香青蘭酚酸性化學成分的研究

吳小軍，宋建曉，趙愛華，賈 偉

上海交通大學藥學院，上海200240

香青蘭酚酸性化學成分的研究

吳小軍，宋建曉，趙愛華*，賈 偉

上海交通大學藥學院，上海200240

從香青蘭(Dracocephalum moldavica L.)乙醇提取物乙酸乙酯部位中分離得到8個酚酸性化合物，經過理化性質、波譜分析及文獻對照，分別鑒定為amburoside A(1)、阿魏酸(2)、咖啡酸(3)、迷迭香酸(4)、迷迭香酸甲酯(5)、木犀草素(6)、山奈酚(7)和β-胡蘿卜苷(8)。其中化合物1～5為首次從該植物中分離得到。

香青蘭;酚酸性化學成分

香青蘭(Dracocephalum moldavica L.)是唇形科青蘭屬植物，一年生草本植物，高30～110 cm，花期7月，果期8月。我國資源十分豐富，主要分布于華北、東北、西北地區，新疆以南疆和東疆栽培較多［1］。香青蘭以全草干燥地上部分入藥，有益心護腦、保肝健胃、增強感覺力、補充保護力、增益智慧力、開通腦中閉塞等功效，在維吾爾醫學和民間廣泛用于治療冠心病及血液質旺盛(高血壓)、寒性神經性頭疼、寒性感冒、氣管炎等疾病。全草化學成分主要含揮發油、黃酮、萜類、胡蘿卜素、微量元素、蛋白質、氨基酸、多肽等。目前，關于香青蘭的化學成分研究報道較少，其成分研究主要為揮發油、黃酮類和三萜類等物質，而對酚酸性的化學成分研究較少，有文獻報道，香青蘭各部位中酚類部分具有較強的抗氧化性質，且通過定性定量分析，其中迷迭香酸含量較多［2］。為充分研究利用這一藥用植物資源，本文對香青蘭酚酸性成分進行進一步研究，從中分離得到了8個化合物，分別為amburoside A(1)、阿魏酸(ferulic acid，2)、咖啡酸(caffeic acid，3)、迷迭香酸(rosmarinic acid，4)、迷迭香酸甲酯(methyl rosmarinate，5)、木犀草素(luteolin，6)、山奈酚(kaempferol，7)和β-胡蘿卜苷(β-daucosterol，8)。其中化合物1～5為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bmker AM 400核磁共振儀(Bmker公司)，溶劑DMSO和 Pyridine，TMS作內標;TOF-MS質譜儀(Waters公司);X4數字顯示顯微熔點測定儀(北京泰克儀器有限公司，溫度未經校正);柱層析用硅膠和薄層色譜硅膠GF254(青島海洋化工有限公司); Sephadex LH-20(pharmacia公司);所用試劑均為分析純。

藥材于2007年5月采自內蒙古，經本院劉忠副教授鑒定為唇形科青蘭屬植物香青蘭(Dracocephalum moldavica L.)，標本號:SJTU-20061010，存放于上海交通大學藥學院。

2 提取與分離

干燥的香青蘭全草粗粉8 kg，用95%乙醇加熱回流提取3次，合并提取液，減壓濃縮至小體積水液，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，得到石油醚、乙酸乙酯和水層萃取物。取其中乙酸乙酯萃取液減壓濃縮，得浸膏160 g。將乙酸乙酯部位用硅膠柱層析方法進行粗分，依次用氯仿-甲醇(20∶1、10∶1、8∶1、4∶1、0∶1)梯度洗脫，所得流分用TLC檢測并將相同流分合并，主要得到A-E五部分。各部分再反復經過硅膠和Sephadex LH-20柱層析分離純化。其中，B部分經硅膠柱層析，氯仿-甲醇(20∶1～10∶1)反復梯度洗脫及Sephadex LH-20柱色譜，分離得到2(5 mg)。C部分用硅膠柱層析進行分離，以氯仿-甲醇(20∶1～8∶1)為洗脫劑反復梯度洗脫，從洗脫液中析出結晶，經純化得到6(8 mg)，其余部分通過Sephadex LH-20進一步分離，分別得到5(5 mg)和7(5 mg); D部分中通過重結晶得到8(100 mg);E部分用硅膠柱層析進行分離，以氯仿-甲醇(10∶1～0∶1)為洗脫劑反復梯度洗脫，之后用Sephadex LH-20進行純化，得到化合物1(1 g)，3(10 mg)，4(11 mg)。

3 結構鑒定

化合物1 白色無定型粉末，mp.195～197℃; ESI-MS(neg.)m/z:421［M-H］-;ESI-MS(pos.)m/ z:445［M+Na］+;1H NMR(Pyridine-d5，400 MHz) δ:8.16(1H，d，J=2.1，H-2')，7.89(1H，dd，J=8.3，2.1 Hz，H-6')，7.43(2H，d，J=8.0 Hz，H-2，6)，7.34(2H，d，J=8.0 Hz，H-3，5)，7.30(1H，d，J=8.3 Hz，H-5')，5.68(1H，d，J=7.3 Hz，glu-H)，5.36 (2H，s，-OCH2);13C NMR(Pyridine-d5，100 MHz)δ: 166.7(s，C-7')，158.4(s，C-4)，152.7(s，C-4')，147.1(s，C-3')，130.6(s，C-1)，130.2(d，C-2，6)，123.1(d，C-1')，122.0(s，C-6')，117.8(d，C-2)，116.8(d，C-3，5)，116.2(d，C-5')，102.0(s，glu-C-1)，79.0(glu-C-3)，78.5(glu-C-5)，74.9(glu-C-2)，71.2(glu-C-4)，66.1(C-7)，62.3(glu-C-6).以上數據與文獻［3］報道的基本吻合，故化合物被鑒定為amburoside A。

化合物2 白色針狀結晶，mp.170～173℃; ESI-MS(neg.)m/z:193［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:12.10(1H，s，9-COOH)，9.53(1H，s，4-OH)，7.47(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)，7.27(1H，d，J=1.7 Hz，H-2)，7.08(1H，dd，J=8.0，1.7 Hz，H-6)，6.77(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.34(1H，d，J =15.9 Hz，H-8)，3.81(3H，s，-OCH3);13C NMR (DMSO-d6，100 MHz)δ:167.94(C-9)，149.05(C-3)，147.88(C-4)，144.46(C-7)，125.74(C-1)，122.79(C-6)，115.59(C-2)，115.48(C-5)，111.13 (C-8)，55.66(-OCH3).以上數據與文獻［4］報道的基本吻合，故化合物被鑒定為阿魏酸。

化合物3 黃色粉末，mp.223～225℃;ESI-MS (neg.)m/z:179［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:7.57(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)，7.05(1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，6.95(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-6)，6.80(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.25(1H，d，J =16.0 Hz，H-8);13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ: 171.01(C-9)，149.51(C-4)，147.02(C-7)，146.78 (C-3)，127.79(C-1)，122.81(C-3)，116.50(C-5)，115.52(C-8)，115.12(C-2).以上數據與文獻［5］報道的基本吻合，故化合物被鑒定為咖啡酸。

化合物4 白色粉末，mp.196～198℃;ESI-MS (neg.)m/z:359［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:7.49(1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，6.97(1H，d，J=1.5 Hz，H-2)，6.89(1H，d，J=1.5 Hz，H-2')，6.88(1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6)，6.70(1H，d，J= 8.0 Hz，H-5)，6.64(1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-5')，6.55(1H，d，J=8.0 Hz，H-6')，6.19(1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，5.12(1H，brd，J=8.5 Hz，H-8')，3.01 (1H，dd，J=14.0，3.5 Hz，H-7'α)，2.94(1H，dd，J= 14.0，8.5 Hz，H-7'β);13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ:173.51(C-9')，168.38(C-9)，149.58(C-4)，147.74(C-7)，146.60(C-3)，146.01(C-3')，143.11(C-4')，129.21(C-1')，127.61(C-1)，123.12 (C-6)，121.81(C-6')，117.52(C-2')，116.48(C-5')，116.31(C-5)，115.19(C-2)，114.31(C-8)，74.49(C-8')，37.78(C-7').以上數據與文獻［6］報道的基本吻合，故化合物被鑒定為迷迭香酸。

化合物5 黃色粉末，mp.198～200℃;ESI-MS (neg.)m/z:373［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:7.47(1H，d，J=15.9，H-7)，7.05(1H，d，J =1.9 Hz，H-6)，7.01(1H，brs，H-2)，6.76(1H，d，J =8.0 Hz，H-5)，6.64(1H，brs，H-2')，6.62(1H，d，J =7.0 Hz，H-6')，6.49(1H，d，J=2.0 Hz，H-5')，6.24(1H，d，J=15.9 Hz，H-8)，5.10(1H，d，J=5.3 Hz，H-8)，3.62(3H，s，OCH3)，2.95(2H，m，H-7');13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ:169.87(C-9')，165.81(C-9)，148.69(C-4)，146.29(C-7)，145.56 (C-3)，144.10(C-3')，126.59(C-1')，125.24(C-1)，121.62(C-6)，120.01(C-6')，116.63(C-5')，115.72(C-5)，115.40(C-8)，114.93(C-2')，112.81 (C-2)，72.74(C-8')，51.92(OCH3)，48.55(C-4')，36.15(C-7')。以上數據與文獻［7］報道的基本吻合，故化合物被鑒定為迷迭香酸甲酯。

化合物6 黃色無定型粉末，mp.203～205℃; ESI-MS(neg.)m/z:285［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:12.96(1H，s，5-OH)，6.65(1H，s，H-3)，6.17(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，6.43(1H，d，J =2.1 Hz，H-8)，7.41(1H，dd，J=8.4，2.0 Hz，H-6')，7.39(1H，J=2.0 Hz，H-2')，6.87(1H，d，J= 8.4 Hz，H-5');13C NMR(DMSO-d6，100 MHz):δ: 181.57(C-4)，164.07(C-2)，163.83(C-7)，161.41 (C-5)，157.23(C-9)，149.63(C-4')，145.67(C-3')，121.46(C-1')，118.90(C-6')，115.95(C-5')，113.31(C-2')，103.63(C-10)，102.80(C-3)，98.76 (C-6)，93.76(C-8).以上數據與文獻［8］報道的基本吻合，故化合物被鑒定為木犀草素。

化合物7 黃色無定型粉末，mp.275～277℃; ESI-MS(neg.)m/z:285［M-H］-;1H NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ:12.96(1H，s，5-OH)，10.76(1H，S，3-OH)，10.09(1H，S，7-OH)，9.38(1H，S，4'-OH)，8.03(2H，d，J=8.8 Hz，H-2'，6')，6.91(2H，d，J= 8.8 Hz，H-3'，5')，6.42(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.18(1H，d，J=2.1 Hz，H-6);13C NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ:175.88(C-4)，163.87(C-7)，160.69 (C-9)，159.17(C-4')，156.15(C-5)，146.80(C-2)，136.63(C-3)，129.48(C-2'，C-6')，121.64(C-1')，115.41(C-3';C-5')，103.02(C-10)，98.18(C-6)，93.45(C-8)。以上數據與文獻［8］報道的基本吻合，故化合物被鑒定為山奈酚。

化合物8 白色粉末，5%硫酸乙醇溶液顯色呈紫紅色，Molish反應陽性。與胡蘿卜苷標準品混合點樣，經TLC對照分析，確定該化合物為胡蘿卜苷。

1 Liu YM(劉勇民).維吾爾藥志(上).Xinjiang:Xinjiang keji weisheng chubanshe，1999:405-407.

2 Keyvan D，Damien D，et al.Chemical composition and antioxidative activity of Moldavian balm(Dracocephalum moldavica L.)extracts.LWT，2007，40:1655-1663.

3 Jose ?，Bravo B，et al.Bioactive phenolic glycosides from Amburana cearensis.Phytochemistry，1999，50:71-74.

4 Zheng XK(鄭曉珂)，Li Q(李欽)，Feng WS(馮衛生). Studies on water-soluble chemical constituents of Rabdosia rubescens.Nat Prod Res Dev(天然產物研究與開發)，2004，16:300-302.

5 Shi SY(施樹云)，Zhou HH(周宏灝)，et al.Chemical constituents from Neo-Taraxacum siphonathum.China J Chin Mat Med(中國中藥雜志)，2009，34:1002-1004.

6 Yu ZB(于志斌)，Wu X(吳霞)，Ye YH(葉蘊華)，et al. Chemical constituents of Glechoma longituba.Nat Prod Res Dev(天然產物研究與開發)，2008，20:262-264.

7 Duan LX(段禮新)，Yu ZJ(余正江)，et al.Chemical constituents in the fraction of calming cough and asthma of Sanziyangqintang.Shenyang Yaoke Daxue Xuebao(沈陽藥科大學學報).2007，24:679-681.

8 Gu HF(古海鋒)，Chen RY(陳若蕓)，et al.Studies on chemical constituents in herbs of Dracocephalum moldavica. China J Chin Mat Med(中國中藥雜志)，2004，29:232-234.

Phenolic Acid Constituents from Dracocephalum moldavica

WU Xiao-jun，SONG Jian-xiao，ZHAO Ai-hua*，JIA Wei
School of Pharmacy，Shanghai Jiao Tong University，Shanghai，200240 China

To investigate the Phenolic acid constituents of Dracocephalum moldavica L，eight compounds were isolated and purified by silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography.The compound structures were identified as amburoside A(1)，ferulic acid(2)，caffeic acid(3)，rosmarinic acid(4)，methyl rosmarinate(5)，luteolin(6)，kaempferol(7)，and β-daucosterol(8)based on their spectral data.Among them，compounds 1-5 were obtained from this plant for the first time.

Dracocephalum moldavica L;phenolic acid constituents

1001-6880(2011)03-0446-03

2009-09-29 接受日期:2009-11-25

上海市科委中藥創新計劃項目(07DZ19715)

*通訊作者 Tel:86-21-34204829;E-mail:zhah@sjtu.edu.cn

Q946.91;R284.2

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