青藤祛濕外敷散的長期毒性試驗研究

呂邵娃，李永吉，孫 凌，郭玉巖，王 銳，田世超

(黑龍江中醫藥大學藥學院，哈爾濱150040)

青藤祛濕外敷散是以鹽酸青藤堿為主要成分，加適宜輔料，通過PVA薄膜及紙塑壓封包裝的一種新型外敷散劑.鹽酸青藤堿具有抗炎、鎮痛、免疫抑制、降壓、抗心律失常等藥理作用，用于治療各種風濕關節疼痛等各種風濕病及抗心律失常.為了進一步考察該藥的安全性，根據長期毒性試驗要求［1］，并參考相關文獻［2－4］，本文對其進行了家兔的長期毒性實驗，現報道如下.

1 材料和方法

1.1 實驗動物

50只大耳白家兔，(2.0±0.25)kg，雌雄各半，由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供.

1.2 實驗藥物

青藤祛濕外敷散由黑龍江中醫藥大學藥劑實驗室自備.

1.3 實驗方法

健康家兔分籠飼養，每籠1只飼養1周后，按性別隨機分成5組，分別為1個賦形劑組和4個實驗組，4個實驗組:完整皮膚兩個劑量(高、低)組和破損皮膚兩個劑量(高、低)組，每組10只.制備完整皮膚:在給藥前24 h將家兔背部脊柱兩側去毛，去毛面積約為150 cm2.去毛后24 h檢查皮膚是否因去毛而受傷，選皮膚未受傷家兔進行試驗.制備破損皮膚:按完整皮膚制備方法去毛、消毒皮膚后，用砂紙劃破皮膚，使皮膚出現滲血為度.

實驗組分別給予高劑量、低劑量青藤祛濕外敷散，對照組給予賦形劑.將供試品均勻涂于脫毛區，以醫用滅菌紗布兩層覆蓋后再用膠帶加以固定.每日用藥1次.連續用藥8周后，各組處死動物6只，剩余動物在停藥后繼續觀察2周后處死，所有動物每日檢查用藥處皮膚變化，同時觀察動物是否有全身中毒反應，包括精神狀態、飲食變化、糞便性狀、黏膜情況及運動情況，每周稱體重1次.實驗結束時解剖觀察全身內臟的情況.取心、肺、肝、脾、腎、腦、腎上腺、胰腺、前列腺、睪丸(包括附睪)或卵巢(包括子宮)、用藥部皮膚稱重，計算臟器指數，并與對照組比較.

一般觀察，體重每周稱重1次.血液學、血液生化及病理組織學檢查分別與給藥后8周及停藥2周后各測1次.

2 實驗結果

2.1 一般情況

賦形劑組及各實驗組在8周后和停藥2周期間，無一例動物死亡，食量、大小便、行為活動、皮膚和黏膜、大小便與賦形劑組比較均無顯著性差異(P＞0.05)，各組動物隨著試驗時間的延長，體重也逐周增加，增長速度接近，結果見表1.

表1 青藤祛濕外敷散對家兔體重增長的影響±S)

表1 青藤祛濕外敷散對家兔體重增長的影響±S)

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2.2 血液生化

長期外用青藤祛濕外敷散的家兔，分別測血糖、尿素氮、甘油三酯、堿性磷酸酶、肌酐、谷氨酰轉酞酶、谷丙轉氨酶、總膽紅素、膽固醇、谷草轉氨酶指標.與賦形劑組比較均無顯著性差異(P＞0.05).結果見表2、3.

表2 青藤祛濕外敷散對家兔生化指標的影響S)(給藥8周末)

表2 青藤祛濕外敷散對家兔生化指標的影響S)(給藥8周末)

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表3 青藤祛濕外敷散對家兔生化指標的影響)(恢復2周)

表3 青藤祛濕外敷散對家兔生化指標的影響)(恢復2周)

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2.3 血液常規

長期外用青藤祛濕外敷散的家兔，分別測得血常規(白細胞計數、淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞、紅細胞計數、血紅蛋白、血小板計數、凝血酶原時間、凝血酶時間等).與賦形劑組比較均無顯著性差異(P＞0.05).結果見表4、5.

表4 青藤祛濕外敷散對家兔血常規指標的影響)(給藥8周末)

表4 青藤祛濕外敷散對家兔血常規指標的影響)(給藥8周末)

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表5 青藤祛濕外敷散對家兔血常規指標的影響)(恢復2周)

表5 青藤祛濕外敷散對家兔血常規指標的影響)(恢復2周)

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2.4 對家兔臟器系數的影響

各劑量組用藥后肉眼觀察的形態、位置、色澤、硬度等均未見藥物引起的異常.各組臟器系數與賦形劑組比較均無顯著性差異(P＞0.05).

2.5 對臟器組織的影響

組織病理學檢查結果顯示:長期外用青藤祛濕外敷散的家兔心、肺、肝、脾、腎、腦、腎上腺、胰腺、前列腺、睪丸(包括附睪)或卵巢(包括子宮)、用藥部皮膚與賦形劑組相似，未見因藥物引起得實質細胞變性、壞死、間質炎癥等毒性病變，停藥后也未見新出現的遲發性病變.

3 結語

本實驗觀察了青藤祛濕外敷散的長期毒性反應.結果表明，使用青藤祛濕外敷散后，各組動物一般體征良好，體重增長正常，血液學、血液生化指標、組織病理學檢查結果與賦形劑組比較均無顯著性差異.由此可知，青藤祛濕外敷散經皮使用對家兔無長期蓄積性的毒性作用，是一種可以安全使用的外用制劑.本實驗結果和各項指標可為今后臨床用藥提供重要的依據.

［1］ 徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實驗方法學［M］.北京:人民衛生出版社，2002:232－233.

［2］ 金可可，葉天申，蔣松鶴，等.類風關巴布劑毒理學研究［J］.中國中醫藥信息雜志，2004，l1(3):216－217.

［3］ 莫遺盛，王冬梅，黃 茜，等.傷必止對家兔的長期毒性實驗研究［J］.時珍國醫國藥，2008，19(7):1712－1713.

［4］ 劉 悅，靳洪濤，李 偃，等.精苓消瘤膠囊對Beagle犬的長期毒性研究［J］.哈爾濱商業大學學報:自然科學版，2010，26 (2):129－135.