胞向Th2細(xì)胞漂移狀況，使免疫反應(yīng)由Th2型向Th1型逆轉(zhuǎn)，是目前治療哮喘的最有效途徑[6]。

布地奈德是目前臨床應(yīng)用最廣泛的吸入性糖皮質(zhì)激素。吸入的布地奈德首先穿過細(xì)胞膜，與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的激素受體結(jié)合，再穿透細(xì)胞核膜，進(jìn)入細(xì)胞核起到抗炎作用。未與激素受體結(jié)合的布地奈德可與長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸通過酯化形成復(fù)合物而無活性，當(dāng)激素受體從細(xì)胞核內(nèi)出來后，該復(fù)合物又通過酯解作用游離，與激素受體結(jié)合，再進(jìn)入細(xì)胞核而抗炎，客觀上延長(zhǎng)了在肺部的儲(chǔ)留時(shí)間，從而加強(qiáng)了肺部的局部抗炎效果。而這種獨(dú)特作用僅在肺部組織細(xì)胞中發(fā)生，在血中布地奈德會(huì)被迅速清除掉，從而不會(huì)增加全身不良反應(yīng)[2，7]。金小紅等[4]動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，哮喘急性發(fā)作時(shí)存在Th1/Th2失衡，布地奈德霧化吸入可調(diào)節(jié)Th1/Th2的平衡。左志通等[8]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)，Th1/Th2失衡與哮喘發(fā)病密切相關(guān)，布地奈德霧化吸入可通過調(diào)節(jié)Th1/Th2的平衡而治療哮喘。本研究結(jié)果顯示，治療組哮喘患兒治療前培養(yǎng)上清PBMC中IL－4水平明顯高于對(duì)照組，IFN－γ水平明顯低于對(duì)照組。說明哮喘患兒存在著Th1/Th2平衡失調(diào)，免疫狀態(tài)由Th1向Th2“克隆漂移”。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療組經(jīng)布地奈德霧化吸入治療1周后，患兒IL－4水平較治療前明顯降低，IFN－γ水平較治療前上升，同時(shí)患兒日夜間癥狀評(píng)分明顯改善。表明布地奈德霧化吸入能調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞因子平衡，使免疫反應(yīng)由Th2型向Th1型逆轉(zhuǎn)，從而達(dá)到治療哮喘的目的。

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[4]金小紅，李昌崇，陳存國，等.支氣管哮喘大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與γ－干擾素、白細(xì)胞介素－4變化的相關(guān)性及布地奈德干預(yù)對(duì)其的影響[J]. 實(shí)用兒科臨床雜志，2009，24(4):282－284.

[5]韓詩淼，崔雁輝.支氣管哮喘患者外周血單核細(xì)胞因子Th1/Th2失衡的檢測(cè)[J].中國基層醫(yī)藥，2007，14(3):439－440.

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[8]左志通，陳寶華，王 旭，等.布地奈德霧化吸入對(duì)輕中度支氣管哮喘患者Th1/Th2細(xì)胞因子平衡的影響[J].臨床肺科雜志，2010，15(2):177－178.