布地奈德霧化吸入對哮喘患兒外周血Th1/Th2平衡的調節作用

趙敏芳，吳香君

(1.浙江省臺州市黃巖區計劃生育指導站，浙江 臺州 318020; 2.浙江省臺州市第一人民醫院，浙江 臺州 318020)

支氣管哮喘是一種以氣道高反應性和慢性炎癥性氣道阻塞為特征的變態反應性疾病，許多細胞因子和炎性介質參與了這個病理過程。近年來的研究證實，支氣管哮喘的發病機制主要與T1/T2型細胞因子比例失衡密切相關[1]，而白細胞介素4(IL－4)和γ－干擾素(IFN－γ)是維持Th1/Th2細胞比例的關鍵分子。布地奈德混懸液屬第2代腎上腺皮質激素，有較高的糖皮質醇受體結合力，抗感染效果強，是目前唯一可霧化給藥的吸入型皮質激素[2－3]。近年來動物研究發現，布地奈德霧化吸入具有調節哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡的作用[4]，但對哮喘患兒外周血Th1/Th2細胞因子的調節作用國內外鮮有報道。筆者觀察布地奈德霧化吸入對哮喘患兒外周血IL－4，IFN－γ，IgE水平的干預及患兒肺功能的影響，并以健康兒童作對照，探討其對外周血Th1/Th2平衡的調控作用及防治哮喘的作用機制。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇臺州市第一人民醫院兒科門診2009年6月至2010年3月就診急性發作期的哮喘患兒45例作為治療組，診斷均符合中華醫學會兒科分會呼吸學組制訂的哮喘診斷標準;其中男24例，女21例;年齡9～14歲，平均(11.7±1.9)歲;所有患兒在納入研究前4周內均無感染性疾病史和免疫抑制劑應用史，未曾用過類似白三烯受體拮抗劑、色甘酸鈉、酮替芬或其他抗組胺類藥物，排除合并皮質醇增多癥、佝僂病、營養不良者，無心、肝、腎等嚴重的器質性疾病。另取正常兒童(本院同期健康體檢兒童)30例作為對照組，其中男 16例，女 14例;年齡 8～14歲，平均(11.5±1.7)歲。兩組患者在性別、年齡方面比較無顯著性差異(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法

治療組予以布地奈德混懸液(即普米克令舒，阿斯利康制藥有限公司)1 mL/次，采用壓縮霧化吸入機霧化吸入，2次/d，15～20 min/次，連用1周。分別在治療前后抽取靜脈血檢測IL－4和IFN－γ，并進行日夜間癥狀評分，而對照組僅在入組前測定1次。

1.3 觀察指標

IL－4和IFN－γ檢測:用淋巴細胞分離液從肝素抗凝血分離外周血單個核細胞(PBMC)，1×109/mL細胞加入植物血凝素(PHA)100 g/L，37℃、5%CO2培養 48 h，收集上清液，用雙抗體夾心ELISA法檢測IL－4和IFN－γ含量。試劑盒購于法國Daclone公司，嚴格按試劑盒說明書進行操作。

日夜間癥狀評分:日間癥狀記分0分為無咳嗽、胸悶、氣喘、呼吸困難等癥狀;1分為癥狀輕或間隙出現，僅輕微不適，可能被忽視;2分為癥狀中度或頻繁出現，表現為不適或影響正常活動至少1次;3分為癥狀持續，影響活動。夜間癥狀記分0分為夜間無癥狀;1分為憋醒1次或早醒癥狀;2分為憋醒2次以上(包括早醒的癥狀);3分為夜間經常憋醒，但可間斷入睡;4分為失眠，端坐呼吸，不能平臥。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 兩組治療前后患兒血漿IL－4和IFN－γ水平變化

治療組患兒治療前培養上清PBMC中IL－4水平明顯高于對照組，IFN－γ水平明顯低于對照組(均 P＜0.01)，經布地奈德霧化吸入治療1周后，患兒IL－4水平較治療前明顯降低，IFN－γ水平較治療前上升(P＜0.01或 P＜0.05)。結果見表1。

表1 對照組與治療組治療前后IL－4和IFN－γ水平比較(±s)

表1 對照組與治療組治療前后IL－4和IFN－γ水平比較(±s)

注:與對照組比較，▲P ＜0.01;與治療前比較，＊P＜0.05，#P ＜0.01(下表同)。

對照組(n=30)治療組(n=45)治療前治療1周后32.25 ± 14.67 68.57 ± 21.63▲39.67 ± 16.81#45.91 ± 19.68 24.82 ± 8.26▲39.52 ± 17.42＊

2.2 治療組患兒治療前后日夜間癥狀評分

治療組患兒經布地奈德霧化吸入治療1周后，日夜間癥狀評分均較治療前明顯降低(均 P＜0.01)。見表2。

表2 治療組患兒治療前后日夜間癥狀評分(±s)

表2 治療組患兒治療前后日夜間癥狀評分(±s)

治療前治療1周后2.8 ± 0.6 0.8 ± 0.3#3.2 ± 0.8 1.0 ± 0.4#

3 討論

隨著免疫學、分子生物學的發展，越來越多的研究證明Th1/Th2失衡引起的免疫功能紊亂在哮喘發病機制中起著重要作用[5]。正常情況下，Th1細胞分泌IL－2和IFN－γ，促進Th0細胞向Th1分化，同時抑制Th2型細胞因子的分泌;Th2細胞分泌IL－4，IL－5，IL－13等，其中IL－4是關鍵分子，可抑制IFN－γ分泌，促進Th0細胞向Th2分化，促進Th2細胞分泌IL－5和IL－13，從而募集嗜酸性粒細胞，介導B細胞分泌IgE，最終導致哮喘的一系列病理生理變化。哮喘時Th1/Th2型細胞因子平衡失調，Th2型細胞效應增強，Th1型細胞效應減弱，尤其是IL－4/IFN－γ的比例與哮喘的進展密切相關，因而常以此比例來間接反映Th1/Th2的比例。調整Th1/Th2平衡，糾正Th1細胞向Th2細胞漂移狀況，使免疫反應由Th2型向Th1型逆轉，是目前治療哮喘的最有效途徑[6]。

布地奈德是目前臨床應用最廣泛的吸入性糖皮質激素。吸入的布地奈德首先穿過細胞膜，與細胞質內的激素受體結合，再穿透細胞核膜，進入細胞核起到抗炎作用。未與激素受體結合的布地奈德可與長鏈不飽和脂肪酸通過酯化形成復合物而無活性，當激素受體從細胞核內出來后，該復合物又通過酯解作用游離，與激素受體結合，再進入細胞核而抗炎，客觀上延長了在肺部的儲留時間，從而加強了肺部的局部抗炎效果。而這種獨特作用僅在肺部組織細胞中發生，在血中布地奈德會被迅速清除掉，從而不會增加全身不良反應[2，7]。金小紅等[4]動物研究發現，哮喘急性發作時存在Th1/Th2失衡，布地奈德霧化吸入可調節Th1/Th2的平衡。左志通等[8]通過臨床研究發現，Th1/Th2失衡與哮喘發病密切相關，布地奈德霧化吸入可通過調節Th1/Th2的平衡而治療哮喘。本研究結果顯示，治療組哮喘患兒治療前培養上清PBMC中IL－4水平明顯高于對照組，IFN－γ水平明顯低于對照組。說明哮喘患兒存在著Th1/Th2平衡失調，免疫狀態由Th1向Th2“克隆漂移”。本研究結果發現，治療組經布地奈德霧化吸入治療1周后，患兒IL－4水平較治療前明顯降低，IFN－γ水平較治療前上升，同時患兒日夜間癥狀評分明顯改善。表明布地奈德霧化吸入能調節Th1/Th2細胞因子平衡，使免疫反應由Th2型向Th1型逆轉，從而達到治療哮喘的目的。

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[3]Mirici A，Meral M，Akgun M.Comparison of the efficacy of nebulised budesonide with parenteral corticosteroids in the treatment of acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease[J].Clin Drug Invest，2003，23(1):55－62.

[4]金小紅，李昌崇，陳存國，等.支氣管哮喘大鼠血管內皮生長因子與γ－干擾素、白細胞介素－4變化的相關性及布地奈德干預對其的影響[J]. 實用兒科臨床雜志，2009，24(4):282－284.

[5]韓詩淼，崔雁輝.支氣管哮喘患者外周血單核細胞因子Th1/Th2失衡的檢測[J].中國基層醫藥，2007，14(3):439－440.

[6]Selroos O，Edsbacker S，Hultquist C.Once－daily inhaled budesonide for the treatment of asthma:clinical evidence and pharmacokinetic explanation[J].J Asthma，2004，41(8):771－790.

[7]Vaghi A，Berg E，Liljedahl S，et al.In vitro comparison of nebulised budesonide (PulmicortRespules) and beclomethasone dipropionate(Clenil per Aerosol)[J].Pulm Pharmacol Ther，2005，18(2):151－153.

[8]左志通，陳寶華，王 旭，等.布地奈德霧化吸入對輕中度支氣管哮喘患者Th1/Th2細胞因子平衡的影響[J].臨床肺科雜志，2010，15(2):177－178.