高效液相色譜法測(cè)定生物黏附劑中辛苯醇醚含量

劉苗苗，趙 齊，沈麗琳

(1.天津市計(jì)劃生育研究所，天津 300191; 2.天津大學(xué)化學(xué)工程聯(lián)合國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300072)

外用生物黏附劑主要是由辛苯醇醚(octoxynol－9)和聚甲酚磺醛組成的一種外用殺精制劑，具有避孕、殺菌雙重作用。由于生物黏附劑具有生物相容性的特點(diǎn)，在廣大婦女使用過程中不僅大大降低了避孕的失敗率，同時(shí)也減少了刺激等副作用[1]。筆者采用高效液相色譜法測(cè)定制劑中辛苯醇醚的含量，以便控制本制劑質(zhì)量[2]。

1 儀器與試藥

LC－20A型高效液相色譜儀(Shimadzu)，包括LC－20AT型雙泵，SPD－20A型紫外檢測(cè)器，LCsolution色譜工作站。辛苯醇醚對(duì)照品(北京阿法埃沙化學(xué)有限公司，批號(hào)為47750USP);甲醇為色譜純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:Shimadzu VP－ODS柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:甲醇－ 水(90∶10);檢測(cè)波長(zhǎng):276 nm;流速:1.0 mL/min;進(jìn)樣量:20 μL。在此色譜條件下，辛苯醇醚的保留時(shí)間為 7.673 min，陰性對(duì)照品溶液對(duì)辛苯醇醚的測(cè)定無干擾，理論板數(shù)按辛苯醇醚峰計(jì)不低于3 500。色譜見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

精密稱取辛苯醇醚對(duì)照品8.16 mg，置10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密稱取生物黏附劑37.2 mg，置50 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。按處方取不含辛苯醇醚的陰性對(duì)照品，照供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:取質(zhì)量濃度為0.816 g/L的辛苯醇醚對(duì)照品溶液 1.25，5，10，20，30 μL 進(jìn)樣。結(jié)果進(jìn)樣量與峰面積的線性范圍為 1.02 ～24.48 μg，回歸方程為 Y=0.125 ×106X+0.018 ×106，r=0.999 6(n=5)。

精密度試驗(yàn):取同一對(duì)照品溶液，依法重復(fù)進(jìn)樣6次，每次20μL，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。結(jié)果的 RSD為0.10%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液，室溫保存，分別于配制后0，2，4，6，8，10 h 進(jìn)樣 20 μL 測(cè)定。結(jié)果的 RSD 為 1.01%(n=6)。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批樣品，依法制備6份供試品溶液并測(cè)定。結(jié)果辛苯醇醚的平均含量為2.186%，RSD為1.32%(n=6)。

加樣回收試驗(yàn):精密稱取已知含量的樣品6份，分別加入定量的辛苯醇醚對(duì)照品，依法測(cè)定。結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測(cè)定

取辛苯醇醚凝膠制劑3批，每個(gè)批號(hào)平行測(cè)定3份，按供試品溶液制備方法制備溶液并進(jìn)樣分析。結(jié)果批號(hào)為20070320，20070509，20071114的3批樣品中辛苯醇醚平均含量分別為21.48，21.42，21.86 mg/g(n=3)。

表1 辛苯醇醚加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

3 討論

辛苯醇醚生物黏附劑為復(fù)方制劑，但其陰性對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果表明，陰性對(duì)照品對(duì)測(cè)定無明顯干擾。在分析過程中，對(duì)于辛苯醇醚復(fù)方制劑的溶劑選擇，經(jīng)過試驗(yàn)認(rèn)為甲醇比純水更適合。此外，由于檢測(cè)波長(zhǎng)、流動(dòng)相系統(tǒng)及流動(dòng)相比例的合理選擇，使試驗(yàn)得到了較好的分離效果。3批復(fù)方制劑的含量結(jié)果測(cè)定表明，高效液相色譜法是本復(fù)方制劑質(zhì)量控制較理想的手段[3]，且操作簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:51.

[2]黎 霜，饒偉文.HPLC法測(cè)定雙保險(xiǎn)避孕套中的壬苯醇醚含量[J].中國(guó)藥師，2004，7(9):688－690.

[3]高振宏，吉曉陽.高效液相色譜法測(cè)定壬苯醇醚的含量[J].山東醫(yī)藥工業(yè)，2000，19(4):11－13.